发布时间 : 星期一 文章《微生物学检验》复习思考题参考答案(1)更新完毕开始阅读
第 37 页 共 80 页
黄杆菌属 ＋ O/F － 按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐，非肠杆菌科细菌除铜绿假单胞菌和不动杆菌属外，药敏试验不选用Kirby-Bauer法，应选用肉汤或琼脂稀释法或E-test法。
【附】
假单胞菌属分布广泛，土壤、水和空气中均有存在，大多为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌。代表菌种为铜绿假单胞菌。人类非发酵菌感染中，假单胞菌占70％～ 80％，主要为铜绿假单胞菌（在假单胞菌属的感染中铜绿假单胞菌的感染占70％） ，其他较为常见的菌种有荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。
铜绿假单胞菌－－培养特性
专性需氧、营养要求不高 最适温度35℃，42 ℃ 生长，4℃不生长 产生荧光素（青脓素）和蓝绿色水溶性的绿脓素，培养物呈蓝绿色。 培养物有生姜气味
铜绿假单胞菌－－菌落特征
典型菌落：扁平湿润，边缘不规则，呈伞状伸展，菌落和培养基灰绿色，表面有金属光泽
大肠菌样菌落：菌落圆形凸起，灰白色半透明，似大肠杆菌菌落 黏液型菌落：菌落光滑凸起，呈粘液状 侏儒型菌落：细小，无光泽半透明菌落 粗糙型菌落：菌落中央凸起，边缘扁平，表面粗糙 在血平板上形成透明溶血环 在SS、Mac上经过24h培养形成不发酵乳糖菌落，一般不易与沙门菌和志贺菌菌落相区别，但经48h培养菌落中央呈棕绿色。
3、铜绿假单胞菌是院内感染常见的非发酵菌，如何从烧伤患者创面脓性分泌物中检出铜绿假单胞菌？
绿色脓汁
涂片革兰染色 接种血平板和Mac平板
可疑菌落（菌落灰绿色）
革兰阴性杆菌 涂片革兰染色为革兰阴性杆菌 4℃不生长， 42 ℃生长 系列生化鉴定 氧化酶阳性 氧化利用葡萄糖、精氨酸双水解（+）乙酰胺酶（+）、明胶液化（+）、还原硝酸盐产气、利用枸橼酸盐、吲哚（-） 报告
37
宜春学院医学院 杨婧编写
第 38 页 共 80 页
4、流感嗜血杆菌所致疾病的种类以及主要鉴定依据。 致病物质：荚膜、菌毛、内毒素、 IgA蛋白酶 所致疾病：
原发感染：为有荚膜的b型菌株引起，急性化脓性感染（如脑膜炎、咽喉炎、关节炎、心包炎等），小儿多见。
继发感染：多为无荚膜菌株引起，常继发于麻疹、百日咳、肺结核等病，慢性支气管炎、鼻窦炎等成人多见。 鉴定依据：
革兰阴性小杆菌、多形性
培养采用巧克力色培养基，CO2培养 血平板上有―卫星现象‖ X、V因子需求试验
分型：可做荚膜肿胀试验,取抗体（a~f）分别与菌悬液混匀，加美蓝混合后，室温10分钟用油镜观察，如菌体呈蓝色，周围绕有膨大空白圈为阳性。
5、幽门螺杆菌的主要生物学特性与所致的疾病种类。 主要生物学特性：
⑴ 形态染色：革兰阴性，螺旋状弯曲，在胃粘膜环境中，具有典型的螺旋形或弯曲形形态，在陈旧培养物中，可呈圆球状；单端或双端有多根带鞘鞭毛，鞭毛在定居中起锚住作用；无芽孢。
⑵ 培养特性：微需氧，营养要求高，需动物血液或血清；37℃能生长，在25 ℃和42 ℃生长不良；在改良Skirrow培养基（在培养基中添加多粘菌素B(250U/ L)、万古霉素(6mg／L)、TMP(5mg／L) 、两性霉素(2mg／L)等以抑制杂菌和真菌生长）上的菌落形态为圆形孤立的小菌落，无色半透明呈露滴状。
⑶ 生化反应：不活跃，不能利用糖类；快速脲酶实验强阳性（是—种简便实用、快速敏感、较为准确可靠的诊断方法。脲酶试剂由尿素、基质、酚红指示剂等组成,将小块的活组织块放人装有尿素培养基瓶内，如培养基由黄变为红色为阳性，提示该菌脲酶已将尿素分解。适合于胃镜检查病人）为主要鉴定依据 ；过氧化氢酶和氧化酶阳性。 所致疾病：
