发布时间 : 星期四 文章生物分离工程复习资料更新完毕开始阅读
产生乳化的主要原因是发酵液中存在的蛋白质相固体颗粒等物质，这些物质具有表面活性剂的作用，使有机溶剂(油)和水的表面张力降低，油或水易于以微小液滴的形式分散于水相或油相中。
产生乳化后使有机相和水相分层困难，出现两种夹带：①发酵废液(萃余液)中夹带有机溶剂(萃取液)微滴，使目标产物受到损失；②有机溶剂(萃取相)中夹带发酵液(萃余液)，给后处理操作带来闲难。
五、讨论题
1. 请说明在进行SDS PAGE电泳之前，样品的处理方法，并解释其原因；并结合SDS PAGE电泳的分离原理说明未知蛋白质分子量的测定方法。
答：SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，能断裂分子内和分
子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级、三级结构；而强还 原剂，如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。 因此，在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，蛋白质分子被解聚为组成 它们的多肽链，解聚后的氨基酸侧链与SDS结合后，形成带负电的蛋白 质-SDS胶束，所带电荷远远超过了蛋白质原有的电荷量，消除了不同分 子间的电荷差异；同时，蛋白质-SDS聚合体的形状也基本相同，这就消 除了在电泳过程中分子形状对迁移率的影响。
基于SDS-PAGE的原理，我们可以利用SDS-PAGE电泳进行未知蛋白质的 分子量测定；以不同分子量的标准蛋白进行SDS-PAGE电泳得到不同标 准蛋白的电泳迁移率，制作标准校正曲线，然后对未知蛋白在相同
条件下进行SDS-PAGE电泳，测定迁移率，从标准曲线得到相应的分子量；
《生物分离工程》题库
一、填充题
1. 生物产品的分离包括R ，I ，P 和P ； 2. 发酵液常用的固液分离方法有 和 等；
3. 过滤前物料的预处理的方式有 、 和 等； 4. 影响絮凝效果的因素有 、 、 、 和 。 5. 过滤设备按推动力的不同可分为 、 、 和 。 6. 离心设备从形式上可分为 ， ， 等型式； 7. 常用的过滤介质有 、 和 等； 8. 常用的工业絮凝剂有 和 两大类；
9. 典型的工业过滤设备有 、 和 ； 10.常用离心设备可分为 和 两大类；
11.离心沉降设备从型式上可分为 、 、 等型式；
13.膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 ， ，
和 ；
14.多糖基离子交换剂包括 和 两大类；
15.工业上常用的超滤装置有 ， ， 和 ； 16.影响吸附的主要因素有 ， ， ， ， 和 ； 17.离子交换树脂由 ， 和 组成。 18.电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 ； 甲叉双丙烯酰胺的作用是 ； TEMED的作用是 ；
19.影响盐析的因素有 ， ， 和 ；
20.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 ， 和 ； 21.简单地说，离子交换过程实际上只有 ， 和 三步；
22.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式
为 ；
23.反相高效液相色谱的固定相是 的，而流动相是 的；常用的固定相有 和 ；常用的流动相有 和 ；
24.超临界流体的特点是与气体有相似的 ，与液体有相似的 ； 25.离子交换树脂的合成方法有 和 两大类；
26.常用的化学细胞破碎方法有 ， ， ， ， 和 ； 27.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 的不同； 28.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 和 ； 29.晶体质量主要指 ， 和 三个方面； 30.亲和吸附原理包括 ， 和 三步；
31.根据分离机理的不同，色谱法可分为 ， ， 和 ； 32.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度的Cohn方程为 ；
当 称为Ks盐析法； 当 称为β盐析法；
33.蛋白质分离常用的色谱法有 ， ， 和 ； 34.SDS PAGE电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待分离蛋白的
和 差异，而将 作为分离的依据； 35.常用的蛋白质沉析方法有 ， 和 ；
36.根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的 相等；
37.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为 、 、 和 吸附；
38.影响亲和吸附力的因素有 、 、 、 和 ；
39.阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 、 和 ；其典型的活性基团分别有 、 、 ；
40.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 、 和 ；其典型的活性基团分别有 、 、 ；
41.DEAE Sepharose是 离子交换树脂，其活性基团是 ； 42.CM Sepharose是 离子交换树脂，其活性基团是 ；
43.影响离子交换选择性的因素有 、 、 、 、 、和 ； 44.离子交换操作一般分为 和 两种；
45.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于 和 ；
46.盐析用盐的选择需考虑 、 、 、 等几个方面的因素； 47.影响有机溶剂沉淀的因素有 、 、 、 和 ； 48.常用的超滤装置有 、 、 和 ；
49.依据电泳原理，现有电泳分离系统可分为 、 和 ； 50.依据建立pH梯度的原理不同，等电聚焦（IEF）可分为 和 ； 51.双相电泳中，第一相是 ；第二相是 ； 52.结晶包括三个过程 、 和 ；
53.过饱和溶液的形成方法有 、 、 、 和 ；
54.晶核自动形成时，体系总的吉布斯自由能的改变ΔG由 和 组成； 55.物料中所含水分可分为 、 和 三种； 56.根据干燥曲线，物料干燥可分为 和 两个阶段；
57.描述溶解度与温度、分散度之间定量关系的凯尔文公式的形式为 。 58.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为 、 和 三种类型；
59.工业生物技术可分为三个过程 ， 和 ；
二. 讨论题
1. 请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理； 2. 简述离心过程的分离原理； 3. 简述沉降过程的基本原理； 4. 简述离心与沉降的异同；
5. 绘制结晶过程中饱和曲线和过饱和曲线图，并简述其意义； 6. 何谓亲和吸附，有何特点？ 7. 简述结晶过程中晶体形成的条件；
8. 试比较常规聚丙稀酰胺凝胶电泳与SDS PAGE； 9. 简述生物分离过程的特点； 10. 试比较凝聚和絮凝两过程的异同； 11. 简述超临界流体萃取的原理及其特点； 12. 何谓反微团，反微团萃取的有点有哪些？ 13. 何谓色谱的理论塔板数，如何计算？ 14. 简述疏水层析的原理，并说明基本操作步骤； 15. 简述等电点层析的基本原理； 16. 简述有机溶剂沉析的原理； 17. 简述盐析原理；
18. 结合SDS PAGE电泳的分离原理说明未知蛋白质分子量的测定方法； 19. 请说明在进行SDS PAGE电泳之前，样品的处理方法，并解释其原因； 20. 简述等电聚焦的分离原理； 21. 简述双相电泳的分离原理；
22. 简述载体两性电介质梯度等电聚焦（IEF）的分离原理； 23. 何谓反渗透膜分离，其特点是什么？