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养心菜及其制剂的化学成分研究
摘 要
论文综述:
一、养心菜的药学研究进展
本文从临床及民间使用，药理学研究，生药学研究，化学成分，制剂及质量标准研究等方面对养心菜的药学研究进行综述，为养心菜进一步研究的开展提供参考。
二、养心菜中槲皮素成分的HPLC-MS/MS分析
用HPLC-MS/MS法定性确定养心菜中含有黄酮类化合物槲皮素。用柱色谱洗脱养心菜提取物，并用HPLC-MS/MS法测定槲皮素标准品和洗脱物，洗脱物中主要含有槲皮素，其保留时间是3.06，[M+H]峰为m/z303.4，质谱特征与标准品具有高相似度，验证了样品中含有槲皮素。
三、养心菜的质量标准研究
描述了养心菜的药材性状特征，并对其根，根茎，茎，叶的组织构造，解离组织，粉末进行显微鉴别。
采用薄层定性鉴别药材粉末中槲皮素并用HPLC测定养心菜中槲皮素的含量。选用SHIM-PACK VP C18(250mm*4。6mm，10um)色谱柱，流动相为甲醇-0。4%磷酸(55:45)，流速为1。0ml/min，检测波长为370nm。结果:槲皮素在1。216~12。16ug范围内呈良好的线性关系，平均回收率为102。08%，RSD为2。71%。本法简便，快速，灵敏，准确，重现性好。制订养心菜药材的质量标准，从而有效的控制养心菜药材的质量。
四、养心菜挥发油化学成分气相—质谱联用技术分析
分析研究养心菜挥发油的主要化学成分。用气质联用技术和标准质谱数据库检索技术分离鉴定各化学成分，用离子流色谱峰面积归一法计算各化学成分的相对含量。结果分离了44个化学成分峰，并鉴定出其中的17种化学成分和计算各组分的相对含量，其主要成分为2-十一酮，醋酸冰片酯，环氧石竹烯，十六酸等。
五、养心菜胶囊的制备工艺及其研究 以槲皮素为对照品，用分光光度法测定养心菜中总黄酮含量，检测波长430nm。样品经NaOH碱水浸泡提取，65%乙醇沉淀，定容，显色后测定。槲皮素标准曲线线性范围1~12ug/ml相关系数r为0.9991。并用正交设计，研究养心菜的最佳工艺条件
六、养心菜胶囊的质量标准和初步稳定性研究
制定养心菜胶囊的薄层鉴别，专属性强，重现性好;制定了药品有效成分槲皮素为指标成分的含量测定方法，同时制订了养心菜中槲皮素成分的含量限定。质量标准能有效地控制药品的质量。
为考察样品的稳定性，初步推测本品的有效期，并且考察包装材料对药品质量及稳定性的影响，将瓶装药品在室温六个月和温度37^40℃，相对湿度75%条件下加速试验三个月，结果显示在正常室温稳定性和加速稳定性规定的考察期内样品各项质量检查指标均符合规定;表明样品稳定性良好，包装材料对样品亦无不良影响;推测本品的有效期为两年。 关键词
养心菜;费菜;质量标准;挥发油;气质联用;槲皮素;高效液相色谱-质谱法;高效液相色谱法;含量测定;分光光度法;黄酮类;正交实验;药学研究;进展
The search of chemical component from Sedum aizoon L. and Yang Xin Cao capsule Major:chinese medicine
Postguaduate:zhang na Tutor:Prof.guo su hua ABSTRACT
Part one: Research on quality standard of Sedum aizoon.L.
The histological characters of the root， rhizome， stem and leaf of the plant were reported. The characters of the isolated tissue and powder were also involved.
the content of Quercetin were identified by TLC.A HPLC method was established for the determination of quercetin in the Sedum aizoon..L.The SHIM-PACK VP C18(250nm*4.6nm，10um)column was used.The mobile phase was consisted of methanol-0.4% Phosphoric acid solutions(55:45).The detection wavelength was 370nm.The calibration curve of quercetin was in good linearity over the range of 1.216-12.16ug ， and regression equation was Y=40386X-14138(r=0.9991). The average recovery rate was 102.08%，with RSD=2.71%.The results showed that the method is quick ， sensitive，reproduciblel. The quality control is feasible and can be applied to control Sedum aizoon.L.
