发布时间 : 星期四 文章食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总更新完毕开始阅读
3.结果报告
表 大肠菌群最可能数MPN检索表 阳性管数 0.10 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 0.01 0.001 0 0 1 1 2 3 0 0 0 1 1 2 2 3 0 0 0 1 1 1 0 1 0 1 0 0 0 1 2 0 1 0 1 0 0 1 2 0 1 2 MPN <0.3 3.0 3.0 6.1 6.2 9.4 3.6 7.2 11 7.4 11 11 15 16 9.2 15 20 15 20 27 95%可信限 下限 - 0.15 0.15 1.2 1.2 3.6 0.17 1.3 3.6 1.3 3.6 3.6 4.5 4.5 1.4 3.6 4.5 3.7 4.5 8.7 上限 9.5 9.6 11 18 18 38 18 18 38 20 38 42 42 42 38 42 42 42 42 94 0.10 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 阳性管数 0.01 0.001 2 2 2 3 3 0 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 3 0 1 2 0 1 0 1 2 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 MPN 21 28 35 29 36 23 38 64 43 75 120 160 93 150 210 290 240 460 1100 >1100 95%可信限 下限 4.5 8.7 8.7 8.7 8.7 4.6 8.7 17 9 17 37 40 18 37 40 90 42 90 180 420 上限 42 94 94 94 94 94 110 180 180 200 420 420 420 420 430 1000 1000 2000 4100 - 注1：本表采用3个稀释度0.1g（ml）、0.01g（ml）、0.001g（ml），每个稀释度接种3管。 注2：表内所列检样量如改用1g（ml）、0.1g（ml）、0.01g（ml）时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.01g（ml）、0.001g（ml）、0.0001g（ml）时，则表内数字应相应增高10倍，其余类推。 根据阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中含菌量的最近似数值。 MPN检索表只给了三个稀释度，如改用其他稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。 ●平板计数法
检样25g（ml）+225ml稀释液，均质 10倍梯度稀释 需同时用生理盐水做空白对照
选择2-3个适宜连续稀释度的样品匀液，接种VRBA平板 36±1℃ 18-24h 计数典型和可疑菌落 BGLB 肉汤 36±1℃ 24-48h
报告结果 1.培养基：结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）
①原理：乳糖作为可发酵碳源；胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌生长；中性红为酸碱指示剂。
②大肠菌群特点：紫红色菌落，周围红色胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。
③培养基倾注方法：每个平皿倾注15-20ml，凝固后再加3-4ml覆盖，防止菌落蔓延生长，影响结果。 2.平板菌落数的选择
①选取菌落数在15-150CFU之间的平板计数。
②分别计数平板上出现的典型和可疑菌落（如菌落直径较典型菌落小）。
③最低稀释度平板低于15CFU的记录具体菌落数。 3.验证试验
①从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，少于10个
菌落的挑取全部典型和可疑菌落。
②移种于BGLB肉汤管，36±1℃培养24-48h，观察产气 ③凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。 4.平板计数的报告
BGLB阳性管数比例乘以计数的平板菌落数，乘以稀释倍数，即为每g（ml）样品中大肠菌群数。 例如： 样品稀释度 10-4 10-1
注意事项：
①样品PH调节方法：添加NaOH调节
②在36±1℃培养24-48h的意义：24h为预判，若预判未产气继续培养到48h最终确定结果。
③若典型菌落和可疑菌落超过10个，应挑取10个典型和可疑菌落接种验证；若少于10个菌落的则挑取全部典型和可疑菌落接种进行验证。
④大肠菌群类细菌可发酵乳糖产气，因此主要看小导管产气情况来确定大肠菌群。若BGLB肉汤变成黄绿色，则产酸导致。
典型和选取验证可疑菌菌落 落数 100 0 10 0 6 0 100*(6/10)*104=6.0*105 <10 BGLB阳性管 结果CFU/g(ml) ④在乳糖发酵试验中，经常可以看到在小导管内有极微小的气泡，有时可以看到沿管壁有缓缓上浮的小气泡。如果对产气不明显的乳糖发酵现象有疑问，可以轻轻拍打试管，如有气泡沿管壁上浮，即可能有气体产生。