发布时间 : 星期一 文章大学仪器分析 实验教案更新完毕开始阅读
(3) 打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0%T”旋钮，使数字显示为“00.0”。
(4) 将装有溶液的比色皿放置比色架中。
(5) 旋动仪器波长手轮，把测试所需的波长调节至刻度线处。
(6) 盖上样品室盖，将参比溶液比色皿置于光路，调节透过率“100%T”旋钮，使数字显示为“100.0T”（如果显示不到100%T，则可适当增加灵敏度的档数，同时应重复“3”，调整仪器的“00.0”）
(7) 将被测溶液置于光路中，数字表上直接读出被测溶液的透过率（T）值。 (8) 吸光度A的测量，参照“3”“6”调整仪器的“00.0”和“100.0”，将选择开关置于A旋动吸光度调零旋钮，使得数字显示为.000，然后移入被测溶液，显示值即为试样的吸光度A值。
(9) 浓度C的测量，选择开关由A旋至C，将已标定浓度的溶液移入光路，调节浓度按钮，使得数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，即可读出相应的浓度值。
(10) 仪器在使用时，应常参照本操作方法中“3”“6”进行调“00.0”和“100.0”的工作。
(11) 每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 (12) 本仪器数字显示后背部，带有外接插座，可输出模拟信号，插座1脚为正，2脚为负接地线。
(13) 如果大幅度改变测试波长时，需等数分钟后才能正常工作。（因波长由长波向短波或短波向长波移动时，光能量变化急剧，光电管受光后响应较慢，需一段光响应平衡时间。
附： 典型紫外-可见光分光光度计简介
紫外-可见光分光光度计有很多型号，分单光束和双光束两大类型，目前应
用都很普遍。其主要部件两者大致相同，多以氢灯和钨灯分别作紫外光和可见光的光源，以棱镜或光栅作色散元件，通过狭缝分出测定波长的单色光，由切换镜把一定强度的紫外光或可见光引入光路，经吸收池吸收后，透过的光被光电管检测，转变成电信号，有些仪器采用记录仪记录溶液的吸光度或透光率，同时用数字显示，或者直接从刻有吸光度或透光率的转盘上读取。
主要部件
1．光源 常用的有钨灯和氢灯或氘灯，提供连续光谱的波长范围分别为760～400nm和400～200nm， 其中H 656.28nm和H 486.13nm谱线常用作校正光栅或棱镜位置，以提高分光光度计波长读数的准确性。另外，为了获得稳定的
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具有一定强度的光源，仪器上还配有稳压电源和稳流电源设备。通常光源在使用前需预热15mim。
2．单色器 单色器是分光光度计重要部件之一，主要由色散元件(光栅或棱镜)、狭缝、准直镜等组成，其作用是输出测定所需的某一波长的单色光。目前许多分光光度计采用光栅作色散元件，与棱镜相比。光栅无论在长波长方向或短波长方向都具有相同的倒线色散率，因此．在固定狭续宽度后，所获得的单色光都具有同样宽的谱带，并且受温度影响较小，使波长具有较高的精确度，而棱镜则不相同，在短波长方向倒线色散率小，而长波长方向大，因而在固定狭缝宽度后，所获的不同波长的单色光的谱带宽度不同。
狭缝是分光光度计上十分精密的部件，它由边缘锐利的两片金属薄片构成。狭缝宽度可分为固定狭缝和可调狭缝，一般由测微机构测量缝宽数值，狭缝宽度直接影响单色光的纯度。由单色器得到单色光，通常用光谱通带来表示仪器的性能，通带愈窄，单色光愈纯。
3．吸收池 吸收池规格(指光程)有0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，10.0cm等，其材料有石英和玻璃两种。玻璃吸收池仅适用于可见光和近红外光区，而石英吸收池不仅适用于上述光区，还适用于紫外光区。吸收池应配对使用，其透光率相差应小于0.5％。测量吸光度时，应把吸收池竖立于吸收池架内．并用夹件固定位置，以免发生位移，保证两个吸收池透光面平行一致，透光率也一致。吸收池不可用火烘烤干燥，以免破裂。若试样使用易挥发的溶剂配制，测量时为了避免因溶剂挥发而改变试液浓度，应加盖。
