水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定

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试样中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑制剂(4.10)。 7.1.2 试样的测定

7.1.2.1 碘量法测定试样中的溶解氧

将试样(7.1.1.1)充满二个溶解氧瓶(5.2)中,使试样少量溢出,防止试样中的溶解氧质量

浓度改变,使瓶中存在的气泡靠瓶壁排除。将一瓶盖上瓶盖,加上水封,在瓶盖外罩上一个密封

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罩,防止培养期间水封水蒸发干,在恒温培养箱(5.8)中培养5d±4h 或(2+5)d±4h 后测定试

样中溶解氧的质量浓度。另一瓶15min 后测定试样在培养前溶解氧的质量浓度。 溶解氧的测定按GB/T 7489 进行操作。

7.1.2.2 电化学探头法测定试样中的溶解氧

将试样(7.1.1.1)充满一个溶解氧瓶(5.2)中,使试样少量溢出,防止试样中的溶解氧质量

浓度改变,使瓶中存在的气泡靠瓶壁排除。测定培养前试样中的溶解氧的质量浓度。

盖上瓶盖,防止样品中残留气泡,加上水封,在瓶盖外罩上一个密封罩,防止培养期间水封 水蒸发干。将试样瓶放入恒温培养箱(5.8)中培养5d±4h 或(2+5)d±4h。测定培养后试样中

溶解氧的质量浓度。

溶解氧的测定按GB/T 11913 进行操作。 空白试样的测定方法同7.1.2.1 或7.1.2.2。 7.2 稀释与接种法

稀释与接种法分为二种情况:稀释法和稀释接种法。

若试样中的有机物含量较多,BOD5 的质量浓度大于6mg/L,且样品中有足够的微生物,采 用稀释法测定;若试样中的有机物含量较多,BOD5 的质量浓度大于6mg/L,但试样中无足够的

微生物,采用稀释接种法测定。 7.2.1 试样的准备 7.2.1.1 待测试样 待测试样的温度达到(20±2)℃,若试样中溶解氧浓度低,需要用曝气装置(5.9)曝气15min, 充分振摇赶走样品中残留的气泡;若样品中氧过饱和,将容器的2/3 体积充满样品,用力振荡赶

出过饱和氧,然后根据试样中微生物含量情况确定测定方法。稀释法测定,稀释倍数按表1 和表

2 方法确定,然后用稀释水(4.4)稀释。稀释接种法测定,用接种稀释水(4.5)稀释样品。若样

品中含有硝化细菌,有可能发生硝化反应,需在每升试样培养液中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑

制剂(4.10)。

稀释倍数的确定:样品稀释的程度应使消耗的溶解氧质量浓度不小于2mg/L,培养后样品中 剩余溶解氧质量浓度不小于2mg/L,且试样中剩余的溶解氧的质量浓度为开始浓度的1/3~2/3 为最佳。

稀释倍数可根据样品的总有机碳(TOC)、高锰酸盐指数(IMn)或化学需氧量(CODCr)的 测定值,按照表1 列出的BOD5 与总有机碳(TOC)、高锰酸盐指数(IMn)或化学需氧量(CODcr) 的比值R 估计BOD5 的期望值(R 与样品的类型有关),再根据表2 确定稀释因子。

按照确定的稀释倍数,将一定体积的试样或处理后的试样用虹吸管(5.4)加入已加部分稀释

水或接种稀释水的稀释容器中(5.3),加稀释水或接种稀释水至刻度,轻轻混合避免残留气泡,

待测定。若稀释倍数超过100 倍,可进行两步或多步稀释。 若试样中有微生物毒性物质,应配制几个不同稀释倍数的试样,选择与稀释倍数无关的结果, 并取其平均值。试样测定结果与稀释倍数的关系确定如下:

当分析结果精度要求较高或存在微生物毒性物质时,一个试样要做2 个以上不同的稀释倍数,

每个试样每个稀释倍数做平行双样同时进行培养。测定培养过程中每瓶试样氧的消耗量,并画出

氧消耗量对每一稀释倍数试样中原样品的体积曲线。 若此曲线呈线性,则此试样中不含有任何抑制微生物的物质,即样品的测定结果与稀释倍数 无关;若曲线仅在低浓度范围内呈线性,取线性范围内稀释比的试样测定结果计算平均BOD5 值。

