发布时间 : 星期一 文章生物分离工程 第二、三章综合测试更新完毕开始阅读
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B 某组分的层析峰
C 整个层析分离过程所得的各组分流出曲线 D层析分离过程所得的单组分流出曲线
6. 色谱的速率理论模型中不包括下列哪一项对柱效的影响（D ） A 涡流扩散 B 分子扩散 C 传质阻力 D 理论塔板高度 7.下列哪项不是按柱色谱的洗脱方式（C ）
A 前沿分析 B 置换展开 C 吸附分析 D 洗脱展开
8.下列哪项不属于分析型HPLC的特点（D ）
A 溶质浓度低 B 色谱峰对称 C 可利用保留时间定性 D 非线性色谱 7. 实验室常用制备色谱柱的材质是（ A ）
A 玻璃 B 铝合金 C 铁 D 铜
8. 下列哪项不是色谱过程的理论模型（C ）
A 平衡模型 B 理论板模型 C 不平衡模型 D 传质速度模型
9.色谱柱柱径增大时，样品的负载量可以成（ B ）的增加，但是流动很难均匀，需同时延长柱长。
A.对数 B.平方 C.正比 D.反比
10.理论塔板数越多，洗脱峰越窄，柱效（ B ），溶质之间的分离度越好。
A.不变 B.越高 C.越低
11. 线性梯度洗脱过程，流动相的洗脱能力线性增大，因此，溶质的（ C ）连续降低，移动速度逐渐增大。
A.溶解度 B.扩散系数 C.分配系数 D.分离度 12. 液相速度理论：HETP=A/u+B+Cu，一下表达错误的是：（B）
A 液相中A项可忽略
B B项与柱子的直径直接相关，直径越小越有利
C B项是与填充物颗粒有关的项，粒度越小，越均匀，可以减少涡流扩散，提高理论板数。
D C项也与填充物颗粒有关的项，与粒度直径的平方成正比，通过减低流速和采用小的固定相粒径，可以减少传质阻力。
四、判断题
1. 色谱法就是分离有色物质的方法。 （ ） 2. 层析法的最大特点是分离效率高，但它只能分离各种性质相类似的物质。 （ ）
3. 固定相是层析的一个介质。它可以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定键合在硅胶等表面的液膜）。 （ ）
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4. 分配系数是指在一定的条件下，某种组分在固定相和流动相中分配达到平衡时的浓度比值。（ ）
5. 在色谱分析中，通常是根据色谱峰的位置来进行定性分析，根据色谱峰的面积或高度进行定量分析的。 （ ）
6. 柱层析中，当柱长L一定，理论塔板数n愈大，柱效愈低。 （ ） 7. 分配系数大的溶质与固定相的相互作用力大，随流动相移动的速度也大。 （ ） 8. 分离度为1的时表明相邻两色谱峰完全分离。 （ ） 9. 纸色谱多用于分析目的，柱柱色谱多用于制备分离。 （ ） 10. 大规模制备分离最常用的是液相柱层析。 （ ） 11. 置换展开是最常用的色谱分离法。 （ ） 12. 柱色谱易于放大，适用于大量制备分离，是主要的色谱分离手段。 （ ）
13. 径向色谱的优点是规模放大时半径不变，通过增大柱高提高处理能力，而增大柱高不会增加分离时间。 （ ）
13. 平衡模型假定整个色谱柱中不存在传质阻力，溶质在固定相和流动相中的分配平衡均瞬间完成。 （ ）
14. 在理论板模型中，理论板数越多，洗脱峰越窄，溶质之间的分离程度越 好。 （ ） 15. 色谱法根据固定相的状态分气相色谱法、液相色谱法、超临界流体色谱法。 （ ）
17. 在分析性色谱时，同一位置的峰不一定只有一种物质，但同一物质可能在不同位置出峰。 （ ）
18. 在色谱图中，在不同时间出的峰，一定不是同一物质。 （ ） 19. 在色谱图中，半峰宽是峰高一半时的峰宽，不是峰底宽的一半。 （ ）
20. 在色谱图中，在峰高的垂直高度为0.607h时，此时的峰宽大小等于二倍的标准偏差。 （ ）
21. 分离度随理论板数的增大而减小，当两种溶质的分配系数相差较小时，需要较小的理论板数，才能获得足够大的分离度。 （ ）
22. 在一定温度下，当溶质浓度较低时，此时溶质在在两相之间的分配呈线性关系 （ ） 23. 溶质浓度较高时，其洗脱时间会随浓度变化，会出现拖尾现象或前导现象。 （ ） 24. 柱子的分离效率与柱长成正比，与柱径成反比。 （ ） 五、简答题
1. 简述上样量和色谱柱的柱长和柱径的关系.
