生物分离工程复习题一第1-9章16K含答案

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A 磺酸基团(-SO3 H) B 羧基-COOH C 酚羟基C6H5OH D 氧乙酸基-OCH2COOH 11、依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有( A)。

A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+ B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+ C、Na+﹥Rb+﹥Cs+ D、Rb+﹥Cs+﹥Na+ 12、如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用(D )。

A、Sephadex G-200 B、Sephadex G-150 C、Sephadex G-100 D、Sephadex G-50 13、离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂,通过(A )将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。

A、静电作用 B、疏水作用 C、氢键作用 D、范德华力 14、阴离子交换剂( C )。

A、可交换的为阴、阳离子 B、可交换的为蛋白质 C、可交换的为阴离子 D、可交换的为阳离子 15、洗脱体积是( C )。

A、凝胶颗粒之间空隙的总体积 B、溶质进入凝胶内部的体积

C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积 D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积 16、工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀,一般先将其转变为( B)。

A、钠型和磺酸型 B、钠型和氯型 C、铵型和磺酸型 D、铵型和氯型 17、吸附色谱分离的依据是( A)。

A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同

C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同 18、下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法(A )。

A. 亲和层析 B. 凝胶层析 C. 离子交换层析 D. 盐析 19、酚型离子交换树脂则应在( B)的溶液中才能进行反应

A. pH>7 B pH>9 C. pH﹤9 D. pH﹤7

20、羧酸型离子交换树脂必须在( C)的溶液中才有交换能力

A. pH>5 B pH﹤7 C. pH>7 D. pH﹤5 21、离子交换树脂使用( B )进行溶胀

A.水 B乙醇 C.氢氧化钠 D.盐酸

22、下列关于离子交换层析洗脱说法错误的是(D )

A. 对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂 B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂 C. 强碱性树脂用盐酸-甲醇、醋酸等作洗脱剂

D. 若被交换的物质用酸、碱洗不下来,应使用更强的酸、碱 23、离子交换用的层析柱直径和柱长比一般为( B)之间

A. 1:10-1:20 B1:10-1:50 C. 1:10-1:30 D. 1:20-1:50 24、通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来,可使用(A )

A. 阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱 B阳离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱 C. 阴离子交换剂一般是pH值从低到高 D. 以上都不对

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25、下列哪一种凝胶的孔径最小(A )

A. Sephadex G-25 B Sephadex G-50 C. Sephadex G-100 D. Sephadex G-200 26、下列哪一种凝胶的吸水量最大(D )

A. Sephadex G-25 B Sephadex G-50 C. Sephadex G-100 D. Sephadex G-200 27、疏水亲和吸附层析通常在( D)的条件下进行

A.酸性 B碱性 C. 低浓度盐溶液 D. 高浓度盐溶液 28、当硅胶吸水量在( B )以上时,就失去其吸附作用

A. 13% B 17% C. 10% D. 15% 29、关于疏水柱层析的操作错误( D )

A疏水层析柱装柱完毕后,通常要用含有高盐浓度的缓冲液进行平衡

B疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术

C洗脱后的层析柱再生处理,可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的缓冲溶液洗涤,然后用平衡缓冲液平衡

D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小

30、在凝胶过滤(分离范围是5000~400000)中,下列哪种蛋白质最先被洗脱下来(B)

A.细胞色素C(13370)B.肌球蛋白(400000)C.过氧化氢酶(247500) D.血清清蛋白(68500)E.肌红蛋白(16900)

31、亲和层析的洗脱过程中,在流动相中减去配基的洗脱方法称作( D )

A、 阴性洗脱 B、剧烈洗脱 C、正洗脱 D、负洗脱 32、下列哪一项不是阳离子交换树脂 (D)

A 氢型 B 钠型 C 铵型 D 羟型 33、下列哪项不是常用的树脂再生剂( D )

A 1%~10%HCl B H2S04、 C NaCl、 D 蒸馏水

34、亲和层析的洗脱过程中,在流动相中加入配基的洗脱方法称作 (C)

A、 阴性洗脱 B、 剧烈洗脱 C、竞争洗脱 D、非竞争洗脱 35、凝胶层析中,有时溶质的Kd>1,其原因是( B)

A、凝胶排斥 B、凝胶吸附 C、柱床过长 D、流速过低

二、填空

1、常用离心设备可分为 离心沉降 和 离心过滤 两大类; 2、在一个转子中,将粒子沉降下来的效率可以用 K系数 来描述。

3、超离心法是根据物质的 沉降系数、 质量 和 形状 不同,应用强大的离心力,将混合物中各组分分离、浓缩、提纯的方法。

4、密度梯度离心中,制备密度梯度的常用方法有 手工法、 梯度混合仪法、 离心形成法。 5、阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为 强酸型、 弱酸型 和 中等强度 ;其典型的活性基团分别有 磺酸基团 、 羧基 和 磷酸基 。

7、蛋白质分离常用的层析方法有 凝胶层析 、多糖基离子交换 、 亲和层析 和 疏水层析 。 8、离子交换分离操作中,常用的梯度洗脱方法有 PH梯度 和 离子强度梯度。 10、多糖基离子交换剂包括 葡集团离子交换剂 和 离子交换纤维素 两大类。

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11、离子交换树脂由 载体 、 活性基团 和 可交换离子 组成。

12、DEAE Sepharose是 阴 离子交换树脂,其活性基团是 二乙基氨基乙基 。 13、CM Sepharose是 阳 离子交换树脂,其活性基团是 羧甲基 。 14、离子交换操作一般分为 动态 和 静态 两种。

15、利用薄层定量测定时,一般控制待测组分的Rf在 0.2-0.5 之间。

16、疏水层析是根据被分离组分分子表面的 疏水残基 与固定相的 疏水配基 之间结合力差异进行的层析分离方法。

18、我国化工部规定离子交换产品的型号以三位阿拉伯数字组成,第一位数字代表 产品的分类 ,第二位数字代表 骨架的差异 ,第三位数字为 顺序号 用以区别基团、交联剂等的差异。型号前加“D”的为 大孔树脂 。

19、亲和吸附剂的制备过程包括 基质的活化 、 基质与配体的偶联 和 基质与配体的选择 三个步骤。

三、其他题型

1、何为沉降系数?

