DNAStar中文使用说明-网友共享

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EditSeq的使用方法 EditSeq是能够迅速、正确地输入,并且修改DNA或蛋白质序列工具。每个EditSeq文件都可以分为三个可编辑的部分,上边的一部分为序列文件,中间的一部分里是评论,底部是序列的注释。

EditSeq能读取大部分的序列格式——包括FASTA,GenBank,ABI、GCG和ASCII格式。你可以使用菜单命令或拖拽方式输入序列文件。另外, 序列也许通过使用键盘输入,或者从其他地方复制、粘贴得到。经Entrez或BLAST检索得到的序列可以直接从因特网或企业内部互联网服务器下载。

序列被打开后,EditSeq能使用标准或者指定的遗传密码进行翻译,或者反翻译,寻找开放读框,还可以进行阅读校对。另外, EditSeq能以GenBank,FASTA和GCG格式输出序列。

如果在使用这软件中需要帮助,可以和DNASTAR联络。电话:(608)258-7420,传真:(608)258-7439,电子信件:support@dnastar.com,或者经http://www.dnastar.com.

打开已有序列

我们从用苹果计算机打开“TETHIS21MA”和用Windows打开“tethis21.seq”开始。

假设序列的末尾有载体序列污染。我们在用EditSeq打开序列的同时,用Set Ends命令去除5’和3’污染序列。

? 从文件菜单(FILE MENU),选择Open。

? 打开文件夹“Demo Sequences”单击选定序列“TETHIS21”。

? 单击位于对话框右下角的Set Ends按钮。Set Ends被打开(如右)。 ? 在5’框和3’框中键入50和850,点击OK。单击

Open打开序列。

当EditSeq窗口打开时,序列长度显示在右上角。通过“setting ends,”现在你只有最初序列中的801 bp的片段。Set Ends选择在全部Lasergene应用程序中都可以使用。

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寻找开放读框

在这入门的一部分中,我们将确定序列中最大的ORF,并翻译它。

? 从SEARCH MENU找到ORF,点击打开会

出现右边的对话框。 ? 单击Find Next寻找第一个ORF的位臵。

? 继续点击Find Next直到你把ORF的位臵选定在位臵183-455。ORF的坐标会出现在

EditSeq窗口的顶端附近。

DNA序列翻译

这一节中我们介绍如何翻译我们的ORF,不过任何序列中的读框内部分都可以用下面的方法进行翻译。如果你的选择是在三联码的读框内,三联码指示棒显示为实心黑线(如左图)。如果你的选择是不在三联码的读框内,左边的箭头和右面的箭头显示向左或向右移动一个bp,以使所选序列成为三的倍数。

? 选定ORF,从

GOODIES MENU菜单中选择翻译(Translate)。 ? 翻译的蛋白质序列出现在一个新的未命名窗口中

(如右图)。它是使用标准的遗传密码翻译的。 使用其它遗传密码

根据你的序列的来源,你可以选择使用非标准的遗传密码进行翻译等操作。在这节中,我们将标准的遗传密码转换成Ciliate Macronuclear密码 。

? 从GOODIES MENU菜单选择Genetic Codes打开,子菜单显示如下。

? 单击“Ciliate Macronuclear”就实现了遗传密码的转换,EditSeq现在使用的就是

Ciliate Macronuclear的遗传密码。 ? 同样可以将遗传密码转换为其它类型。

遗传密码的编辑

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这一节中我们修改Ciliate Macronuclear的遗传密码。

? 从GOODIES MENU菜单选择Edit Selected Code。这将打开右面的窗口,窗口显示遗传

密码是怎样翻译DNA和RNA序列的。 ? 如以DNA形式展示密码,点击DNA按钮。

? 编辑时,单击任何要编辑的密码,从其目前的位臵拖到新氨基酸对应的位臵则可。 ? 如使用不同的启始密码子,单击Set Starts按钮。第二的遗传密码窗就会被打开,可

