发布时间 : 星期一 文章微生物学实验讲义 - 图文更新完毕开始阅读
(1) 取培养18～20h的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌斜面各1支，分别加入4 ml无菌水，用接种环将菌苔轻轻刮下、振荡，制成均匀的菌悬液。
(2) 取3个无菌培养皿，每实验菌一皿，在皿底写明菌名及测试药品名称。 (3) 分别用无菌滴管加菌4滴(或0.2m1)菌液于相应的无菌培养皿中。
(4) 将融化并冷却至45～50℃的肉膏蛋白胨培养基倾入皿中约15 ml，迅速与菌液混匀，冷凝，制成含菌平板。
(5) 用镊子取分别浸泡在5%石炭酸、10%青霉素、5%新洁尔灭、40%甲醛和75%乙醇药品溶液中的圆滤纸片各一张，置于同一含菌平板上。
(6) 将平板倒置于37℃温箱中，培养24h后观察结果，测量并记录抑菌圈的直径。根据其直径的大小，可初步确定测试药品的抑菌效能。
（五）实验报告内容
1. 根据实验结果，将不同物理因素对微生物生长的影响记录于表7－1。
表7－1 不同物理因素对微生物生长的影响 不 同 因 素 紫外线 测试微生物 金黄色葡萄球菌 处理方式和结果 距离30cm、功率20W、照射20min *抗高温能力以温度和时间表示；紫外线以紫外灯的功率及照射的时间和菌种与紫外灯的距离表示。
2. 将不同药物对微生物生长的影响记录于表7－2。
表7－2 不同药物对微生物生长的影响 实验药品 10％青霉素 1％新洁尔灭 5％来苏儿水 40％甲醛 75％乙醇
（六）思考题
1.上述多个实验中，为什么选用金黄色葡萄球菌作为实验菌?
大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌 实验六 微生物深层培养生产α-淀粉酶及其酶活测定
微生物发酵亦称微生物工程，是生物工程的重要组成和基础。利用基因工程、蛋白质工程、细胞融合等技术为人们开创了构建新的具有各种生产能力、性能优良的物种的新天地，
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为发酵工程产品增加了许多新的内容，使现代发酵产品的发酵水平有了很大的提高。但是，充分发挥它们的作用，仍然需要依靠发酵技术的进步，为使利用各种技术手段得到的新物种能大量、高效、高质量的生产目的产物，要解决在大规模生产过程中必需解决的所有问题，应该说，这是发酵工程的研究任务。近年来，由于代谢调控技术、连续发酵技术、高密培养技术、固定化增殖细胞技术、反应器设计、发酵与分离偶联技术、在线检测技术、自控和计算机控制技术、产物的分离纯化等所需的技术的发展，以及工艺、设备和工程等研究的进步，使发酵工程达到了一个新的高度，发酵工业的自动化、连续化成为可能。微生物发酵既是开发生物资源的关键技术，也是生物技术产业化的重要环节。
由于微生物代谢类型的多样性，利用不同微生物对同一种物质进行发酵，以及同一种微生物在不同条件下发酵，其产物均不相同。根据微生物对氧的要求和发酵采用的方式不同，可将发酵分为以下2种类型。
(一) 按微生物对氧的要求分类 l．需氧性发酵(好气性发酵)
发酵产物形成时需要供给充分的氧气。如柠檬酸发酵、青霉素发酵、淀粉酶发酵、曲酸发酵等等。
2．厌氧性发酵(嫌气性发酵)
发酵时不需供应氧气。如丙酮-丁醇发酵、甲烷发酵、丙酸发酵、丁酸发酵等。 3．兼性厌气发酵
同一微生物在供氧和缺氧条件下发酵，产物不同。如生产酒精的酵母菌是一种兼性厌气微生物，在缺氧条件下进行酒精发酵，积累酒精，在大量通气情况下则进行好气性发酵，产生大量酵母细胞。
(二) 按发酵方式分类 l．固体发酵
即发酵的原料按比例与一定量的水分混合后进行灭菌，然后接种菌种，铺放在曲盘内或放在草席上或放在地面上成薄层，或放在水泥制的通风池内进行发酵。此法发酵时间长，劳动强度大，占地面积多，而且容易污染，不易进行纯种发酵。但固体发酵具有简单易行，投资少，适宜小型生产等特点，所以至今仍有很大应用价值。例如在农村中制造菌肥，发酵饲料、细菌农药，以及一些传统的食品如饮料、酒、酱油、醋等仍广泛采用固体发酵。
2．液体发酵
为满足微生物对氧的需求，此法最早是将所用原料配制成液体状态，放在瓷盘内，进行静置培养叫浅盘发酵。此法因劳动强度大、占地面积多、产量小、易污染等缺点，很快被液体深层发酵所代替。将原料与水配制成培养液加入到铁或不锈钢制成的密闭的发酵罐内，在罐中进行深层发酵。目前我国和世界大多数国家的发酵工厂均采用液体深层发酵。过去多采用单罐间歇发酵，后来又发展了连续发酵的方式；近年来固定化酶和固定化细胞技术的发展更促进了发酵工业的连续化和自动化。
微生物工程包括从投入原料到获得最终产品的完整过程，一般分为两个阶段，第一个阶
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