柱子的分离效率与柱长成正比，与柱径成反比，一般l/d=20~30，柱子直径为2~15cm，柱径增大时，样品负载量可以成平方的增加，但是流动很难均匀，分离效果较差；因而较大的柱径，需要更长的色谱柱。 2. 色谱过程的理论模型有哪些？试分述其要点。 1.平衡模型：
平衡模型假定整个层析柱不存在传质阻力，溶质在固定相和流动相中的分配瞬间完成。
在一定温度下，当溶质浓度较低时，此时溶质在两相之间的分配呈线性关系，其相应的色谱过程为线性色谱。 当溶质浓度较高时，分配系数Kd为溶质浓度的函数，此时，溶质在两相之间的分配呈非线性关系，其相应色谱过
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程为非线性色谱。
不同浓度的溶质洗脱时间不同，会出现拖尾现象或前导现象。
2. 理论板模型认为溶质的分配平衡不能在瞬间完成，而需要一定的样高，在此柱之内，溶质在两相间达到平衡。通常将溶质达到一次平衡的层析柱段成为一个理论板，该柱段的高度称为理论当量高度（HELP）。 理论塔板数越多，洗脱峰越窄，柱效越高，溶质之间的分离度越好。 3.传质速率模型：
传质速率模型考虑了溶质在流动相和固定相间的传质速率以及流动相的流动状态，确定色谱分离性能的影响因素。 = HETP u
A
+B+Cu A、B、C：常数，与速度无关。A为分子扩散（纵向扩散）系数，B为涡流扩散项 C为传质阻力系数
在液相色谱中，分子在液相中的扩散系数要小得多，因此A项可忽略不计 在气象色谱中，分子在气相中的扩散系数很大，因此A项不可忽略
B项是与填充物颗粒有关的项，粒度越小，越均匀，可以减少涡流扩散，降低HETP，提高理论板数
C项也是与填充物颗粒有关的项，与粒度直径平方成正比，通过降低流速与采用小的固定相粒径，可以较少传质阻力，从而降低HETP，提高理论板数
降低流速意味着增加分离时间，故采用细粒径的方法可以同时保证分离操作的高速度和高精度，这是高效液相色谱的理论基础。
3. 试描述色谱传质速率模型中范第姆特（van Deemter）方程的一般形式，并根据方程说明如何降低液相色谱的HETP，提高分离效率。 A
HETP = u
+B+Cu A、B、C：常数，与速度无关。A为分子扩散（纵向扩散）系数，B为涡流扩散项 C为传质阻力系数
在液相色谱中，分子在液相中的扩散系数要小得多，因此A项可忽略不计 在气象色谱中，分子在气相中的扩散系数很大，因此A项不可忽略
B项是与填充物颗粒有关的项，粒度越小，越均匀，可以减少涡流扩散，降低HETP，提高理论板数
C项也是与填充物颗粒有关的项，与粒度直径平方成正比，通过降低流速与采用小的固定相粒径，可以较少传质阻力，从而降低HETP，提高理论板数
降低流速意味着增加分离时间，故采用细粒径的方法可以同时保证分离操作的高速度和高精度，这是高效液相色谱的理论基础。
第七章 色谱 （下）
一、 名词解释
凝胶过滤色谱：凝胶过滤色谱利用凝胶粒子（通常称为凝胶过滤介质）为固定相，是根据料液中溶质相对分子质量
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的差别进行分离的液相色谱法。
溶胀率：干燥凝胶颗粒使用前要用水溶液进行溶胀处理，溶胀后每克干凝胶所吸收的水分的百分数成为溶胀率。即溶胀率=100%×（ 溶胀处理平衡后重量-干燥重量）/干燥重量。
床体积：凝胶干粉的窗体积是指1g干胶粉充分溶胀后所占有的体积。可用于估算装满一定体积的色谱柱所需的凝胶干粉量。
排阻极限：凝胶过滤介质的排阻极限是指不能扩散到凝胶网络内部的最小分子的相对分子质量。 分级范围：即能为凝胶阻滞并且相互之间可以得到分离的溶质的相对分子质量范围。
离子交换色谱：离子交换色谱利用离子交换剂为固定相，是根据荷电介质与离子交换剂之间静电相互作用力的差别进行溶质分离的洗脱色谱法。
反相色谱：利用表面非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，是根据溶质极性（疏水性）的差别进行分离纯化的洗脱色谱法。
ODS柱：一种常用的反相色谱柱。固定相，常用十八烷基(ODS)键合相，因此称为ODS柱
也叫C18柱。它是长链烷基键合相，有较高的碳含量和更好的疏水性，对各种类型的生物大分子有更强的适应能力。 疏水作用色谱：利用表面偶联弱疏水性集团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，是根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行蛋白质类生物大分子分离纯化的洗脱色谱法。 疏水性吸附剂：各种凝胶过滤介质经偶联疏水性配基后均可用作疏水性吸附剂。
亲和色谱：是利用亲和吸附作用分离纯化生物物质的液相色谱法。亲和色谱的固定相是键合亲和配基的亲和吸附介质（亲和吸附剂）。
亲和吸附剂：将亲和配基共价偶联在固体粒子（配基的载体）的表面（孔内）即可制备亲和吸附剂。亲和吸附剂又称亲和载体。 二、填空题
1. 凝胶色谱是以__________的__________结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的____________进行分离的一种
色谱分离技术。
2. 凝胶色谱按其流动相的不同分为____________和__________________。
3. 凝胶色谱柱的总体积分为3个部分，即为____________、_____________和____________。在凝胶色谱中，分
配系数Kd表示 ，Kd=1意味着 ，Kd=0意味着 ，0 4. 凝胶一般为球形，其 对分离度有重要影响。其越小，HETP ，分离效率 。 5. 凝胶过滤色谱的主要用途有____________、_____________和____________。 6. 凝胶色谱柱的外水体积可以用 来测定。 7. 凝胶过滤色谱常用的凝胶有 和 。 8. GFC一般采用 方式进行洗脱展开，这种洗脱法称 。 9. 离子交换色谱是以 为固定相，根据_____________________而进行分离的一种色谱分离技术。适合于 ____________________物质的分离。 10. 在离子交换色谱中，线性梯度洗脱过程中，流动相的离子强度线性增大，因此溶质的分配系数_________，移 动速度__________。