幽门螺杆菌与人类萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡、胃黏膜相关B细胞淋巴瘤和胃癌等疾病相关。
6、临床病例题 30岁男性患者，因上腹不适1个月，饭后上腹疼痛2周就诊，胃镜检查显示十二指肠球部溃疡，溃疡部活检组织尿素酶阳性，涂片革兰染色见革兰阴性呈海鸥展翅状排列的菌体，根据临床症状、体征及初步的实验室检查，可能为何种细菌感染，简述这种细菌的主要特性。
该患者可能为幽门螺杆菌（HP）感染。
革兰阴性弯曲形细菌，运动活跃；微需氧，在有氧及无氧环境中不能生长， 最适生长温度35~37℃，在30 ℃和42 ℃均生长不良，营养要求高，普通培养基不生长，常用的培养基是布氏血琼脂、胰酶大豆血琼脂等，选择性培养基常用改良的Skirrow琼脂； 生化反应不活跃，不分解任何糖类，过氧化氢酶和氧化酶阳性，尿素酶强阳
宜春学院医学院 杨婧编写
38
第 39 页 共 80 页
性；对酸敏感，1%胆盐可抑制HP生长。
革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌
白喉棒状杆菌
1、白喉棒状杆菌的主要形态特点、培养特性、致病因素。
主要形态特点：菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状,排列不规则，呈栅栏状或L 、V、Y等文字形，有异染颗粒。
培养特性：常用培养基?吕氏血清培养基（含凝固血清的Loffler 培养基）：生长迅速，异染颗粒明显；菌落为灰白、光滑、湿润的小菌落；选择鉴别培养基??含亚碲酸钾（0.03-0.04％）血琼脂平板：黑色菌落。
致病因素：白喉外毒素 2、简述白喉毒素的致病机制。 致病机制：白喉棒状杆菌主要是产生白喉外毒素，作用与易感细胞，使EF-2失活，阻断易感细胞的蛋白质合成，引起组织坏死和病变。
3、以外毒素为主要致病因素的细菌有哪几种？ 霍乱弧菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、白喉杆菌（炭疽杆菌、鼠疫杆菌）等。其中G-菌产生外毒素的有：霍乱弧菌、鼠疫杆菌、百日咳杆菌；与典型外毒素不同，由菌细胞裂解或自溶后才能释放外毒素的细菌有：鼠疫杆菌、肉毒杆菌。 4、可引起食物中毒的细菌有哪几种？ 毒素型食物中毒：金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌等。 细菌性（传染性）食物中毒：沙门菌、副溶血性弧菌、肉毒梭菌等。 5、简述霍乱弧菌、破伤风梭菌和白喉棒状杆菌的主要致病机理分别是什么？ ① 霍乱弧菌：主要是产生霍乱肠毒素，作用于小肠黏膜上皮细胞，使ATP转变为cAMP，使cAMP水平升高，上皮细胞分泌功能增加，肠腔内水钠储留而导致上吐下泻（呕吐与腹泻）。
② 破伤风梭菌：产生破伤风毒素，作用于脊髓前角运动神经元抑制性突触前膜，阻止抑制性神经介质（甘氨酸、γ-氨基丁酸）的释放，使肌肉活动失调，导致屈肌和伸肌同时发生收缩而出现肌肉痉挛。
③ 白喉棒状杆菌：主要是产生白喉外毒素，作用于易感细胞，使EF-2失活，阻断易感细胞的蛋白质合成，引起组织坏死和病变。
6、综合分析题
（一） 患儿，女，5岁。发热、声音嘶哑、喉痛伴咳嗽4天，急诊入院。查体：体温38.5℃，面色苍白，唇稍紫，咽后壁、腭弓和腭垂等处发现灰白色膜状物，用灭菌棉拭子不易擦掉，心率130次／分钟，心律不齐。初诊为白喉。 思考题：
⑴ 本病的病菌是什么?还需做哪些微生物学检查以确定诊断?
