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核酸分子杂交试题
一. 名词解释: 1. 核酸分子杂交
2. DNA复性
3. Southern杂交
4. Northern杂交
5. 斑点印迹
6. 原位杂交
二. 单项选择题:
1. 在加热或紫外线照射下，可导致两条DNA链中间的氢链断裂，而核酸分子中所有的共价键则不受影响的称为（ ）。
A. DNA变性 B. DNA复性 C. DNA重组 D. DNA杂交 2.DNA变性的本质是（ ）的断裂。
A. 盐键 B. 氢键 C. 离子键 D. 共价键 3. 一般影响核酸变性的温度可选在（ ）。
A. 60—70℃ B. 70—80℃ C. 80—90℃ D. 90—100℃
4. 在核酸分子杂交时，一般对应温度作图得到的DNA复性曲线所用的紫外吸收值是（ ）。 A. A260吸收值 B. A280吸收值 C. A320吸收值 D. A360吸收值
5. 进行核酸分子杂交时，一般适宜的探针浓度是（ B ）。 A. 0.1μg B.0.1—0.5μg C.0.5--1μg D.1.0—1.5μg
6.杂交时如果使用单链核酸探针，随着溶液中探针浓度的增加，杂交效率也会增加，所以探针长度控制在（ ）。
A. 50—300bp B. 20—200bp C.300—400bp D.200—500
7.进行核酸杂交时，一般适宜的复性温度较Tm值低（ ）。 A.10℃ B.15℃ C.20℃ D.25℃ 8.寡核酸探针杂交反应一般在低于Tm值（ ）下进行。 A.5℃ B.10℃ C.15℃ D. 25℃ 9. 下列哪种试剂能降低核酸杂交的Tm值（ B ）。 A．尿素 B. 甲酰胺 C.甲醛 D. 乙醇
10. 在凝胶中核酸变性时，为了使DNA片段在合理的时间内从凝胶中移动出来，必须将最长的DNA片段控制在大约（ ）。
A. 1Kb B. 2 Kb C. 3 Kb D. 4 Kb
11. 将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜上，用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究，称为（ ）。
A. 原位杂交 B. 核酸酶保护实验 C. 斑点印迹 D. 狭缝印迹
12. 核酸保持在细胞或组织切片中经适当方法处理细胞或组织后，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为（ ）。
A. 原位杂交 B. 核酸酶保护实验 C. 斑点印迹 D. 狭缝印迹
13. 在将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭，称为（ B ）。
A. 杂交 B. 预杂交
C. 杂交前处理 D. Nouthern印迹杂交
14. 进行间期细胞内染色体DNA的原位杂交时，关键是（ ）。 A. 细胞的培养 B. 加固定液 C. 载波片上的固定 D. 细胞染色体的制备 15. 组织细胞杂交前的预处理的关键是（ C ）。 A. 降解细胞外蛋白 B. 降解细胞内蛋白 C. 降解核酸表面蛋白 D. 降解核酸内DNA
16. 组织细胞杂交前预处理时，降解核酸表面的蛋白质常用的蛋白酶是（ ）。 A. 蛋白酶C B. 蛋白酶K C. 蛋白酶A D. 蛋白酶I
17. 在进行原位杂交时，RNA探针杂交的时间最好是（ ）。 A. 2—4h B. 4—6h C. 6—8h D. 过夜
18. 在核酸杂交中，目前应用最为广泛的一种探针是 （ A ）。
A. 基因组DNA探针 B. 寡核苷酸探针 C. cDNA探针 D. RNA探针
19. 在Southern印迹杂交中用来标记核酸探针最常用的核素是（ ）。 A. 32P B. 3H C. 35S D. 125I
20．在下列非核素标记物中，既属于半抗原，同时也属于配体的是（ ）。 A. 地高辛 B. 生物素 C. 亲合素 D. 罗丹明
21.一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以象核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。这些标记物称为（ ）。
A.半抗原 B.配体 C.荧光素 D.化学发光探针 22. Sephadex G—50 柱析法中，随着流动相流出的是（ ）。A.小分子物质 B. dATP C.大分子探针 D. dGTP
23. 下列DNA分子的组成中，哪种是核酸变性的最主要的因素（A. AT B. AG C. GC D. TC 24. 在探针的纯化时，无水乙醇可以沉淀（ ）。 A．DNA片段 B. 蛋白质分子 C．RNA片段 D. 小分子物质
25. 待测DNA样品的电泳分离中，作为分子量标准的λDNA是用（A. HindⅢ B. BglI C. ApaI D. BamHI 三. 多项选择题:
1. 导致DNA变性的常用方法有（ ）。
A. 热变性 B. 碱变性 C. 酸变性 D. 化学试剂变性 2. 影响核酸杂交的因素有（ ）。 A. 核酸分子的浓度和长度 B. 温度
C. 离子浓度 D. 核酸分子的复杂性
3. 核酸分子处于何种情况下，核酸的双链可以完全打开成为单链（A. PH＜3 B. 3＜PH＜5 C. 5＜PH＜10 D. PH＞10 4. 在杂交液中加入甲酰胺，其目的是（ ）。 A. 在低温下探针更稳定 B. 使杂交液为中性
C. 能更好的保留非共价结合的核酸
C ）。 ）酶消化的。 ）。
D. 减少核酸杂交的副反应
5. 为减少非特异性杂交反应，在杂交前将非特异性杂交位点进行封闭，常用的封闭物有（ ）。 B. 复性的非特异性RNA C. 变性的非特异性DNA D. 高分子化合物 E. 低分子化合物
6. 下列哪些步骤属于Southern印迹杂交（ ）。 A. 待测核酸样品的制备 B. 待测DNA样品的电泳分离 C. 凝胶中核酸的变性 D. Southern转膜
7. Southern转膜时常用的膜是（ ）。
A. 化学活化膜 B. 尼龙膜 C. 硝酸纤维素膜 D. 滤纸 8. 常用的Southern转膜方法有哪几种（ ）。 A. 硝酸纤维素膜法 B. 毛细管虹吸印迹法 C. 电转印法 D. 真空转移法 9. 用于Southern印迹杂交的探针可以是（ ）。 A. 纯化的DNA片段 B. 纯化的RNA片段 C. 多核苷酸 D. 寡核苷酸片段 10. 原位杂交可以用来检测（ ）。
A. DNA B. RNA C. cDNA D. RNA和DNA 11. 原位杂交所用的探针可以是（ ）。
A. mRNA B. DNA C. RNA D. cDNA 12. Northern印迹杂交中转膜时可采用的方法有（ ）。 A. 毛细管虹吸印迹法 B. 电转印法 C. 真空转移法 D. 凝胶分离法 13. 核酸原位杂交包括（ ）。
A. 组织细胞的固定 B. 预杂交 C. 杂交 D. 冲洗 14. 下列哪些属于核酸原位杂交的常用固定液（ ）。 A. 10%甲醛 B. 4%多聚甲醛 C. 乙醇：冰醋酸（3：1） D. 戊二醛 15. RNA酶保护分析法可用于（ ）。