发布时间 : 星期五 文章湘雅分子生物学试题07级更新完毕开始阅读
与原来的DNA断链连接起来。这样完成的修复能使DNA恢复原来的结构（1分）。
4. PCR在基因分析和基因诊断中有哪些应用？
进行DNA体外扩增1分、基因克隆 1分（或PCR原理2分）， 分析基因拷贝数1分（定性定量分析）（PCR-SSCP或DNA序列分析或甲基化分析） 1分，基因突变的诊断1分。
5. RNAi技术的原理是什么？
长双链RNA被细胞内的双链RNA（1分）特异性核酸酶切成21-23个碱基对的短双链RNA，称为小干扰性RNA（1分），siRNA与细胞内的某些酶和蛋白质形成复合体（1分），该复合体可识别与siRNA有同源序列的mRNA（1分），并在特异的位点将该mRNA切断（1分）。（或基本意思一致也给分）。
6. 葡萄糖不存在和乳糖存在时乳糖操纵子如何进行复合调控？
葡萄糖不存在CAP1分发挥正调控作用1分，乳糖存在，阻遏蛋白由于诱导剂的存在1分而失去负调控作用1分，基因被打开，启动转录1分（或基本意思一致也给分）。
7. 什么是诱导表达和阻遏表达？
在特定环境信号刺激下1，有些基因的表达表现为开放或增强1，这种表达方式称为诱导表达1，相反，有些基因的表达表现为关闭或下降1，这种表达方式称为阻遏表达1。（或基本意思一致也给分）
8. 基因治疗的基本策略有哪些？ 基因置换（1分）：指将特定的目的基因导入特定细胞，通过定位重组，以导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因。 基因添加（1分）：通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。 基因干预（1分）：采用特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因的结构而使之不能表达，以达到治疗疾病的目的。 自杀基因治疗（1分）：将“自杀”基因导入宿主细胞中，这种基因编码的酶能使无毒性的药物前体转化为细胞毒性代谢物，诱导靶细胞产生“自杀”效应1分。 （或答基因修饰，基因抑制也给分）
四、 论述题:（每题15分，共30分）
1. 在基因克隆过程中，重组DNA导入大肠杆菌后如何筛选和鉴定阳性克隆？ i. 传学方法1分 1. 抗生素筛选法：（单抗生素筛选、双抗生素筛选1分 2. 蓝-白筛选（α互补） 1分）
ii. 免疫学方法（western blot）1分：标记抗体1分，表达蛋白1分 iii. 核酸杂交法1分：探针互补（杂交）1分，变性1分
iv. PCR技术（DNA序列分析）1分：设计特异性引物1分，鉴定扩增产物1分 v. 酶切鉴定1分,内切酶选择，电泳检测图谱1分 总分15分，论述得当加1分
2. 分别以大肠杆菌和人类为例，比较原核生物与真核生物基因、基因组的各自特点。
原核生物 真核生物
结构基因连续（无内含子） 断裂基因（有内含子）, RNA合成需剪接1分 RNA合成无剪接 1分
有操纵子结构，1分 一般无操纵子结构1分
结构基因转录为多顺反子 结构基因转录为单顺反子 1分 （多基因同时转录） 1分 （各基因分别转录）
双链环状DNA分子，单复制起点1分 染色体DNA，多复制起点1分
可有质粒 线粒体DNA
基因组小，基因密度高，1分 基因组大，基因密度低，重复序列多1分
重复序列少 非编码序列多于编码序列 1分 非编码区主要是调控序列 1分 有多基因家族和假基因
有可转移的DNA片段（转座因子）1分
有编码同式酶的同基因1分
不同的原核生物GC含量变化大 1分 A 卷题
一、判断题：(每题1分，共10分；对的打“√”，错的打“X”)1.现代分子生物学的研究几乎都是围绕核酸和蛋白质进行的。 （√ ） 2.原核生物翻译效率受SD序列顺序的影响，与SD序列的位置无关。 （ X ）3.重组修复是先进行复制再进行切除修复。 （√ ）4.在同样的环境条件下，具有不同遗传背景的人发病的几率或病情的进展不同。（ √）5.点突变是指一个嘌呤碱基被嘧啶碱基取代或一个嘧啶碱基被嘌呤碱基取代。 （ X ）6.基因诊断可检测基因突变引起的疾病，不能检测外源性致病基因引起的疾病。（ X ）7.基因置换是通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。 （ √）8.差异显示PCR是目前使用的研究转录子组的主要方法之一。 （ √）9.Northern blot常用于检测RNA, Western blot常用于检测DNA。 （ X ）10.反义RNA可增强基因表达，RNA干涉可沉默基因表达。 （ X ） 二、单项选择题： （每题2分，共40分）1. 以下哪项属于真核生物基因的顺式作用元件 ： （ C ）A.内含子 B. 外显子 C.增强子 D.操纵子 2. 以下哪种病毒的基
因组是单股负链RNA： （ B ）A.SARS冠状病毒 B.H5N1禽流感病毒 C.呼肠孤病毒 D.人类免疫缺陷病毒3. 原核生物
