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秦艽提取液的抗炎研究
代传洋 段丽 徐云浩 朱晨曦
（贵阳中医学院药学院，贵州 贵阳 550002）
【摘要】目的：研究秦艽水提醇沉液的抗炎作用。方法：KM小鼠随机分成生理盐水组，氢化可的松组和秦艽水提醇沉液组，用二甲苯涂抹致小鼠耳廓肿胀方法观察秦艽水提醇沉液的抗炎作用。结果：秦艽水提醇沉液（0.2g/10g）能明显抑制小鼠耳廓肿胀 (P<0.01)。结论：秦艽具有一定的抗炎作用。
【关键词】秦艽，抗炎，耳廓肿胀
Anti-inflammatory Research deposited with alcohol aqueous extract of Gentiana
Dai Chuanyang,Duanli,Xuyunhao,Zhuchenxi
(College of Pharmacy,Guiyang College of Traditional Chinese Medicine, Guiyang 550002,China)
【Abstract】 Objective: To study Gentiana water and deposited with alcohol anti-inflammatory effect. Methods: KM mice were randomly divided into normal saline group, hydrocortisone group and Gentiana group, xylene-induced auricle swelling in mice smear observed Gentiana anti-inflammatory effect. Results: Gentiana water and deposited with alcohol (0.2 g / 10g) significantly inhibited mouse auricle swelling (P <0.01). Conclusion:Gentiana has a certain anti-inflammatory effects.
【Key words】Gentiana, anti-inflammatory, auricle swelling
炎症是机体对各种致炎因子引起损伤所产生的以防御反应为主的病理过程[1]，局部表现为红、肿、热、痛和功能障碍等。炎症见于多种疾病的病理过程，前期多以急性炎症为主，迁延不愈则转为慢性炎症，严重影响疾病预后和患者生活质量[2]。因此，开发安全有效的抗炎药物临床价值巨大。秦艽为龙胆科龙胆属多年生草本植物秦艽(Gentianamacrophylla Pall)、麻花秦艽(Gentianastraminea Maxim)、粗茎秦艽(GentianacrassicaulisDuthie ex Burk)或小秦艽(Gentianadahurica Fisch)的干燥根[3]。秦艽具有祛风湿，清湿热，止痹痛之功效，主治风湿痹痛，筋脉拘挛，骨节酸痛，日晡潮热，小儿疳积发热。现代研究表明， 秦艽主要含有环烯醚萜苷类，生物碱类，黄酮类，挥发油等成分， 具有抗炎、镇痛、保肝、抗氧化等多种药理作用。本实验主要考察秦艽生物碱类成分对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的抑制作用，旨在为其临床应用提供一定的实验依据。 1 材料与方法
1.1 试验药物1g/ml秦艽水煎醇沉液(贵阳中医学院，批号：20160528)；0.25%氢化可的松液(贵阳中医学院，批号：20160528)；生理盐水。 1.2 动物 KM小鼠，雌雄各半，体重18-22g，贵阳中医学院药理实验室提供 1.3 试剂 二甲苯（贵阳中医学院，20160528）
1.4 仪器 天平（DT-200 美国双杰兄弟集团有限公司）；电子分析天平（ALC-2013 北京爱科勒有限公司）；直径7-8mm打孔器。
2 方法取小鼠10只，随机分为3组，禁食不禁水正常饲养。甲组小鼠灌胃秦艽水提醇沉液0.2ml/10g；乙组小鼠灌胃生理盐水0.2ml/10g，丙组小鼠腹腔注射氢化可的松注射液（0.1ml/10g），2h后各组分别二次给药，3h后于小鼠右耳两面涂抹二甲苯0.03ml/只致肿，左耳不涂为正常耳；40min后脱颈椎处死小鼠，用7-8mm打孔器圈取左耳和右耳同一部位的圆片，于电子天平上称重，计算耳廓肿胀度（肿胀度= 右耳片重- 左耳片重），耳肿胀率
