发布时间 : 星期日 文章华研化验室监测项目操作方法更新完毕开始阅读
三、试剂
1、纳氏试剂：可选择下列一种方法制备
称取16g氢氧化钠，溶于50ml水中，充分冷却至室温。另称取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。
称取20g碘化钾溶于约100ml水中，边搅拌边分次少量加入二氯化汞结晶粉末（约10g），至出现微量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加氯化汞溶液。另称取60g氢氧化钾溶液水，并稀释至250ml，充分冷却至室温后，将上述溶液在搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液，用水稀释至400ml，混匀。静置过夜。将上清夜移入聚乙烯瓶中，密塞保存。
显色基团为[ＨｇＩ4]2-,它的生成与Ｉ-浓度密切相关。开始时,Ｈｇ2+与Ｉ-按反应(1)式生成红色沉淀ＨｇＩ2,迅速与过量Ｉ-按反应(2)式生成[ＨｇＩ4]2-淡黄色显色基团;当红色沉淀不再溶解时,表明Ｉ-不再过量,应立即停止加入ＨｇＣｌ2,此时可获得最大量的显色基团。若继续加入Ｈｇ Ｃｌ2,反应(3)式和(4)式就会显著进行,促使显色基团不断分解,同时产生大量ＨｇＩ2红色沉淀,从而引起纳氏试剂灵敏度的降低。
2、酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以去除氨，放冷，定容至100ml。
3、铵标准溶液：称取3.819g经100℃干燥过的优级纯氯化氨溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。
4、铵标准使用溶液：移取5.00ml铵标准贮备液于500ml容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含0.01mg氨氮。 四、步骤
1、标准曲线的绘制：
吸取0、0.5、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml铵标准使用液于50ml比色管中，加水至标线，加1.0ml酒石酸钾纳溶液，混匀。加1.5ml钠氏试剂，混匀。放置10min后，在波长420nm处，用光程20mm比血皿，以水参比，测量吸光度。
由测得的吸放度，减去零浓度空白的吸光度，绘制以氨氮含量（mg）对校正
吸光度的校正曲线。 2、水样的测定：
水样测定：分取适量经絮沉淀预处理后的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50ml比色管中，稀释至标线，加1.0ml酒石酸钾纳溶液，1.5ml钠氏试剂，混匀。放置10min后，在波长420nm处，用光程20mm比血皿，以水参比，测量吸光度。 3、空白试验：
空白实验：分取适量经蒸馏预处理后的馏出液（以无氨水代替水样，做全程序空白测定），加入50ml比色管中，加一定量1mol/L氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线。加1.5ml钠氏试剂，均匀。放置10min后，同校准曲线步骤测量吸光度。 4、计算
由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含量mg。
氨氮（N，mg/L）=m/V×1000
式中：m－由校准查得得氨氮含量（mg）；
V－水样体积（ml）。
注意事项：配制试剂用水均应为无氨水。
总氮的测定
1、原理：
总氮含量主要是指水样中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机氨盐、溶解态氨以及大部分有机含氮化合物的总和。
在60℃以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子，分解出的原子态氢在120~124℃条件下，可使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐。并且在此过程中有机物同时被氧化分解。用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，测出其吸光度A220和A275按A=A220-2A275求出A，按A的值查校准曲线并计算总氮含量。国标分析方法GB11894-1989的最低检出浓度为0.050mg/L，测定上限为4mg/L。
2、试剂:无氨水、碱性过硫酸钾溶液、10mg/L硝酸钾标准溶液、1+9盐酸溶液。
3、仪器设备:722分光光度计、医用手提式蒸气灭菌器、25ml具玻璃塞比色管。 4、分析测定:取10ml试样置于比色管中，加入5ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞用布及绳等方法扎紧瓶塞，以防弹出。将比色管置于医用手提式蒸气灭菌器中，保持120~124℃加热半小时并冷却后，向比色管中加入1ml（1+9）盐酸溶液，用无氨水稀释至25ml标线。
取部分溶液于比色皿中，722分光光度计上，以无氨水作参比分别测定波长为220nm和275nm处吸光度。
5、标准曲线:按水样分析步骤，制作0—4mg/L的标准曲线，见下表： A220-2A275 A-A0 浓度（mg/L）
磷酸盐的测定 （钼酸铵分光光度法）
一、方法与原理
在中性条件下用过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性条件下，正磷酸盐（NH4）6M07024、K（Sb0）C4H4O6反应，生民磷钼杂多酸，被还原剂抗环血酸还原，则变成蓝色络合物，通常称磷钼蓝。 二、干扰及消除
As含量大于2mg/l有干扰，可用Na2S2O4去除。硫化物含量大于2mg/l干扰，在酸性条件下通N2去除，Cr+6大于50mg/l有干扰，用Na2SO3去除。亚硝酸盐大于1mg/l有干扰，用氧化或加氨磺酸去除。铁浓度为20mg/l使结果偏低5%。 三、仪器 分光光度计。 试剂（1+1）H2SO4。 四、试剂：
1、过硫酸钾，50g／L溶液：将5g过硫酸钾(K2S2O8)溶解干水，并稀释至100mL。 2、抗坏血酸，100g／L溶液：溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中，并稀释至100mL。此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周。如不变色可长时间使用。 3、钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于100mL水中。溶解0.35g
0.028 0.062 0.069 0.106 0.113 0.285 0.466 0.650 0.927 0 0 0.034 0.041 0.078 0.085 0.257 0.438 0.622 0.899 0.16 0.24 0.32 0.4 1.2 2 2.8 4 酒石酸锑钾KSbC4H4O7· 1 H2O]于100mL水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中，在冷处可保存二个月。
4、磷标准贮备溶液：称取0.2197±0.001g于110℃干燥2h，在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4)，用水溶解后转移至1000mL容量瓶中，加入大约800mL水、加5mL硫酸1+1用水稀释至标线并混匀。1.00mL此标准溶液含50.0μg磷。本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。
5、磷标准使用溶液：将10.0mL的磷标准贮备溶液转移至250mL容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。1.00mL此标准溶液含2.0μg磷。使用当天配制。 6、浊度一色度补偿液：混合两份体积的（1+1）H2SO4和一份体积的10%的抗环血酸溶液。此溶液当天配制。 五、步骤
1、校准曲线的绘制：
取数支50ml具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0ml，加水至50ml.
2、显色：向比色管中加入1mlL，10%抗环血酸溶液，混匀.30s后加2ml钼酸盐溶液充分混匀，放置15min.
3、测量：用10mm或30mm比色皿，于700nm波长处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度. 4、样品测定：
分取适量经滤膜过滤或消解的水样（使含磷量不超过30μg）加入50ml比色管中，用水稀释至标线。试样中加4mL过硫酸钾，将具塞刻度管的盖塞紧后，用一小块布和线将玻璃塞扎紧，放在大烧杯中置于高压蒸气消毒器(加热中如样品中含磷浓度较高，试样体积可以减少。空白试验，用水代替试样，并加入与测定时相同体积的试剂。相应温度为120℃时、保持30min后停止加热。 2.2 待压力表读数降至零后，取出放冷，然后用水稀释至标线。分别向各份消解液中加入1mL抗坏血酸溶液混匀，30s后加2mL钼酸盐溶液充分混匀. 2.3 室温下放置15min后，使用光程为30mm比色皿，在700nm波长下，以水做参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，从工作曲线上查得磷的含量。注：