Part two :Studies on Preparation technology of Yang Xin Cao capsule
The contents of total flavonoids in Sedum aizoon..L.were determined by ultraviolet spectrophotometry， and compared with Quercetin as control. The wavelengh was set at 430nm.Samples were extracted with water ，with 65%ethylalcohol， then dissolved and determined after color development .The result showed that the linear range of standard curve was 1-12ug/ml，r=0.9998.The recovery rate was 98.58%.By performing the orthogonal test，we studied the optimum technology condition.
Part three:The Analysis of Volatile Oil from Sedum aizoon.L.by GC-MS
Our study was to analyze the chemical constituents of volatile Oil from Sedum aizoon.L. The volatile Oil was extracted from the Sedum aizoon.L.by using the steam distillation .The components were identified by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS)and elucidated on the standard mass spectral data.The percentage of relative contents was demonstrated by Area Normalization Method，The resuils showed that forty-four components were separate，seventeen of which were identified and the percentage of relative components were demonstrated. The main components are undecan-2-one，Bornyl acetate， Caryophyllene oxide ，hexadeccanoic acid and etc. Part four:Analysis of quereetin in Sedum aizoon..L.byusing HPLC-MS/MS determination of quercetin in the Sedum aizoon..L.
This paper described the determination of quercetin in Sedum aizoon..L.by using HPLC-MS/MS technique Comparing with standard sample，quercetin exists in the plant was confirmed.And the fragmentation mechanism was elicited by MS/MS method(daughter ion scan).
Part five: Research on quality standard and preliminary pharmaceutical stability of Yang Xin Cao capsule
were identified by TLC， the content of Quercetin which is the effective element in the preparation and the medicinal material was determined as the index by HPLC. The quality control is feasible and can be applied to control the products from mass production.It can be ensured the stability of the product\\'s quality
In order to examine the stability of medicine， and then infer the expiration data and test the effect of packing materials to the quality of the medicine。 Put the sample into the plastic bottle in the indoor temperature for 6 months， then do the accelerating experiment under the condition that the temperatureis 37-400C，and the relatively humidityis 75% for 3 months。All the results shows that the stability in the indoor temperature and the accelerating condition are according with the index of quality control in the limited data， the packing materials has no reverse effect to the medicine， so it is can be inferred that the expiration data is two years
Part six:Document review:Progress in Pharmic Studies of Sedum aizoon.L.
