发布时间 : 星期四 文章预防09分子生物学习题集更新完毕开始阅读
一部分 (D) 真核细胞染色体外的独立遗传单位 (E) 真核细胞染色体DNA的一部分 13. 某限制性切核酸酶按GGG▼CGCCC方式切割产生的末端突出部分含
(A) l个核苷酸 (B) 2个核苷酸 (C) 3个核苷酸 (D) 4个核苷酸 (E) 5个核苷酸
14. 某限制性切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生 (A) 5’突出末端 (B) 5’或3’突出末端 (C) 5’及3’突出末端 (D) 3’突出末端 (E) 平末端
15. 直接针对目的DNA进行筛选的方法是
(A) 氨苄青霉素抗药性 (B) 青霉素抗药性 (C) 分子杂交 (D) 分子筛 (E) 电泳
16. “克隆”某一目的DNA的过程不包括
(A) 重组DNA分子导人受体细胞 (B) 外源基因与载体的拼接 (C) 基因载体的选择与构建 (D) 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 (E) 表达目的基因编码的蛋白质
17. 表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是
(A) 酵母表达体系 (B) 原核表达体系 (C) E．coli表达体系 (D) 昆虫表达体系 (E) 哺乳类细胞表达体系
18. 不能用作克隆载体的DNA是
(A) 质粒DNA (B) 噬菌体DNA (C) 细菌基因组DNA (D) 腺病毒DNA (E) 逆转录病毒DNA
19. 克隆的基因组DNA可在多种系统表达，例外的是
(A) E．coli表达体系 (B) 昆虫表达体系 (C) 酵母表达体系 (D) 哺乳动物细胞表达体系
二、填空题
1 ．通过自动获取或人为地供给外源 _________ ，使细胞或培养的受体细胞获得新的 _________ ，这就是转化作用。
2 ．由 _________ 和 _________ 介导的基因移位或重排，称为转座。 3 ．基因重组有两种类型，即 _________ 和 _________ 。
6 ．一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取， _________ 的选择与改造， _________ 的连接，重组 DNA 分子导人受体细胞，筛选出含感兴趣基因的重组 DNA 转化细胞。
7 ．限制性核酸切酶是一类识别 _________ 的 _________ 核酸酶。
8 ．科学家感兴趣的外源基因又称 _________ ，其来源有几种途径：化学合成，酶促合成 cDNA ，制备的基因组 DNA 及 _________ 技术。
9 ．外源 DNA 离开染色体是不能复制的。将 _________ 与 _________ 连接，构建成重组 DNA 分子，外源 DNA 则可被复制。
10 ．根据采用的克隆载体性质不同，将重组 DNA 分子导人细菌的方法有 _________ 、 _________ 及感染。
三、名词解释题
1 ．质粒 2 ．限制性切酶 3 ，载体4 ． DNA 克隆 5 ．目的基因
6 ． cDNA 文库 7 ．基因组 DNA 文库 8 ．回文结构 9 ．转座
四、问答题
1 ．何谓基因克隆？简述基因克隆的基本过程。
2 ．何谓限制性核酸切酶？写出大多数限制性核酸切酶识 DNA 序列的结构特点。 3 ．何谓目的基因？写出其主要来源或途径。 4 ．解释质粒，为什么质粒可作为基因载体。
5 ．解释基因载体，说出哪些 DNA 可作为基因的载体。 6 ．简述 E ． coli 和真核表达体系各自的优、缺点。
7. 何为 α-互补？如何利用 α-互补来筛选插入了外源 DNA 的重组质粒？
8. 为了绘制长为3.0Kb BamH Ⅰ限制性片段的限制性图谱，分别用EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ、EcoR Ⅰ+ Hpa Ⅱ消化这个片段的三个样品，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，EB染色后观察DNA带型（如下图）。请根据这个结果，绘制一个限制性切图谱，要标明EcoR Ⅰ和Hpa Ⅱ识别位点间的相对位置，以及它们之间的距离（Kb）。
