发布时间 : 星期日 文章核酸分子杂交试题（全，打印）更新完毕开始阅读
A. mRNA定量 B. mRNA定性
C. mRNA末端定位 D. 确定内含子在相应基因中 16. 核酸酶S1能降解（ ）。 A. DNA 单链 B. DNA双链
C. RNA单链 D. DNA/RNA杂交双链
17. 根据检测方法的不同，非核素标记物可分为以下几类（ ）。 A. 半抗原 B. 配体 C. 荧光素 D. 化学发光探针 18. 下列物质属于半抗原的是（ ）。
A. 亲和素 B. 罗丹明 C. 生物素 D. 地高幸
19. 核酸分子杂交所用探针采用体外标记法的优点是（ ）。 A.安全系数高
B.需要活体生物或细胞培养系统 C.探针，核酸分离和纯化及储存很方便 D.体外标记一般比体内标记的比放射活性高 20. 化学法体外标记核酸探针最常用的是（ ）。 A. 125I B. 光敏生物素 C. 3H D. 32P 21. DNA探针的酶促标记法包括（ ）。 A. 缺口平移法 B. 随机引物法 C. PCR标记法 D. 末端标记法 22. 探针的纯化包括（ ）。
A．乙醇沉淀法 B. SephadexG-50 C. 甲醇沉淀法 D. 丝柱离心法 23 DNA变性后的理化性质的变化有（ ）。 A. 粘度降低 B. 密度增加 C. 紫外吸收值增加 D. 熔点减小 24. Southern杂交结果检测包括（ ）。 A．放射自显影 B. 比色或化学发光检测 C. 酶切图谱分析 D. 凝胶电泳分离
25. Southern杂交在医学中的应用包括（ ）。 A. 酶切图谱分析 B. 特定基因定性和定量
C. 基因突变分析 D. 限制性片段长度多态性的分析 四. 填空题:
1. 核酸分子杂交中，杂交的双方分别称为 与 。 2. 核酸分子杂交中已知的核酸序列称为 。
3. 适当的电泳缓冲液中，DNA在电场作用下，由负极向正极泳动，分子越大，泳动速度 。 4. 当促使变性的因素解除后，两条DNA又通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构，称为 。 5. 在DNA的碱基组成中，AT之间是 氢键，GC之间是 氢键。 6. 鉴别DNA靶分子的杂交称为 ，鉴别RNA靶分子的杂交称为 。 7. 根据检测对象的不同，可将原位杂交分为 和 。 8. 常用的液相杂交有 和 。
9．RNA酶保护分析法（RPA）的基本程序包括： 、 、 、 、 10. 液相杂交的核酸酶S1保护分析法可用于 、 、和 。 11. 核酸探针包括： 、 、 和 。
12. 在用核酸标记的探针，大多数标记方法需要的是α-32P，末端标记必须使用 。 13.核酸的体外标记法分为 和 。
14.核酸的体外标记法中的酶法最常用的是 和 标记。 五、简答题
1、DNA变性的常用方法有哪几种？
2、简述DNA的复性过程。
3、一个良好固相支持物应具备哪些特性？
4、试比较硝酸纤维素膜、尼龙膜和化学活化膜的优缺点。
5、核酸原位杂交的理想固定液应具备哪些特点？
6、一种理想标记物应具备哪些特性？
。
7、随机引物法标记DNA探针有哪些优点？
六、论述题
1、试述核酸分子杂交的原理。
2、试述影响核酸分子杂交的因素。
3、试述Southern印迹杂交的基本步骤。
4、试述Southern印迹的常用方法及原理。
5、试述核酸原位杂交的基本过程。
6、试述探针的种类及其制备。
7、试述切口平移法标记DNA探针的原理。
名词解释： SiRNA:
利用双链小片段RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA，从而阻断体内靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。 Blue/white screen:
蓝白斑筛选。即β-半乳糖苷酶基因失活筛选。其原理是：某些质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ’基因，该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α－肽的DNA片断，IPTG可诱导此片断合成，此片断能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α－互补，形成完整的β－半乳糖苷酶。该酶能催化指使剂底物X－gal形成蓝色菌落。当外源基因插入lacZ’基因中MCS(多克隆位点)，lacα－肽基因阅读框架被破坏，细菌内将无β－半乳糖苷酶活性，结果重组克隆呈白色菌落。 Knock down:
（基因）敲除。是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。基因敲除除可以终止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变，既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 G-protein :
G蛋白。是三聚体GTP结合调节蛋白的简称，位于质膜内胞浆的一侧，由α，β，γ三个亚基组成，βγ二聚体通过共价结合锚定于膜上起稳定α亚基的作用，而α亚基本身具有GTP酶活性。G蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用，当G蛋白α亚基与GDP结合，处于关闭态；当胞外配体与受体结合形成复合物时，导致受体胞内结构域与α亚基偶连，并促使α亚基结合的GDP被GTP交换而被活化，即处于开启状态，从而传递信号。
DNA-chip:
DNA芯片。指通过微阵列技术将高密度DNA片断阵列通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面作为探针，荧光标记的样品DNA/RNA借助碱基互补作用与探针进行杂交，从而进行大量的基因表达及检测等方面的研究。