In this paper ，we also sunarized the progress of the research of Sedum aizoon..L.in clinic and civilian ueing ，pharmacology ，pharmacognosy，chemical consitituents，preparation and quality standard et al.It is a reference to futher study on Sedum aizoon.L.
KEY WORDS: yangxincao；Sedum aizoon L.;quality standard；Volatile
oil;GC-MS;quercetin；HPLC-MS/MS；HPLC；determination；total flavonoids；spectrophotometry；orthogonal experiment；Pharmic Research;progress. 前言
养心菜，又名土三七，费菜，为景天科多年生草本植物，即是花卉又是药用植物，为我省药物志所收载。在福建省连城县民间有长期用药习惯，并已大量人工栽培，其味甘淡微酸，具清热凉血，平肝宁心的功效，尤其对心脏病有特效，被群众称为\\\救心草\\\。
养心菜在福建省连城县有零星的分布，但不多见，民间沿习用于防治心脏病屡见效验，因此有人又称\\\心脏病草\\\，\\\救心草\\\。连城县科学技术局的同志在连城县朋口兰花开发有限公司的协助下，在生态条件十分优越的朋口环保农民城建圃，对养心菜进行规模技术开发，目前已建有苗圃基地30亩，且全县约有300余户人利用庭院进行了小面积的种植，现在他们拟进行更大规模的人工栽培，因此此草药具有良好的民间用药基础及极具潜力的药用资源，值得大力开发研究，既是为治疗心血管疾病寻找一个良好的药物，又将为地方经济创造新的增长点，具有可观的社会与经济效益。
据文献报道，该草药单用对心脏病，中风，咯血，衄血均有良好疗效，并可用于复方治疗多种相关疾病。目前对该植物的组织培养，野生转家种的栽培多有报道，对其化学成份的研究，国内外也有部分报道。但是对其进行系统的品质研究，临床上以明确指标确定其药用价值，对其剂型及工艺的研究，毒理学，药效学研究，有效部位的研究，尚无相关报道。
本课题针对养心菜具有良好的民间用药基础及极具潜力的药用资源的现状，对其进行系统的药用价值研究及三类新药的基础研究。首先从降血脂方面对其治疗心脏病的功能进行临床指标确证。并对其剂型工艺进行研究，在毒理学，药效学研究的基础上，寻找其有效药用部位或成分。为申报新药打下基础。将为连城县的地方经济创造新的增长点，为开发山区资源，脱贫致富开发新路，具有良好的社会，经
济效益。
血脂异常(dyslipidemia)是血液脂质代谢异常的简称，指血中胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)超过正常范围及(或)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低下，通常又称为高脂血症(hyperlipidemia)。血脂异常在动脉粥样硬化(AS)的发生发展及其引起的心血管事件中起非常重要的作用，被认为是AS和冠心病(CHD)发病的重要脂类危险因素[1，2]。随着我国老龄化社会的到来，人民生活水平的提高，膳食结构的改变及体力劳动的减少，人群血脂水平已呈上升趋势，其引发的AS，CHD和脑血管意外等疾病的发病率和死亡率已进入上升阶段。从80年代初至90年代末的心血管主要危险因素变化趋势研究表明，我国各类中年人群高TC现患率在男女均显示有不断上升趋势，且上升幅度明显;9组可比性资料显示，男性平均上升了88%，女性平均上升了65%[3]。而心脑血管疾病死亡占总死因构成已从1957年的12。07%上升至1997年的40%[4]。国际上著名的多危险因素干预实验(MRFIT)的研究结果表明[5]，血清TC若>6。48mmol/L，其5年冠心病死亡率比TC<6。48mmol/L者高2倍以上，因此积极调节脂质代谢紊乱，防治高脂血症对于维护人类健康与长寿具有深远的意义。
自20世纪60年代起，多个国家进行了一系列旨在降低胆固醇以期降低冠心病发生率和死亡率的临床干预实验[6]，研究显示有效的降脂治疗可稳定粥样斑块，减少斑块破裂，防止血栓形成，改善内皮功能，降低冠心病及其他心脑血管疾病发病率和死亡率。降脂治疗除改善饮食习惯和生活方式以外，调脂西药主要包括:①3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂;②烟酸及其衍生物;③贝特类;④胆酸螯合剂;⑤多不饱和脂肪酸类等等[7，8]。治疗高脂血症的西药降脂快速，显效，但多数药物存在不同程度的胃肠道反应或肝肾功能损害或肌病，横纹肌溶解症等其他的毒副作用，有部分药物尚未得到长期使用安全性的评价，仍有待大规模的临床验证[8，9]。截至目前，尚无完全满意的能够纠正脂质代谢异常的药物。
祖国医学中多数学者认为高脂血症是一个以\\\肝，脾，肾三脏之虚为本，痰浊，瘀血为标\\\的病证，在中医药治疗上以痰瘀学说为理论依据，按本虚标实两大证施治，当以滋养肝肾，调理脾胃治本，祛痰化浊，活血化瘀治标的综合治疗为大法[10~12]。中药成分复杂，其降脂能调节脏腑功能，增强机体代谢以澄源治本，又疗效较稳定持久，且药源丰富，在预防或减轻疾病上是多途径多环节的，因此在中医药学这个宝库中寻找疗效高，稳定持久，毒副作用甚小的中草药显得具有十分重要的意义。近十几年来，中医药学对降脂药物研究十分广泛。目前国家法定标准明确提出降脂作用，且作用较单一的的单味中药及有效成分如山楂、月见草油、女贞叶乙醇提取物等和复方制剂如血脂康，脂必妥等具有良好的调节脂质紊乱[13，14]。发现养心菜在福建民间用于治疗心血管疾病有良好效果。现代药理研究表明养心菜对肝脏脂肪的升高，对肝脏病理有保护作用，其含有阿魏酸类似结构的羟基桂皮酸，有降血脂增强代谢呈现\\\适应原\\\的作用。本课题组通过前期实验研究已初步证实养心菜胶囊可明显降低高脂血症小鼠的胆固醇及甘油三酯水平，为探讨养心菜胶囊的进一步调节血脂的作用，本实验采用高脂乳剂复制高脂血症大鼠模型，观察养心菜胶囊对大鼠血脂的影响，初步探讨养心菜胶囊调血脂的作用机理，并观察养心菜胶囊急性毒性与长期毒性反应情况，以评价该药的有效性及安全性，为进一步开发成一种安全，有效的调脂新药，提供一定的实验依据，同时对于我省地道药材的开发应用和寻找防治高脂血症的有效新药具有重要的现实意义。