宜春学院医学院 杨婧编写
39
第 40 页 共 80 页
⑵ 该菌是如何传播的?所致疾病怎样进行特异性预防?
提示1：病变部位假膜及边缘取材经Albert染色，找到细长微弯、一端或两端膨大呈棒状、排列不规则并有异染颗粒者，可初步确定为白喉棒状杆菌。再将标本接种于亚碲酸钾血平板或Loffler血清斜面，根据菌落特征和毒力Elerk确诊。
提示2：该菌存在于白喉病人假膜及带菌者鼻咽腔或鼻分泌物内，经飞沫传播，也可经污染物品或饮食而传播。 提示3：注射白喉类毒素是预防白喉的重要措施。我国在出生3个月以后婴儿中接种DPT三联疫苗免疫效果良好。对密切接触白喉患者的易感儿童需肌内注射1000-2000U白喉抗毒素进行紧急预防。
（二）男，3岁，某幼儿园日托小朋友。主诉：低热、食欲缺乏、喉痛3天，伴用力时呼吸困难。病史：患儿在国外生活，其免疫接种史不详。查体：发热（38.5℃），心动过速（103次/分），伴有偶发性脉搏短绌（间隙脉）。心电图（ECG）：ST波上移，二级心脏阻滞。颈部淋巴结肿大（水牛颈），咽部及扁桃体有平滑、灰白色假膜附着，无肝大。实验室检查：红细胞430万/mm3，白细胞23,000万/mm3，中性粒细胞88%，淋巴细胞12%。影象学：心肌炎改变。病理学：咽部假膜较弥散；心脏苍白，增大。渗出液涂片可见多形核白细胞，沉淀的纤维素、细胞碎片、细菌形成假膜。上呼吸道粘膜充血、水肿和坏死。 思考题：
⑴ 你将用哪些药物作经验性治疗？ ⑵ 怎样进一步确诊？
⑶ 对幼儿园同班小朋友应采取什么措施？ ⑷ 灰白色假膜是怎样形成的？ ⑸ 为什么会出现心率不齐？
提示1：注射白喉抗毒素及抗生素如青霉素或红霉素。
提示2：咽部病变部位取材培养，Albert染色可见菌体内的异染颗粒。吕氏血平板分离培养鉴定为白喉杆菌。Elek平板毒力试验证实为产毒的白喉杆菌。
提示3：白喉棒状杆菌感染机体后，在鼻、咽部黏膜上生长繁殖并分泌外毒素引起局部及全身中毒症状。鼻、咽部黏膜局部由于细菌和毒素的作用，局部血管扩张充血，血浆纤维素外渗，渗出的纤维素和白细胞及坏死组织凝固在一起形成灰白色膜状物，即假膜。 提示4：白喉棒状杆菌感染机体后，在鼻、咽部黏膜上生长繁殖并分泌外毒素引起局部及全身中毒症状。外毒素的B亚单位可与心肌细胞上的受体结合，将A亚单位引入细胞，使延伸因子-2（EF-2）灭活，影响心肌细胞蛋白质的合成，从而出现心肌炎的改变而出现心率不齐。
分枝杆菌属
1、名词解释：抗酸杆菌；卡介苗；结核菌素试验；麻风细胞（或泡沫细胞）
⑴ 抗酸杆菌：分枝杆菌属是一类细长略弯曲的杆菌，由于其菌体含大量分枝菌酸，故不易着色，但加温或延长染色时间后能抵抗盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌。 ⑵ 卡介苗（BCG）：是用牛型结核分枝杆菌制成的减毒活疫苗。（是卡-介二氏将有毒力的牛型结核分枝杆菌培养于含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经13年230次传代而获得的毒力减弱但仍保留免疫原性的变异株，即卡介苗。现广泛用于人类结核病的预防）。
宜春学院医学院 杨婧编写
40