发布时间 : 星期一 文章现代生物技术概论复习题更新完毕开始阅读
（1）反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子，合成该分子的第一条链时，使用
的模板是细胞质中的信使RNA，原料是四种脱氧核苷酸，所用的酶是 逆转录酶
（2）开始合成的反义基因第一条链是与模板RNA连在一起的杂交双链，通过加热去除RNA，然后再以反义基因第一条链为模板合成第二条链，这样一个完整的反义基因被合成。若要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因，所用复制方式为 半保留复制
（3）如果指导番茄合成PG的信使RNA的碱基序列是—A—U—C—C—A—G—G—U—C—，那么，PG反义基因的这段碱基对序列是 —T—A—G—G—T—C—C—A—G— —A—T—C—C—A—G—G—T—C—
（4）将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞原生质体的运输工具是质粒（或运载体、病
毒），该目的基因与运输工具相结合需要使用的酶有限制性内切酶和DNA连接酶，在受体细胞中该基因指导合成的最终产物是（反义）RNA
40、为什么蛋白质化学方面的研究又出现了新高潮？今后蛋白质化学的研究将向哪三个方向发展？
答：1） 遗传工程的产品开拓依赖于新蛋白质的发现；
2） 遗传工程的下游技术有赖于蛋白质的新的分离、纯化技术的发展；
3） 医学上和商业上发现新分蛋白质推动了蛋白质化学研究技术的不断发展。 今后蛋白质化学的主要研究方向有：
1） 蛋白质的研究与核酸研究相结合；2） 蛋白质化学与量子化学相结合；
3） 新功能蛋白质的寻找、原有蛋白质新功能的揭示、新的研究蛋白质技术的开拓。 41、药物的设计一般包括哪些步骤？
答：1）弄清药物要作用的靶蛋白或DNA的三维结构。
2） 认真分析其立体模型中什么地方可遇药物结合，其位点基因是什么，与药物结合时可采
取什么化学键或其他什么力量结合。
3）对药物的化学本质进行设计，是否要求蛋白质类药物还是非蛋白质类药物。 4）对所涉及的药物进行合成。
5）对所合成的药物在计算机上预筛选，观察是否与作用对象匹配。 6）对所匹配的合成药物进行药效试验。
7）进一步对所合成的药物进行改造，增强其稳定性和溶解性。 8）进行初步的临床试验。
42、人工种子的应用前景如何？ 需要解决那些问题?
答：随着研究的深入，限制其在商业应用中的问题将逐步得到解决，实现其诱人的应用前景，必将对作物遗传育种、良种繁育和栽培等起到巨大的推进作用。大需要解决如下问题： ①贮藏问题——人工种子含水量大，常温下易萌发，也易失水干燥。②体细胞无性系变异。 ③成本问题——目前限制人工种子的商业利用的最大问题是成本。④繁殖体生产技术和人工种皮材料的研制。
43、什么是细胞核移植技术？克隆的基本方法有哪些？
答：核移植技术——又称细胞质工程、核质杂交，是利用显微操作技术将称为供体的一种动物细胞的细胞核移植到称为受体的同种或异种的另一种细胞中，或者将两个细胞的细胞核（或细胞质）进行交换，形成核质杂种，并使受体细胞得以继续分裂和发育的方法。 （1）胚胎干细胞核移植；（2）胚胎细胞核移植；（3）胎儿成纤维细胞核移植；（4）体细胞核移植
44、简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。 答: 1) 亲本细胞的准备（致敏B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备） 2) 细胞融合形成杂交瘤细胞。
3) 杂交瘤细胞的筛选（采用HAT（含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)）选择性培养基）。
4) 可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选：对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测，筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞。检测方法：放射免疫测定、酶联免疫技术测定等。
5) 杂交瘤细胞的克隆化培养：有限稀释法或软琼脂平板法。 45、影响原生质体培养的因素有哪些？简述原生质体培养的程序。
答：影响原生质体培养的因素有：（1）原生质体的活力 （2）原生质体起始密度 （3）细胞壁再生速度 （4）培养基营养（5）培养条件（6）供试材料的基因型和生理状态 原生质体培养的步骤： 原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——原生质体胞壁再生——细胞团形成——器官形成、植株再生。 46、简述试述植物细胞融合的程序。
答：1）、植物原生质体分离（l）双亲原生质体制备（2）采用酶法分离原生质体（3）影响原生质体活力的各种因素
2）、 原生质体纯化（1）筛网过滤（2）采用不连续梯度法纯化原生质体（3）质膜稳定剂和渗透压稳定剂
3）、原生质体融合（l）盐融合法（2）高钙和高pH值法（3）聚乙二醇法（4）聚乙二醇和高钙、高pH值结合法（5）电融合法
4）、细胞杂种的选择（1）互补选择法：白化互补、遗传互补、营养互补（2）可见标志选择法：凹穴培养皿法、微吸管法
5）、愈伤组织形成器官分化植株再生（1）基本培养基筛选（2）激素种类和浓度调节（3）渗透压调节
6）、杂种植物鉴定（1）与亲代形态特征比较（2）杂种植物核型分析（3）同工酶谱分析 47、简述药用植物组织培养常见问题和对策。
答：1）污染及控制
（1）材料带菌与控制控制方法：彻底灭菌 （2）接种污染与控制。（3）培养过程感染与控制：对培养空间定期进行消毒处理，及时清除污染材料，转移继代材料。（4）培养基的污染与控制：在培养基中加入抑菌剂 2）外植体褐化与控制
（1）与植物的种类与品种有关 控制的措施有： ①在外植体消毒灭菌前用流水冲洗一段时间，以清洗部分酚类化合物和底物；②接种后在短时间内（1周内）多次转接到新鲜培养基上，直至褐化现象基本消失；③先短期用液体培养基进行震荡培养，待褐化现象减轻后再转入固体培养基进行培养。 （2）与外植体的年龄有关
措施：切取幼龄的茎尖、顶芽分生组织、带芽茎段等做外植体接种较 （3）与外植体的取样时间有关
在春季切取的生长旺盛部位的外植体褐化较轻，
（4）与培养基有关：控制的措施：利用吸附剂减低或清除酚类产物，改变氧化—还原势。常用的还原剂有维生素。
（5）与培养方式有关 ①调节外植体在培养基中的放置方式①改变培养方法。③缩短转瓶周期。④调节光照。
3）试管苗的玻璃化与控制 常用的措施有：①选择合适的外植体。②琼脂的调节。 ③碳源的调节。 ④激素调节。 ⑤湿度调节。采 ⑥温度调节。 ⑦光照调节.⑧改变供氮形式。⑨氯离子调节。⑩尽量减少创伤乙烯产生。11在培养基中可附加聚乙烯醇(PVA)、活性炭等，○降低玻璃苗的产生。
4）变异：①选择适宜的再生途径②植物生长物质选择③离体培养和继代时间的调节。 5）材料死亡6）黄化7）增殖率过低或过高 8）组培苗瘦弱或徒长