与真核生物基因组比较，以下哪项是原核生物的特点： （ A ）A.基因密度高 B.无操纵子结构 C.有多基因家族和假基因 D.多复制起点
4.以下不产生高度多态性的重复序列是： （ A ）
A.大卫星DNA B.小卫星DNA C.微卫星DNA D.回文结构
5.当DNA损伤严重时，应急而诱导产生的修复作用是以下哪项： （ D ）
A.直接修复 B.切除修复 C.重组修复 D.SOS修复 6.反式作用因子的激活方式不包括： （ C ）
A.表达式调节 B.共价修饰 C. DNA成环 D. 蛋白质相互作用 7.真核生物的转录调控作用主要是反式作用因子与顺式作用元件 结合后影响以下哪项的形成： （ B ）
A. RNA聚合酶 B. 转录起始复合物 C.启动子 D.DNA结合域 8.可检测基因拷贝数变化的是： （ C ）
A.生物质谱技术 B.双向电泳 C.PCR D.RNAi
9.可用于分析基因转录水平的变化的是 （ A ）
A.RT-PCR B. PCR-SSCP C.Southern blot D.DNA测序 10.Southern 杂交的原理是根据基因序列合成探针，利用同源互补序列可以退火形成： （ A ） A. 杂交双链DNA B. 杂交三链DNA C. 杂交双链DNA-RNA D. 杂交双链RNA
11.反义RNA 是指能与以下哪项互补配对的RNA分子： （ D ）
A. cDNA B.编码链DNA C.反义链的DNA D. mRNA
12.RNA干涉是指由以下哪项诱导的同源mRNA降解过程： （ A ）
A.双链RNA B.单链RNA C.双链DNA D.单链DNA
13.以下哪项不是真核细胞转染的方法： （ D ）
A．磷酸钙沉淀法 B．电穿孔法 C．脂质体介导法 D．氯化钙转化法
14.在大肠杆菌中表达真核细胞的目的基因时，下列描述正确的是： （ A ）
A.目的基因必须是cDNA B.目的基因必须是基因组DNA
C.目的基因必须是mRNA D.必须保留目的基因5’端非编码区 15.无义突变是 ： （ B ）
A. 产生另一种氨基酸排列顺序不同的蛋白质 B. 突变后产生缩短的多肽链
C. 产生的一种氨基酸序列相同的蛋白质 D. 不产生异常蛋白质
16.移码突变由以下哪种原因造成： （ B ）
A.点突变或替换 B.缺失或插入 C.倒位或易位 D.转换或颠换 17.以下哪项不是基因诊断的特点： （ D ）
A.高灵敏度 B.结果稳定 C.早期诊断 D.依赖表型改变
18.在基因治疗中基因转移的生物学方法是以什么作为基因转移系统： （ B ）
A.质粒载体 B.病毒载体 C.脂质体 D.粘粒
19.在基因治疗中常用的抑制基因表达的技术不包括： （ C ）
A.反义RNA B.RNAi C.双链DNA D. 核酶
20.生物质谱技术常用于以下哪项的研究中： （ D ）
A.基因组学 B.RNA组学 C.转录子组学 D.蛋白质组学 三、填空题： （每空1分，共20分）
1.分子生物学是从 分子水平 研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。 2.真核生物的结构基因转录为 单顺反子 mRNA，并需要转录后加工。
3.原核生物转座因子可以分为以下三类：插入序列、 转座子 、Mu噬菌体。
4.切除修复是细胞内最普遍的修复机制，其过程包括： 识别 、切除、合成、连接。 5. 根据切除部位的大小，切除修复可分为两类，其中核苷酸 片段 切除修复是细胞内更为普遍的修复方式。
6. 色氨酸操纵子受R基因编码的阻遏蛋白调控外，还受L基因编码的 衰减子 调控。 7. 在特定环境信号刺激下，有些基因的表达表现为关闭或下降，这种表达方式称为 阻遏 表达。
8. RT-PCR是一种以 mRNA 为模板的体外扩增cDNA的技术。
9. RNA诱导的沉默复合物(RISC)是 SiRNA（小干涉性RNA）或短双链RNA 与细胞内某些酶和蛋白质形成 的复合体。
10. 转基因技术是指将 外源基因或目的基因或外源DNA 导入受精卵细胞或胚胎干细胞中，通过随机重组插入到染色体DNA中。
11. 基因敲除是指通过 同源重组 定向地将外源基因插入宿主细胞染色体DNA，从而使特定基因在细胞内或生物活体内失活的过程。 12. 限制性核酸内切酶分为三种类型，其中 Ⅱ 型限制性核酸内切酶能在DNA分子内部的特异位点，识别和切割双链DNA，其切割位点的序列可知、固定。
13. 在体外连接DNA的方法中， 粘性 末端最适合DNA片段的连接。
14.基因一级结构的某个位置增加一个核苷酸或一段核苷酸序列形成的基因结构改变称为 插入 突变 。
15. 基因诊断的主要技术有：核酸分子杂交 、 PCR扩增 、 DNA序列测定、DNA芯片技术。
16. 制备合适的 探针 是核酸分子杂交用于基因诊断的关键。
17. 遗传病的间接基因诊断是检测与致病基因连锁的 遗传标志（记） 。