发布时间 : 星期日 文章3 蛋白质化学 生物化学习题汇编 sqh更新完毕开始阅读
(3)Trp-Ile- PH e；Arg-Ile- PH e (4)Cys-Cys-Ser;Ala-Ala-Ser[1]
11、分析下列肽段在 pH 1.9， pH 3.0， pH 6.5和 pH 10.0 下进行纸电泳时的移动方向(分别用下列符号表示：不动[O]，移向阴极[C]，移向阳极[A])。 (1)Lys-Gly-Ala-Gly (2)Lys-Gly-Ala-Glu (3)His-Gly-Ala-Glu (4)Glu-G1y-Ala-Glu (5)Gln-Gly-Ala-Lys[2]
12、如果上题中五个肽的混合物，在Dowex-1(一种阴离子交换树脂)的离子交换柱上以 pH 值从10到1.0连续变化的缓冲系统作洗脱，试分析每种肽洗脱的相对次序。[3] 13、分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽，如能，则指出其水解部位。[4]
肽
(1) Phe-Arg-Pro
1
酶
胰蛋白酶
10、用纸层析分离氨基酸或肽是根据它们在两种互不相溶的溶剂中分配系数(K)的不同。
K=溶质在固定相中的浓度/溶质在流动相中的浓度
纸层析通常以滤纸上吸附的水为固定相，有机溶剂为流动相。物质的极性越小(即非极性越大)，在有机溶剂中分配就越多，迁移率就越大；反之物质极性越大，迁移率越小。所以在题中所给条件下，它们的相对移动速度如下： (1)Lys-Lys ≈ Lys (2)Leu-Leu-Leu＞Leu (3)Trp-Ile-Phe＞Arg-Ile-Phe (4)Ala-Ala-Ser＞Cys-Cys-Ser
2
11、根据它们在不同pH值时带的电荷不同，从而确定电泳时的移动方向。现将结果总结于下表：
pH值 移动方向 肽 Lys-Gly-Ala-Gly Lys-Gly-Ala-Glu His-Gly-Ala-Glu Glu-Gly-Ala-Glu Gln-Gly-Ala-Gly
C C C C C
C C C 0/C C
C 0 0/A A C
A A A A A
1.9 3.0
6.5
10.0
3
12、在pH 10 时，题中的各种肽均带负电荷，都能与Dowex-1上的阴离子发生交换。肽带的负电荷愈多，与Dowex-1树脂的结合能力就愈强。题中肽(4)带的负电荷最多，其次是(3)，再次是(2)，肽(1)和(5)带的负电荷最少且相近。随着洗脱时pH值的下降，带负电荷少的最先洗脱下来，所以其洗脱次序为(1)≈(5)，(2)，(3)，(4)。
4
13、(1)不能，因为Arg与Pro连接。
(2)不能，因为羧肽酶B仅仅水解C端为Arg或Lys的肽。
(3)不能，因为胰凝乳蛋白酶主要水解Phe，Trp，Tyr和Leu的羧基形成的肽键。 (4)能．胰蛋白酶可作用于Arg和Met之间的肽键，产物为Pro-Arg和Met。
(2) Phe-Met-Leu (3)Ala-Gly- Phe (4)Pro-Arg-Met 羧肽酶B
胰凝乳蛋白酶 胰蛋白酶
14、当一种四肽与FDNB反应后，用 6mol/L HCl 水解得 DNP-Val及三种其他氨基酸。当这种四肽用胰蛋白酶水解时形成二种碎片。其中一种碎片用LiBH4 还原后再进行水解，水解液中发现有氨基乙醇和一种与重氮苯磺酸反应生成棕红色的氨基酸。试问在原来的四肽中可能存在哪几种氨基酸，它们的序列怎样？[1]
15、某一肽经酸水解组成分析为5种氨基酸，该肽的N端非常容易环化。经溴化氰处理后得一游离碱性氨基酸，Pauly反应阳性。若用胰蛋白酶作用则得两个肽段：其一为坂口反应阳性，另一个在280nm有强的光吸收，并呈Millon阳性反应。求此肽的氨基酸序列，并指出它的等电点应该是大于、等于或小于? [2]
16、假定有1mmol的五肽，酸水解生成 2mmol谷氨酸，1mmol赖氨酸，没有能够定量回收其他氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段，在 pH 7.0 进行电泳，一个肽段移向阳极，另一个则移向阴极。用 FDNB 处理胰蛋白酶水解的一个肽段，再用酸水解，生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽生成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸序列。[3]