颗粒在单位离心力场中粒子移动的速度。

2、差速离心和密度梯度区带离心法的原理是什么?

差速离心是采用不同的离心速度和离心时间,是沉淀速度不同的颗粒在不同的离心速度及不同的离心时间下,分配分离的方法。密度区带离心法是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的离心分离方法。

3、工业离心沉降设备主要类型有哪些?

瓶式离心机,管式离心机,多室式离心机,蝶式离心机,螺旋卸料沉降离心机 4、差速区带离心法和等密度离心法有何区别?

1)在原理上,差速区带离心法依据粒子的沉降速率差异被分离,等密度离心法依据粒子本身的密度差异被分离;2)在梯度范围上,差速区带离心法介质的密度小于样品中各种粒子的密度,等密度离心法介质的密度大于待分离样品中各种粒子的密度;3)在时间效应上,差速区带离心法长时间离心,所有待分离粒子都沉淀在管底,等密度离心法长时间离心,各粒子停留在等密度形成的区带。

5、何为内水体积?何为外水体积?

内水体积:指基质颗粒内部液体体积的总和,即基质膨胀是所膨胀的体积。外水体积:指基质颗粒之间液体体积的总和。

外水体积:指基质颗粒之间液体体积的总和。 6、列举五种层析分离技术,说明其原理。

1)吸附层析:组分吸附在吸附剂表面,固定相是固体吸附剂,各组分能力不同。2)分配层析:各组分在流动相和静止相中的分配系数不同。3)离子交换层析:

7、试以蛋白质在pH梯度介质中的移动行为说明聚焦效应的形成原理。

在流动过程中,当pH刚高于pI时,蛋白带负电荷,与交换剂结合,移动速度显著减慢。当pH梯度下降至使该处pH低于pI,蛋白带正电荷,不与交换剂结合,而随洗脱液快速移动。如此多次重复而达聚焦、分离目的。

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如果一种蛋白质加到已经形成pH梯度的层析柱上时,将迅速移动到与其等电点相同的pH处。从此位置开始,蛋白质以缓慢的速度进行吸附、解吸附,直到pH小于pI时被洗出。

若在此蛋白洗出之前再加入第二份同种蛋白样品时,后者将在洗脱液的作用下快速向前移动,而不被固定相吸附,直到其移动到近似本身等电点环境处。然后两份样品以同样的速度移动,最后同时从柱底流出。

8、新型的薄层层析技术有哪些?

1混合薄层:两种不同吸附剂2酸碱薄层:稀酸或稀碱代替水3络合薄层:加入络合剂4涂布固定液的薄层:5具有浓缩区的薄层:不同粒度。高效薄层:极细均匀的吸附剂 9、蛋白质疏水层析时,洗脱的方式有哪三种?

1)降低流动相中盐浓度2)往流动相中添加有机溶剂3)往流动相中添加去污剂 10、例举两种新型的疏水层析技术,说明其原理。

1)亲硫性疏水层析 该技术主要在疏水作用的基础上增加了硫元素的相互作用。利用层析介质与含硫蛋白质和非硫蛋白质的亲硫性差异,对蛋白质加以分离。

2)疏水电荷诱导层析(HCIC) HCIC的配基中含有吡啶环,中性时不会带有电荷,而随着pH值的降低,吡啶环中的氮原子会带有正电荷,这样和带同样电荷的蛋白质发生排斥,从而实现解吸。

11、何为树脂的有效粒径和均一系数?

1)有效粒径是指筛分树脂时,10%体积的树脂颗粒通过,而90%体积的树脂颗粒保留的筛孔直径。2)均一系数 是指能通过60%体积树脂的筛孔直径与能通过10%体积的树脂的筛孔直径之比。

12、什么是凝胶的排阻极限?

指不能进入凝胶颗粒孔穴内部的最小分子的分子量。排阻极限代表一种凝胶能有效分离的最大分子量,大于这种凝胶的排阻极限的分子用这种凝胶不能得到分离。

《生物分离工程》复习题三(第6~7章)

一、选择题

1、当两种高聚物水溶液相互混合时,二者之间的相互作用不可能产生(D)

A. 互不相溶,形成两个水相 B. 两种高聚物都分配于一相,另一相几乎全部为溶剂水 C. 完全互溶,形成均相的高聚物水溶液 D. 形成沉淀 2、超临界流体萃取中,如何降低溶质的溶解度达到分离的目的(C)

A.降温 B升高压力 C.升温 D.加入夹带剂 3、物理萃取即溶质根据(B)的原理进行分离的

A.吸附 B.相似相溶 C分子筛 D 亲和 4、超临界流体萃取法适用于提取( B )

A、极性大的成分 B、极性小的成分 C、离子型化合物 D、亲水性成分

5、在萃取液用量相同的条件下, 下列哪种萃取方式的理论收率最高 (C)

A.单级萃取 B.三级错流萃取 C.三级逆流萃取 D.二级逆流萃取 6、关于萃取下列说法正确的是(C)

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