7.2.1.2 空白试样

稀释法测定,空白试样为稀释水(4.4),需要时每升稀释水中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑制剂(4.10)。

稀释接种法测定,空白试样为接种稀释水(4.5),必要时每升接种稀释水中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑制剂(4.10)。 7.2.2 试样的测定

试样和空白试样的测定方法同7.1.2.1 或7.1.2.2。 8 结果计算 8.1 非稀释法

非稀释法按公式(3)计算样品BOD5 的测定结果: .式中:ρ——五日生化需氧量质量浓度,mg/L; ρ1——水样在培养前的溶解氧质量浓度,mg/L; ρ2——水样在培养后的溶解氧质量浓度,mg/L。 8.2 非稀释接种法

非稀释接种法按公式(4)计算样品BOD5 的测定结果:

ρ

= (ρ1?ρ2) ? (ρ3 ?ρ4 )(4)

式中:ρ —— 五日生化需氧量质量浓度,mg/L;

ρ1 —— 接种水样在培养前的溶解氧质量浓度,mg/L; ρ2 —— 接种水样在培养后的溶解氧质量浓度,mg/L; ρ3 —— 空白样在培养前的溶解氧质量浓度,mg/L; ρ4 —— 空白样在培养后的溶解氧质量浓度,mg/L。 8.3 稀释与接种法

稀释法和稀释接种法按公式(5)计算样品BOD5 的测定结果: P =

(P1?P2)?(P3?P4)?f1

f2 (5) 式中: ρ—— 五日生化需氧量质量浓度,mg/L;

ρ1 —— 接种稀释水样在培养前的溶解氧质量浓度,mg/L;

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ρ2 —— 接种稀释水样在培养后的溶解氧质量浓度,mg/L; ρ3 —— 空白样在培养前的溶解氧质量浓度,mg/L; ρ4 —— 空白样在培养后的溶解氧质量浓度,mg/L; f1 —— 接种稀释水或稀释水在培养液中所占的比例; f2 —— 原样品在培养液中所占的比例。

BOD5 测定结果以氧的质量浓度(mg/L)报出。对稀释与接种法,如果有几个稀释倍数的结 果满足要求,结果取这些稀释倍数结果的平均值。结果小于100mg/L,保留一位小数;100~ 1000mg/L,取整数位;大于1000mg/L 以科学计数法报出。结果报告中应注明:样品是否经过过

滤、冷冻或均质化处理。

9 .质量保证和质量控制 9.1 空白试样

每一批样品做两个分析空白试样,稀释法空白试样的测定结果不能超过0.5mg/L,非稀释接 种法和稀释接种法空白试样的测定结果不能超过1.5mg/L,否则应检查可能的污染来源。 9.2 接种液、稀释水质量的检查

每一批样品要求做一个标准样品,样品的配制方法如下:取20ml 葡萄糖-谷氨酸标准溶液 (4.9)于稀释容器中,用接种稀释水(4.5)稀释至1000 ml,测定BOD5,测定结果BOD5 应在180

mg/L~230 mg/L 范围内,否则应检查接种液、稀释水的质量。 9.3 平行样品

每一批样品至少做一组平行样,计算相对百分偏差RP 。当BOD5 小于3 mg/L 时, RP 值应

小于(等于)±15%;当BOD5 为3~100 mg/L 时, RP 值应小于(等于)±20%;当BOD5 大于

100 mg/L 时, RP 值应小于(等于)±25%。计算公式如下: RP=

P1?P2ⅹ100%

P1?P2

式中: RP —相对百分偏差,%;

ρ1— 第一个样品BOD5 的质量浓度,mg/L; ρ2— 第二个样品BOD5 的质量浓度,mg/L。

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10 精密度和准确度

非稀释法实验室间的重现性标准偏差为0.10~0.22mg/L,再现性标准偏差为0.26~

0.85mg/L。稀释法和稀释接种法的对比测定结果重现性标准偏差为11 mg/L,再现性标准偏差为3.7-22 mg/L.

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