17、用酸水解一种六肽，定量回收得到甘氨酸及另一种氨基酸。用胰蛋白酶处理该肽生成的 1
14、(1)因为四肽与FDNB反应后，用 6mol/L HCl 水解得DNP-Vald，所以此肽 N 端为Val。
(2)用LiBh4还原后再水解，水解液中有氨基乙醇，说明此肽的C端为Gly。
(3)水解液中有一种与重氮苯磺酸反应生成棕红色的氨基酸，说明此氨基酸为His或Tyr。 (4)根据胰蛋白酶的专一性以及(1)、(2)、(3)可知四肽的序列为：Val-Arg(或Lys)-His(或Tyr)-Gly。
2
15、根据题意：
(1)N端非常容易环化，说明此肽的N瑞是Gln
(2)经溴化氰处理后得一游离碱性氨基酸，Pauly反应呈阳性，说明此氨基酸是His，并且His位于Met之后，即为…Met-His
(3)用胰蛋白酶水解得两个肽段：其一为坂口反应阳性，说明含Arg，另一个在280nm有强的光吸收且呈Millon阳性反应，说明含Tyr。根据胰蛋白酶的专一性，可知该肽含…Arg-Tyr… (4)此肽共含5种氨基酸
由(1)(2)(3)(4)可推出此肽氨基酸的序列为Gln-Arg-Tyr-Met-His 因为此肽是一个碱性肽，所以其pI应该大于7。
3
16、(1)1mmol五肽酸水解生成 2mmol Glu，1mmol Lys，没有能够定量回收其他氨基酸。在酸水解时，色氨酸容易破坏而不能定量回收，所以该五肽的氨基酸组成为： 2Glx，2Trp，1Lys。
(2)用胰蛋白酶水解五肽得两个肽段，说明Lys不是末端氨基酸，即…Lys…。
(3)用胰凝乳蛋白酶水解五肽生成两个肽段及游离的Glu，因胰凝乳蛋白酶可水解Trp的羧基形成的肽键，所以可推知该肽的氨基酸序列为：X-Trp-Y-Trp-Glu(X、Y为未知氨基酸) (4)由(2)和(3)可知该肽的序列为X-Trp-Lys-Trp-Glu
(5)根据该肽氨基酸组成及FDNB处理胰蛋白酶水解的一个片段继以酸水解后生成DNP-Glu，可知该五肽为Glx-Trp-Lys-Trp-Glu
(6)用胰蛋白酶水解五肽得两个肽段，即为Glx-Trp-Lys和Trp-Glu。在pH 7.0时电泳，Trp-Glu带负电荷，向阳极移动，根据题意，Glx-Trp-Lys向阳极移动，在pH 7.0 时此肽向阴极移动说明Glx是Gln而不是Glu。
因此该肽的氨基酸序列为Gln-Trp-Lys-Trp-Glu
产物，在不同的层析和电泳系统中均只有一个单一的斑点，但是迁移率与未经处理的六肽不同。用胰凝乳蛋白酶水解原来的六肽，生成的产物中有一游离氨基酸并具有紫外吸收，试从上述实验结果排出该六肽的氨基酸序列。[1
]
18、某一多肽抗菌素：(1)彻底酸水解并随后进行氨基酸分析知含有等摩尔的Leu、Orn、 PH e、Pro和Val；(2)此肽的相对分子质量大约为1200；(3)当用羧肽酶处理该肽时，该肽不被水解；(4)该肽用2,4-二硝基氟苯处理，随后完全水解并进行层析仅仅得到游离氨基酸和DNP-δ-Orn
(5)该肽部分水解，随后层析分离并进行序列分析得下列二肽和三肽：Leu- PH e, pH e-Pro, pH e-Pro-Val，Val-Orn-Leu，Orn-Leu, Val-Orn, Pro-Val-Orn。根据以上实验结果推出该肽的氨基酸序列，并说明其理由。[2]
19、根据以下实验结果推断一多肽链的氨基酸序列。
(1)酸水解和氨基酸组成为Ala2，Arg，Lys2，Met， PH e，Ser2。 (2)羧肽酶A水解得一氨基酸为Ala。
(3)胰蛋白酶水解得四个肽段，其氨基酸组成如下：
①A1a，Arg ②Lys， PH e，Ser ③Lys ④Ala，Met，Ser。 (4)溴化氰水解得两个肽段，其氨基酸组成如下： 1
