发布时间 : 星期二 文章天麻的种植技术更新完毕开始阅读
萌发菌和蜜环菌的生长发育都需从基质中摄取碳源、氮源、无机盐、维生素等营养物质而生活。所用的培养基和段木将满足其营养需要。
1. 萌发菌、蜜环菌一级菌种（母种）培养 （1）分离材料的选择与收集：
①蜜环菌分离材料：菌索：可在林间树桩和枯树根等处采集棕红色的菌索，用靠近白色生长点生活力强的幼嫩部位为分离材料子实体；可在晚秋多雨季节，蜜环菌子实体出土时，采收新鲜、形态完整、健壮、无病虫为害、将要成熟的字实体。天麻块茎：可于4-6月份采集着生蜜环菌较多的天麻块茎。
②萌发菌分离材料：采收天麻种子发芽后的原球茎、兰科植物中的根部、诱导培养萌发菌子实体。用以上材料分离培养菌种，可用于萌发菌和蜜环菌复壮。
（2）分离技术
①PDA培养基制备：去皮马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、自来水1000毫升、PH5～6。将马铃薯切片，加水煮沸30分钟，用纱布过滤，取滤液1000毫升并放入琼脂加热，使之全部深化，最后加入葡萄糖，溶解后调节PH为5～6。然后将培养基趁热分装于试管内，经高压灭菌（1.5千克/平方厘米）30分钟。取出后按25度斜度放置冷却后接种。
②消毒灭菌：接种室灭菌，按每平方米用量计算：40%的甲醛溶液8毫升，高锰酸钾5克进行熏蒸。先关闭窗户，取甲醛溶液装入容器中，再放入高锰酸钾，人随之离开接种室，关闭房门，熏蒸1小时即可。熏蒸后应隔1天使用。
接种时，先将各种器具放入接种室内，开启紫外灯灭菌30分钟后即可工作。超净工作台或接种箱开启紫外灯灭菌30分钟后，再进行操作。
③分离方法
组织分离：将蜜环菌索或天麻块茎，天麻原球茎，兰科植物的根分别用水洗净表面泥土，
然后切取需要的部份组织，用无菌水冲洗3次，放入0.1%升汞溶液浸泡1分钟；再用无菌水冲洗3次，洗去残存的药液，置于无菌培养皿内。将菌索等材料分别剪成1厘米长的小段或小块，在青霉素液（20微克/毫升）中浸片刻，用灭菌滤纸吸去表面附着水液，然后接种于斜面培养基上，置25℃恒温培养，3～7天左右，开始分别长出白色菌丝和菌索。分离子实体时，用无菌水冲洗消毒残存药液后，用灭菌滤纸吸净水珠，再用解剖刀从菌盖中纵向剖开了实体，在菌柄及菌盖交界处取其0.5厘米的一块组织置于PDA培养基上培养。
孢子分离：将开伞的子实体截去菌柄的下半部，用70%的酒精在菌盖表面及菌柄部分进行揩擦消毒，然后菌褶向下插在孢子收集装置的支架上。将支架放于无菌培养皿中，用钟罩或大烧杯罩住以收集孢子。孢子落于皿内后，用接种针挑取少许，接于斜面培养基上培养。
（3）菌种纯化培养：在培养基上最初分离出的菌种，再进行提纯培养以得到优良菌种，称作纯化。萌发菌选用菌落生长速度较为一致的菌丝体，用消毒的接种铲连同培养基一起切取菌丝，转移到新的培养基上培养，重复转接可获纯菌种。蜜环菌在培养基上接种点处刚产生菌索分枝时，选择其中生长旺盛而幼嫩的菌索，用接种铲截取长2～3毫米移入斜面培养基上，在25℃恒温下培养，菌索长满培养基后即为纯化的一级菌种。
2. 萌发菌、蜜环菌二级菌种（原种）培养
（1）萌发菌二级菌种培养：培养基成分：青棡、桦木等阔叶树的木屑70%、麸皮或米糠26%、蔗糖1%、石膏粉1%、磷酸二氢钾1.5%、硫酸镁0.5%，加水适量。将以上成分充分拌匀，用手捏培养基可滴水为度，然后装瓶，在瓶中心打直径1厘米的圆孔，深达培养基2/3处。盖好瓶盖，高压蒸气灭菌（1.5千克/平方厘米）1小时，冷却后接种。在接种室内，将菌丝连同约蚕豆大小的母种，接于培养基的圆孔中，一支母种可接原中5瓶左右，盖好瓶盖后置25℃培养室培养。