9.打算在细菌中表达一种稀有的人类某种蛋白质，以便能够大量制备这种蛋白。为确 保分离纯化，决定将一段6个组氨酸的短肽加到该蛋白质的N端或C端。这些带有组氨酸标签的蛋白质能够紧紧地同Ni2+柱结合，但很容易被EDTA或咪唑溶液洗脱。此法可以一步完成大量蛋白质的纯化。
下图是编码该蛋白的核苷酸序列。请设计一对PCR引物，各含有18个同该基因同源的核苷酸，能够用于扩增该基因的编码序列，另外，在N端有一个起始密码，其后是6个组氨酸密码子（组氨酸密码子为CAT）。另外设计一对引物，能够在C端加上6个组氨酸和一个终止密码。 N末端
M A T R R A A
5’-GGT CGT ATG GCT ACT CGT CGC GCT GCT……………………… ………………………CTT GCT GCA AGT CTC TCT TAG AAG TGT-3’ L A A S L S *
C末端
第二十一章 基因诊断与基因治疗
一、选择题
1. 源基因的变异并不包括
(A) 基因结构突变 (B) 基因重排 (C) 病原体基因侵人体 (D) 基因表达异常 (E) 基因扩增
2. 病原体基因侵人人体主要引起哪种疾病？
(A) 遗传病 (B) 肿瘤 (C) 心血管疾病 (D) 传染病(E) 高血压
3. 源基因结构突变发生在生殖细胞可引起哪种疾病？ (A) 遗传病(B) 肿瘤(C) 心血管疾病(D) 传染病(E) 高血压
4. 下列何种方法不是基因诊断的常用技术方法
(A) 核酸分子杂交(B) 基因测序(C) 细胞培养(D) RFLP分析(E) PCR
5. 目前认为最为确切的基因诊断方法是
(A) 核酸分子杂交(B) 基因测序(C) 细胞培养(D) RFLP分析(E) PCR
6. 下列哪种方法不是目前基因治疗所采用的方法
(A) 基因缺失(B) 基因矫正(C) 基因置换(D) 基因增补(E) 自杀基因的应用 7. 目前基因治疗中选用最多的基因载体是
(A) 质粒(B) 噬菌体(C) 脂质体(D) 逆转录病毒(E) 腺病毒相关病毒
8. 下列哪种方法不属于非病毒介导基因转移的物理方法？
(A) 电穿孔(B) 脂质体介导(C) DNA直接注射法(D) 显微注射(E) 基因枪技术
9. 下列哪种方法属于非病毒介导基因转移的化学方法？
(A) 电穿孔(B) 基因枪技术(C) DNA直接注射法(D) 显微注射(E) DEAE一葡聚糖法
10. 利用正常机体细胞中不存在的外源基因所表达的酶催化药物前体转变为细胞毒性产物而导致细胞死亡的基因治疗方法是
(A) 基因灭活(B) 基因矫正(C) 基因置换(D) 基因增补(E) 自杀基因的应用
11. 利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是 (A) 基因灭活 (B) 基因矫正 (C) 基因置换 (D) 基因增补 (E) 自杀基因的应用
12. 通过目的基因的非定点整合，使其表达产物补偿缺陷基因的功能或加强原有功能的基因治疗方法是
(A) 基因灭活 (B) 基因矫正 (C) 基因置换 (D) 基因增补 (E) 自杀基因的应用
13. 将变异基因进行修正的基因治疗方法是
(A) 基因灭活 (B) 基因矫正 (C) 基因置换 (D) 基因增补 (E) 自杀基因的应用 二、填空题
1 ．基因变异致病的主要类型是__________ 和 __________。 2 ．源基因的变异可分为__________ 和__________ 。
3 ，基因诊断的常用诊断技术是__________ 和__________ 。
4 ．对已知基因突变位点的检测需人工合成两种寡核着酸探针，一种是与________ 互补的寡核苷酸，另一种是与________ 互补的寡核苷酸。
5 ．目前用作基因转移载体的病毒有逆转录病毒__________ 和__________ 。 6 ．目前基因治疗中导人基因的方式有__________ 和__________ 。 7 ．在体外实验研究中，将基因导人哺乳动物细胞的方法有__________ 和__________ 两大类。
8 ．非病毒介导的基因转移方法可分为__________ 和__________ 两类。 三、名词解释题
1 ．基因诊断2．自杀基因 3．基因治疗 4．RFLP 5 Ex vivo 四、问答题
1 ．基因诊断的特点是什么？
2 ．试述源基因结构突变的主要类型以及源基因结构突变所致的疾病。 3 ．简述核酸分子杂交的基本原理。 4 ．目前基因诊断可应用于哪些疾病？ 5 ．当前基因治疗拟采用哪些方法？