17、(1)胰蛋白酶处理六肽生成的产物在不同的层析和电泳系统中均只有一个单一的斑点，但其迁移率与未经处理的六肽不同，说明胰蛋白酶把该六肽水解成两个顺序完全相同的三肽，且C端为Arg或Lys。从而可推断六肽为：X-Y-Arg-X-Y-Arg 或 X-Y-Lys-X-Y-Lys(X、Y为未知氨基酸)
(2)酸水解六肽能定量地回收到Gly和另一种氨基酸，根据(1)，另一种氨基酸是Arg或Lys。
(3)用胰凝乳蛋白酶水解六肽，产物中有一个是有紫外吸收的游离氨基酸。这氨基酸可能是Trp，Tyr或Phe。根据氨基酸回收情况，推断它只可能是Trp。胰凝乳蛋白酶能水解Trp的羧基形成的肽键，水解时能获得游离的Trp，说明该肽的N端为Trp。根据(1)和(2)可知该六肽的序列为Trp-Gly-Arg-Trp-Gly-Arg或Trp-Gly-Arg-Trp-Gly-Lys。
2
18、从(1)可知该肽为(Leu，Orn，Phe，Pro，Val)n
从(2)可知该肽为十肽(Leu、Orn，Phe，Pro，Val)2 从(3)和(4)可知该肽为一个环肽。
根据部分水解后所得的肽片段，用片段重叠法可知其氨基酸排列顺序 Pro-Val-Orn Val-Orn
Orn-Leu Leu-Phe Phe-Pro Phe-Pro-Val
Val-Orn-Leu 所以此肽的结构式为
[Pro-Val-Orn-Leu-Phe Phe-Leu-Orn-Val-Pro]
①Ala, Arg, Lys2, Met, pH e, Ser ②Ala, Ser.
(5)嗜热菌蛋白酶水解得两个肽段，其氨基酸组成如下： ①Ala，Arg，Ser ②Ala，Lys2，Met， PH e，Ser。[1] 20、根据以下实验结果排出该肽的氨基酸序列。
(1)氨乙基化后用胰蛋白酶水解得以下肽段，其氨基酸组成分别如下： ①Ala，Arg，Gly，Met， PH e ②2(A E Cys)(A E代表氨乙基) ③A1a，AE Cys， PH e ④Asp，Lys，Tyr。 (2)溴化氰裂解得一肽段，其氨基酸组成如下： Ala2，Asp，Arg，Cys3，Gly，Lys，Met， PH e2，Tyr
(3)胰凝乳蛋白酶水解得三个肽段，其氨基酸组成分别如下：①Ala，Gly，Lys，Met， PH e；②Asp，Cys，Tyr； ③Ala，Arg，Cys2， PH e。
(4)溴化氰加胰蛋白酶处理后得三个肽段，其氨基酸组成分别如下：①Gly，Met ②Ala，Asp，Cys3，Lys， PH e，Tyr； ③Ala，Arg， PH e[2] 21、一个多肽还原后生成两条肽链，序列如下： 链1：Ala-Cys- PH e-Pro-Lys-Arg-Trp-Cys-Arg-Arg-Val-Cys 链2：Cys-Tyr-Cys- PH e-Cys
用嗜热菌蛋白酶水解二硫键完整的天然肽，得到下列肽段：(1)Ala，Cys2，Val；(2)Arg, Lys, pH e, Pro；(3)Arg2，Cys2，Trp，Tyr；(4)Cys2, pH e。试定出此天然肽中二硫键的位置。[3] 1
19、从(1)可知该肽为九肽。
从(2)可知其C端为Ala。
从(2)(3)和胰蛋白酶的专一性可知如下肽段：
(A)Ala-Arg (B)(Phe，Ser)-Lys (C)Lys (D)(Met，Ser)-Ala 从(4)和(2)可知：(E)…Met-Ser-Ala
从(5)和嗜热菌蛋白酶的专—性可知：(F)…Phe-(Ala，Lys2，Met，Ser) 从(E)和(F)可知：(G)…Phe-Lys-Lys-Met-Ser-Ala
从(A)(B)(G)可知该肽的氨基酸序列为Ala-Arg-Ser-Phe-Lys-Lys-Met-Ser-Ala
2
20、氨乙基化是化学修饰，Cys经氨乙基化后，胰蛋白酶就能水解它的羧基形成的肽键，反应如下：
根据题中所给条件知该肽为环肽，其氨基酸序列如图3-7所示(推导过程略）。
3
21、嗜热菌蛋白酶水解Leu，Ile，Val，Met，Trp，Tyr或Phe的氨基形成的肽键。
(1)根据嗜热菌蛋白酶水解天然肽得到的肽段(1)与链1的重叠情况，可知链1的第2位氨基酸与链1的第12