（2）蜜环菌二级菌种培养：培养基成分为阔叶树锯木屑3份，麦麸1份及小树枝段，水适量。制作时，先将手指粗的树枝截成长1.5厘米的小段，在水中浸泡12小时充分吸水，然
后与锯木屑、麦麸拌匀、加水湿透，装入500毫升广口瓶中，每瓶装入树枝段50～60段，以瓶容量的4/5为宜，再加水少量，盖瓶盖后高压灭菌（1.5千克/平方厘米）1小时，冷却后，接入母种，置于25℃恒温培养，30天～45天蜜环菌丝和菌索可长满全瓶。
3. 萌发菌、蜜环菌三级菌种（栽培种）培养
（1）萌发菌三级菌种培养：取壳斗科植物落叶70%、木屑10%、麦麸15%、硫酸镁0.5%，磷酸二氢钾1.5%、尿素1%、蔗糖1%、石膏1%，水适量。经拌匀后装瓶，高压蒸气灭菌（1.5千克/平方厘米）1小时，冷却后接入二级菌种，盖好瓶盖，移入培养室培养。
（2）蜜环菌三级种培养：培养料和培养方法与二级菌种培养相同。在高压灭菌冷却后，每瓶接入二级树枝菌种1-2段，在25℃恒温培养30天～45天，蜜环菌丝和菌索可长满全瓶，可用于培养菌枝和菌材。
4. 菌种保藏
（1）一级菌种保藏：利用低温对微生物生命活动有抑制作用的原理，当一级菌种长满试管后，用牛皮纸包扎好，放入0℃-4℃的冰箱中，每隔4-6个月转管培养1次。使用时，应从冰箱中取出先经适应常温后再转管培养，否则转管不易成活。
（2）二级菌体和三级菌种保藏：二、三级菌种可在冷凉、干燥、清洁的室内保藏，室温宜制在0℃-6℃，因蜜环菌在7℃-8℃可缓慢生长，保藏期2-3个月。
5. 蜜环菌枝培养
菌枝皮薄、木质嫩、蜜环菌易浸染，生长快，菌枝是培养菌床和菌材的优质菌种。 （1）菌种准备：应选用人工培养的三级菌种，野生蜜环菌索，蜜环菌优质菌材做菌种。 （2）树种选择：多种阔叶树种的树枝可用于培养菌枝，但以壳斗科树种及桦树等的树枝最好。
（3）培养时间：应根据需要，一般应在菌材培养期之前2个月进行。
（4）培养方法：选择直径1-2厘米的树枝，斜砍成长3～4厘米的小段。其次，挖长2米，宽1米，深30厘米的坑；坑底先铺1厘米厚湿润树叶，然后摆一层树枝，再放入菌种，在菌种上再摆一层树枝，盖一薄层沙土，以覆盖填满树枝间空隙为度。可依次堆放8～10层，盖10厘米厚沙土，再盖一层树叶保温保湿。一般2个月可培养好菌种。
6. 蜜环菌材培养
（1）菌种准备：菌枝是培养菌材最好的菌种。选择菌枝表面附着棕红色、幼嫩、有白色生长点、无杂菌污染的做菌种。也可用培养好的优质菌材作菌种。
（2）树种选择：蜜环菌与壳斗科树种有良好的亲和力，同时，壳斗科树种材质坚硬，耐腐性强，树皮肥厚不易脱落，是首选树种。其次，蔷薇科的野樱桃，桦木科的树种，易染菌且生长快，培养时短，也是培养蜜环菌材的好树种。树种选择要根据当地树木资源选用适宜蜜环菌生长的树种。
（3）培养时间：应选择在秋、冬季至春初培养菌材，在秋末至春初砍伐的树木中含有较多的碳水化合物，树皮与木质部不易分离，有利蜜环菌生长，有些树种于春季又可萌发新枝。
（4）木材准备：选直径3-5厘米的树木，锯成长20厘米的木段，若树木直径在10厘米以上，应将木段劈成2～4块，在木段的一面或两面每隔3-4厘米砍一个鱼鳞口，深度至木质部为度。
（5）培养场地选择：应选择在天麻种植场地附近，减少菌材搬运；坡度应小于200和向阳的山地，土壤以土层深度，疏松透气，排水良好的砂壤土，要有灌溉水源的地方为宜。
（6）菌材培养方法：培养方法有多种，现以窖培法为例。挖窖长2米，宽1米，深30厘米。将窖底挖松整平，铺一层1厘米厚的树叶，平放一层树木段，如是干木段应提前一天用水浸泡24小时，在树木段之间放入菌枝4-5根，洒一些清水，浇湿树木段和树叶，然后用沙土或腐殖土填满树木段间空隙，并略高于树木段为宜。再放入第二层树木段，树木段间放入