4．光度检测器 光度检测器是根据光电效应，把光信号转换为电信号的光电元件，种类有硒光电池、光电管、光电倍增管等。硒光电池对可见光(380～760nm)最为敏感。产生的光电流较大，可直接用灵敏检流计测量，但使用时要注意防潮和防止腐蚀性气体的侵蚀，否则将导致灵敏度严重下降，影响使用寿命。硒光电池在长时间光照后，会发生“疲劳现象”，这时应把它置于暗处使之复原。光电管有蓝敏光管(用于200～650nm波段的锑铯光电管)和红敏光电管(用于625～1000nm波段的氧化铯光电管)。它是一只二极真空管，阴极表面涂有光敏材料，加工成半筒形，受光照后便发射出电子，阳极为镍棒，收集阴极射出的电子。光电管适宜的工作电源为电压在90V左右的直流电，若工作电压过高，会导致暗电流增大。
荧光分析仪
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用于测量荧光物质的荧光光谱或荧光强度的仪器叫做荧光分析仪。荧光分析仪通常分为荧光光度计和荧光分光光度计两大类。
一、原理
荧光物质受光辐射激发发光，其荧光的激发光谱和发射光谱取决于各物质的分子结构，其荧光强度取决于物质的浓度（或含量），故可以进行定性和定量分析。
荧光分光光度计就是根据这一原理制成的。它与普通（可见）分光光度计比较，主要有两个区别：
1. 采用垂直测量方式，即检测器与光源位置成垂直方向，以消除透射光的影响。
2. 有两个单色器。一个置于样品池前（称为激发单色器），一个置于样品池与检测器之间（称为发射单色器）。通过调整和控制两个单色器的波长（分别为激发光波长和荧光发射波长）可以绘制荧光的激发光谱和发射光谱。依次，不仅可以鉴别荧光物质而且可以选择激发光（波长）和最佳的测定荧光（波长）并消除其他杂散光的干扰。
二、仪器结构
荧光分析仪的基本结构如图所示，通常由光源、单色器、样品池、狭缝、光电倍增管（PMT）等主要构件组成。
激 发 光源 单色器 样品池 发射单色器 电源 检测器 信号放大系统 读数装置 图 荧光分析基本装置方框图 1. 光源
常用的光源是氙弧灯或高压汞灯。氙弧灯可发射250～800nm很强的连续光谱，灯的寿命大约为2000h.高压汞灯常常利用其发射的365nm，405nm，436nm谱线作激发光，灯的寿命约为1500～3000h。
2. 单色器
荧光光度计常用滤光片为单色器，由一块滤光片从光源发射的光中分离出所需的激发光，用另一块滤光片滤去杂散光和杂质所发射的荧光。荧光光度计能用于荧光强度的定量测定，不能用于测定激发光谱和荧光光谱。荧光分光光度计大
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多采用光栅作为单色器，它具有较高的灵敏度，较宽的波长范围，能扫描激发光谱和荧光光谱。
3. 样品池
样品池通常是石英方形池，四个面都是光学面。使用时应拿样品池的棱。 4. 狭缝
狭缝越小，仪器的单色性越好，但光强相应降低，测定的灵敏度也相应降低。 当入射狭缝和出射狭缝宽度相等时，单色器射出的单色光有75%的能量是辐射在有效的带宽内。此时，既有好的分辨率，有保证了光通量。
5. 检测器
荧光分光光度计多采用光电倍增管（PMT）作检测器，施加于PMT光阴极的电压越高，其放大倍数越大，且电压每改变1V，放大倍数会波动3%。所以，要获得良好的基线响应， PMT的高压源要很稳定。
6. 读数装置
读数装置可以用数字电压表、记录仪或阴极示波器。数字电压表价格便宜，用于定量分析有准确、方便的特点。记录仪可用于扫描光谱，记录笔的响应时间通常为0.1～0.5s，而阴极示波器的显示速度比记录仪还要快。
三、930型荧光光度计的使用方法
1. 准备工作 仪器在未接通电源之前，应做好各项测试的准备工作，如电表指针应位于“0”刻度，否则应用电表上的校正螺丝进行调节。
2. 仪器电源开关接通前，必须检查滤色片是否已安装在仪器上，光电管应避免受强光照射，否则光电管将受损。测试中，若须更换滤色片，也需先切断电源。
3. 零位调节 接通电源，打开样品室箱盖，旋动零位调节旋钮，使电表指针位于“0”处，预热仪器10min，即可进行溶液测试。
4. 灵敏度倍率转换档的选择 应先将开关放在较低倍率的档，然后根据需要逐渐提高倍率，以免光电元件及表头过载受损。在灵敏度已满足的情况下，选择较低的倍率档数，可以使仪器能获得较高的稳定性。各档的灵敏度范围是：第一档×1倍，第二档×10倍，第三档×100倍，第四档×200倍，第五档×400倍。
5. 测读荧光 将盛有已知浓度的荧光溶液置于样品池放入光路中，调节满度旋钮使其电表读数接近满刻度或其他相应的数值(注意：满度旋钮旋到头时，切莫再旋，以免电位器损坏)，然后换上其他盛有试液的样品池置于光路上，即可测读试液的荧光值。
930型荧光光度计附有滤色片光谱特性表
滤色片(蓝字：带通型) 330 主峰波长(nm) 330±10 半宽度(nm) ＜100 透过率(T%) ＞70 40