发布时间 : 星期六 文章微量凯氏定氮法测定蛋白质含量实验报告记录更新完毕开始阅读
（2）向另一烧瓶加入1ml水作空白对照；
在每个烧瓶内加入硫酸钾—硫酸铜混合物（克氏催化剂）少许，浓硫酸10ml，小瓷片两粒，摇匀；
（3）将烧瓶约60度角固定在铁架上，每个瓶口放一小漏斗，在通风厨内的电炉上消化；
（4）在消化开始时，应控制火力，不要使液体冲到瓶颈； （5）待瓶内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出SO2白烟后，适当加强火力，继续消化，直至消化液呈透明绿色为止；
（6）消化完毕，待烧瓶内容物冷却后，加蒸馏水10ml（注意慢加，边加边摇）；
（7）冷却后将瓶中内容物转入100ml的容量瓶中，并用蒸馏水洗烧瓶数次，溶液一并倒入容量瓶，最后定容至刻度摇匀，做上记号备用。
2.蒸馏
（1）蒸馏器洗净后，开放水龙头P3，使水进入A室，水放至A室球部2/3处即可。
（2）取3个50ml的锥形瓶，分别加入10ml硼酸（内加有混合指示剂）。用表面皿复盖备用。
（3）加样
① 用移液管吸取2ml消化液，小心地由漏斗D倾入B室； ② 取一个盛有硼酸的锥形瓶，置于M管下，使管口恰好接触
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硼酸溶液，用量筒从漏斗D加入30%氢氧化钠5ml，随即将P4夹紧，并往漏斗加入少量蒸馏水封闭。
（4）蒸馏
① 用酒精灯加热，维持火力恒定，沸腾不可高于Y管口以免A室溶液从Y管倒吸，待第一滴蒸馏液从冷凝柱F顶端滴下时起，继续蒸馏5分钟；
② 然后将锥形瓶放低，使导管离开液面再蒸2分钟，最后用蒸馏水洗导管外壁，蒸馏完毕，取下锥形瓶准备滴定。
（5）空白蒸馏
① 用移液管分别吸取2ml蒸馏水按上述操作步骤进行蒸馏。 仪器的洗涤： 3.滴定
（1）蒸馏完毕，用微量酸式滴定管，以0.01mol/L 盐酸标准溶
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液进行滴定锥瓶内溶液，溶液由蓝绿色变为淡紫色或灰色，即为终点。
（2）记录所用盐酸的量。 4.计算
（A?B）?0.0100?14样品的总氮含量（克氮％）??100C?1000
若测定的样品含氮量部分只是蛋白质则：
（A?B）?0.0100?14?6.25样品的总蛋白含量（克蛋白％）??100C?1000
式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数； B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；
C为称量样品的克数：0.0100为盐酸的当量浓度（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；
14为氮的原子量；6.25为常数（1毫升0.1N盐酸相当于0.14毫克氮）。
五、实验结果
序号 称量样品(g） 滴定样品用去的盐酸（ml） 滴定空白用去的盐酸（ml） 1 2 1 1 15.2 15.4 0.12 7
15.2?15.4滴定样品用去盐酸平均值?2
?15.（3ml）（A?B）?0.0200?14样品的总氮含量（克氮％）??100C?1000
?0.43％若测定的样品含氮量部分只是蛋白质，则：
（A?B）?0.0200?14?6.25样品的总蛋白含量（克蛋白％）??100、C?1000?2.66％
式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数； B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；
C为称量样品的克数：0.0100为盐酸的当量浓度（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；
14为氮的原子量；6.25为常数（1毫升0.1N盐酸相当于0.14毫克氮）。
六、注意事项
1.本法适用于0.05-3.0mg氮，样品中含氮量过高时，则应减少取样量或将样液稀释。
2.勿使样品粘于烧瓶颈部。放置液体样品时，需将吸管插至烧瓶底部再放样：如固体样品，可将样品卷在纸内，平插入烧瓶底部，然后再将烧瓶直起，纸卷内的样品即完全放在烧瓶底部。
3.蒸馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续蒸馏1min，将附着
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