蛋白质的理化性质

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六、蛋白质的理化性质

1、两性解离 溶液的pH大于某一蛋白质的等电点时,该蛋白质颗粒带负电荷,反之带正电。

R-CH-COOH→等电点(PI)→R-CH-COO— ▕ 净电荷为0 ▕ NH3+ NH2 2、胶体性质

(1)颗粒表面电荷(2)水化膜

胶体性质由这两个因素而来,去除这两个因素则蛋白质便容易析出。

3、蛋白质变性:在某些物理和化学因素下,其特定的空间构象被破坏,也即有序的空间结构变成无序的空间结构。(破坏了共价键,二硫键) 蛋白质水解才是破坏了肽键。

·复性:蛋白质在去除变性因素后恢复至原构象的现象。

(变形的蛋白质易于沉淀,但也不一定沉淀;有时蛋白质虽沉淀,但并未变性;蛋白质在变性因素去除后,也可能不复性)

·凝固:加热使蛋白质变性后进一步发展的不可逆结果,使之变成坚固的凝块。 4、☆特征吸收峰:280nm波长处 5、变色反应

(1)茚三酮(2)双缩脲

七、蛋白质实验方法 1透析、超滤 2盐析→变性

3电泳:十二烷基磺酸钠(SDS)→(加入至)蛋白质样与聚丙烯酰胺凝胶系统→蛋白质颗粒表面覆盖SDS→分子间电荷差异消失→使蛋白质在电场中泳动速率仅与蛋白质颗粒大小有关 4层析

5超速离心 6分析序列

(1)分析已纯化蛋白残基组成(2)测定多肽链N端、C端均为何种残基。

(3)把肽链水解为段,进行分析(4)测定各肽段氨基序列,一般用Edman降解法 (5)一般用数种水解法,分析出各肽段中氨基酸顺序。 7结构测定

圆二色光谱→二级结构 X射线衍射 ↘

核磁共振技术→三维空间结构

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