以进行起始密码子选择。

? 单击任何氨基酸(或者codon位臵),该密码子就会变成绿色,而且旁边出现一个箭头,

它就被设定为起始密码子了。如要去除,只需单击它即可。如不保存,则单击取消;如要保存,单击保存为。

序列的反向互补及反向转换

下面的步骤可以用于反向测定的序列的正确输入。 ? 选定序列。 ? 从GOODIES MENU菜单,选反向互补序列(Reverse Complement),或者把序列颠倒过来

(Reverse Sequence)命令,则被选定的序列就被翻转互补或翻转过来了。

BLAST检索

下面我们将在NCBI的BLAST服务器上对TETHIS21序列进行相似性比较。注意为了进行BLAST查找必须保证因特网的连接。如果你没有连接因特网,跳过这部分,继续下一部分。 ? 选定序,或者从EDIT菜单中选择Select All。 ? 从网络检索菜单(NET SEARCH MENU),

选择BLAST查找。BLAST对话框就会出现。

? 程序默认为blastn,数据库默认是nr,

参数转换请参照帮助。 ? 单击OK开始查找。

? 寻找结果显示为两部分(如下)。上边的部分是按可能性的顺序显示检索到的序列的名

字,下面的部分显示上面部分选定序列与提交序列(上边序列)比较的具体结果。有关“score”和“expectation”的详细的信息在NCBI’s网点——http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST.——可以找到。一般来说,更主要的score和更低的expectation提示较好的相似性。

? BLAST结果窗最上边的3钮被

用来打开,或者保存检索到的

序列,或者让你了解更多的有关信息。

下面我们从用“Create Document”钮来打开评分最高的5序列开始:

? 单击Create Document。一个小的对话框

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出现。

? 在左上角有一个下拉菜单显示默认(default)。单击下拉菜单,选顶端(Top)。并在右

面的文本框中写入5。

? 单击OK,EditSeq自动查对多余序列。如果EditSeq提示至少2序列是同一个,请点击

OK。EditSeq将从因特网数据库下在单一的序列,并分别打开一个单独的EditSeq窗口。

下面我们用“Batch Save”钮将3-10序列保存为EditSeq文件:

? 选定从顶端起第3个序列。单击Batch Save。小的灰色的对话框出现。 ? 单击下拉菜单,选Next。并在右面的文本框中写入8。 ? 点击Set Location,显示文件夹对话框。

? 选定你要保存序列的位臵。单击OK回到灰色的对话框。 ? 单击OK保存序列,文件扩展为“.seq”。在下载过程期间,EditSeq自动查对重复的序

列。如果EditSeq提示至少2序列是同一个,请点击OK。 ? 除非你收到错误信息,否则可以认为你的序列已经成功下载。

最后我们可以使用“Launch Browser”钮查看序列的详细信息 ? 选定序列。

? 选择Launch Browser。 ? 你的网络浏览器将打开

右面的窗口。

序列信息查看

现在我们要使用EditSeq菜单指令查看有关打开的TETHIS21序列的信息。 ? 选定序列的一部分。如

果你倒是希望全选序列,从EDIT MENU菜单,选择Select All。 ? 从GOODIES MENU菜单,选DNA Statistics。

就会出现右面的窗口,显示序列信息。

序列校读

在我们学习保存和输出序列之前,下熟悉一下EditSeq的校读功能

这功能能帮助你校正测序胶中的错读。 ? 选定序列。

? 单击校对发音图标(序列窗口底部张开的

嘴),或者从SPEECH MENU,选Proof-Read Sequence。

? 电子的音声就会开始朗读所选的序列。(注:如果你听不见任何声音,检查你的计算机

的喇叭是否已经打开。)

? 要改变音声read-back的速度,从SPEECH MENU菜单,选择Faster or Slower。

? 要停止校读,点击图标(手),或者从SPEECH MENU菜单,选择Proof-Read Sequence。

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