(%)=(右耳重-左耳重)/右耳重×100% ]和耳肿抑率=（对照组肿胀度- 给药组肿胀度）/ 对照组肿胀度×100 %。
3结果 秦艽水提醇沉液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀影响 秦艽水提醇沉液组和氢化可的松组小鼠的耳廓肿胀度均显著低于生理盐水对照组。相比对照组耳廓肿胀度，秦艽水提醇沉液组（P＜0.01），氢化可的松组（P＜0.05），说明秦艽水提醇沉液和氢化可的松均有一定的抗炎效果。秦艽水提醇沉液与氢化可的松注射液之间差异没有显著性意义（P＞0.05），且秦艽水提醇沉液组小鼠的耳廓肿胀率和抑制率最高，分别为39.66%、54.45%，结果见表1、图1、图2和图3。
组别 生理盐水 氢化可的松 秦艽水提醇沉液
注：与生理盐水组比较，**P<0.01，*P<0.05
表1 秦艽对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(?X±S）（n=10）
剂量（g/10g） 耳廓肿胀度（mg） 耳肿胀率（%）
0.2 0.0092±.0039 23．86
0.1 0.2
0.0075±.0038 0.0042±.0026
***
[4]
抑制率（%）
-- 18.48 54.45
36．95 39．66
% 图1 各组小鼠耳廓肿胀度图2 各组小鼠耳廓肿胀率图3 各组小鼠耳廓肿胀抑制率
% 4 讨论 炎症是机体活组织对各种损伤因子所发生的以防御为主的反应[5] 。外源性和内源性损伤因子均可引起机体细胞和组织各种各样的损伤性变
化, 与此同时机体局部和全身也发生的一系列复杂的反应, 以局限和消灭损伤因子, 清除和吸收坏死组织和细胞,并修复损伤, 这种综合的机体防御反应称为炎症[6]。炎症过程是一个复杂的病理过程，包括变质、渗出和增生这一基本病理过程，其过程伴随着血流动力学的改变、血管通透性的增加，白细胞渗出和吞噬作用、组织的增生等病理改变 [7]。血管反应是炎症过程的中心环节,来自血管内皮细胞的粘附分子是炎症反应初期的关键性因素[8]。抗炎药的作用机制是抑制体内环氧酶(COX)的生物合成，COX 分为COX-1和COX-2 两种同工酶。其中COX-2 为诱导型，各种化学、物理性损伤和生物因子激活磷脂酶A2(PLA2)水解细胞膜磷脂，生成花生四烯酸(AA)，后经COX-2 催化加氧生成前列腺素(PGs)。在炎症反应过程中，PGs 可导致血管扩张和组织水肿，与缓激肽等协同致炎。杨宇杰等[9]研究表明生物碱能抑制PGs的合成。秦艽水提醇沉液物化学成分主要为生物碱，实验结果表明其能降低小鼠耳廓肿胀度，说明其提取物具有一定的抗炎作用，其抗炎机制可能与抑制PGs 的合成有关。
炎症动物模型的成功构建是影响中药抗炎创新药物研究的重要因素之一。急性炎症模型常以二甲苯、TPA、花生四烯酸等物质作为致炎剂[10-15]。二甲苯引起的耳肿胀急性炎症模型主要引起组胺、缓激肽等炎症介质的释放，引起局部血管扩张、毛细血管通透性增加、炎症细胞浸润，造成耳部
急性渗出性炎症水肿，具有自愈性、自横性等特点。由于其致炎机制与临床常见急性炎症相似、操作简单、不需要特殊设备、见效快、复制成功率高且实验动物价格低廉等优点，广泛用于中药抗炎创新药物的抗炎效应评价和抗炎活性目标化合物的筛选等[19-20]。其致炎机理是因为它能增加毛细血管的通透性和与促进P物质的释放有关[21]。据对照组小鼠耳廓的充血程度可得出，耳的毛细血管通透性增高，渗入组织的液体增多，出现了红肿现象。秦艽水提醇沉液虽不抑制炎症的发生 ,但能加速耳廓肿胀的消退，其作用可能与增加毛细血管的通透性和抑制P物质的释放有关。
综上所述，秦艽水提醇沉液可显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，提示其对急性炎症有一定的抑制作用。其抗炎机制可能与抑制PGs 的合成，增加毛细血管的通透性和抑制P物质的释放有关。但其具体作用机制还有待进一步深入研究，进而为秦艽临床应用提供可靠的依据。
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