发布时间 : 星期三 文章鐢熺墿璐ㄨ氨鍦ㄨ泲鐧借川缁勫鐮旂┒涓簲鐢?- 鐧惧害鏂囧簱更新完毕开始阅读
结 论
建立了一种以稀土元素为质量标签的自主创新的定量蛋白质组新方法，该方法具有以下的优点：
? 化学试剂价廉易得
? 化学标记反应条件温和，为普遍标记，无肽段歧视
? 肽段的二级图谱为连续的y系列离子，可提高蛋白鉴定的可信度
? 有８种稀土元素是单同位元素，有28种自由组合，可大大扩展质量标签的
选择范围
基于酸酐双功能试剂修饰辅助、结合
稳定同位素18O标记的蛋白质组定量新方法
方法特点
? 化学18O标记方法，无回交现象；化学与酶切结合的18O标 记方法，无同位素峰重叠
? 标记肽段在MS/MS谱图中是连续的y系列离子，简化图 谱，提高鉴定可靠性
? 标记试剂价廉易得、反应简单快速、反应体系兼容，为 普遍标记的方法
? 同一样本两种18O标记定量方法，节省样本准备的时间、 减少实验误差。
? 两种定量结果可以互相验证，显著提高蛋白质组定量的 准确性和可靠性。
乙酸酐稳定同位素标记-液质联用蛋白质组相对定量新方法
开发了自动化定量分析软件：MSAQ MALDI MS 实验流程
ESI MS 实验流程
方法特点：标记试剂价格低廉、反应条件温和。
应用1：国际脑脊液项目合作研究项目，即亨廷顿病人脑脊液中蛋白质的 变化；
应用2：对正常对照（S0）、无症状携带（S1）、肝炎轻度（S2）、中度 （S3）和重度（S4）肝炎五期血浆样本进行了定量分析，发现具有 两倍以上差异的蛋白质185种。
应用3：功能蛋白质组承担的肝纤维化血浆标志物研究课题。 建立18O稳定同位素标记-质谱用于磷酸化肽段或 磷酸化蛋白质的相对定量的方法 基本原理