发布时间 : 星期四 文章药品研发申报基本要求 - -质量部分Microsoft Word 文档更新完毕开始阅读
精密度 重复性 - + + + - + +
- - + + - -
+ + + - - +
中间精密度 -
专属性 检出限 定量限 线性范围
+ - - -
4.4.2 验证基本内容 项目 专属性 线性和范围 定量限与检测限
准确度 精密度 溶液的稳定性 耐用性
验证结果
验证结果注释：
专属性：溶剂空白（鉴别、含量、有关物质、特殊杂质、残留溶剂、溶出度）、被检成分之间及与溶剂或内标之间、强降解（高温、强光、高湿、强酸、强碱、氧化）、粗品、中间体、副产物、降解产物之间等分离（有关物质、含量）度是否满足要求，是否有干扰。
强降解试验需同时分析：杂峰增加个数、杂质增加量%、含量下降量%、物料平衡率% 杂峰增加个数=降解后杂峰个数-未降解杂峰个数
杂质增量量%=降解后杂峰总量%-未降解杂峰总量%（一般情况以归一化计，特殊杂质可考虑校正因子或杂质对照）
含量下降量%=降解后含量%-未降解含量%（一般未降解含量按相对100%计） 物料平衡率%=｜杂质增加量%-含量下降量%｜≤5%
线性和范围：列出各成分的线性范围（含单位，以浓度表示）、回归方程、相关系数（以R计，4位有效数字，一般含量测定≥0.9999；一般杂质≥0.999，特殊杂质≥0.99，Y轴截距应在100%响应值的25%以内）、进样浓度；对于归一化计算杂质含量的，需同时提交主成分的定量限至进样浓度1.5倍以上的线性范围，对于特定杂质，需提交该杂质定量限至限度2.0倍以上的线性范围。
定量限和检出限：列出各成分定量限与检出限（含单位，以浓度表示），以及相应最小定量量和最小检出
量（以%表示，小数点后2位有效数字）。一般杂质的定量限应≤0.05%；检测限应≤0.03%，特殊杂质（第1类重金属、残留溶剂、基因毒性杂质）其定量限与检出限应满足相应灵敏度要求。 定量限、检出限、线性范围最好同时试验，参考稀释方式如下： 25mg→25ml ⑴：1mg/ml； 取⑴ 8ml→10ml⑵：0.8mg/ml； 取⑴ 5ml→10ml⑶：0.5mg/ml； 取⑴ 2ml→10ml⑷：0.2mg/ml； 取⑴ 1ml→10ml⑸：0.1mg/ml； 取⑶ 1ml→10ml⑹：50μg/ml； 取⑷ 1ml→10ml⑺：20μg/ml； 取⑸ 1ml→10ml⑻：10μg/ml； 取⑹ 1ml→10ml⑼：5μg/ml； 取⑺ 1ml→10ml⑽：2μg/ml； 取⑻ 1ml→10ml⑾：1μg/ml； 取⑼ 1ml→10ml⑿：500ng/ml； 取⑽ 1ml→10ml⒀：200ng/ml； 取⑾ 1ml→10ml⒁：100ng/ml； 取⑿ 1ml→10ml⒂：50ng/ml； 取⒀ 1ml→10ml⒃：20ng/ml； 取⒁ 1ml→10ml⒄：10ng/ml； 取⒂ 1ml→10ml⒅：5ng/ml； 取⒃ 1ml→10ml⒆：2ng/ml； 取⒄ 1ml→10ml⒇：1ng/ml。
注：上述主要针对有关物质和含量（最好用原料），其他试验根据具体供试品、仪器、方法灵敏度要求，适当降低或增加浓度（比例、方式不变）。被测液浓度应在定量限以上10倍为宜。
定量限重复性：根据上述试验，以确定定量限浓度溶液连续进样7次，一般分析（HPLC、IC、GC）：RSD≤5%；微量测定（ICP、AAS、GC）RSD≤10%；超微量分析（LC-MS）RSD≤15%。
准确度：原料药含量无法获得直接准确度，只能与其他方法进行比较；建议采用加样回收进行主成分及杂质准确度试验：
杂质（有关物质、对映异构体、残留溶剂、其他特定杂质）：主成分中加入限度值10%～50%、100%、150%～200%进行回收（如果产品中已有相应杂质，应相应减少加入量，n=9，一般杂质平均回收率：100%±2.5%、RSD≤5.0%，低微量杂质平均回收率：100%±5.0%、RSD≤10.0%）；极微量杂质平均回收率：100%±10.0%、RSD≤15.0%）；
主成分（含量、含量均匀度）：辅料空白中加入70%、100%、130%进行回收，统计平均值和RSD(n=9，一般成分平均回收率：100%±1.5%、RSD≤2.0%，低微量成分平均回收率：100%±2.5%、RSD≤5.0%)； 主成分（溶出度/释放度）：辅料空白中加入10%、30%、50%、80%、110%进行回收，统计平均值和RSD(n=15，一般成分平均回收率：100%±1.5%、RSD≤3.0%，低微量成分平均回收率：100%±1.53.0%、RSD≤6.0%)。
注1：可根据具体检测指标范围，选择更宽线性范围或准确度范围（同时包含多指标成分测定，如不同规格浓度的品种、不同浓度的检测项目）。
注2：为了保证试验结果成功率，各浓度多制备一份进样，根据情况自由取舍。
精密度：包括供试品溶液测定结果重复性（n=6）和中间精密度（n=3），需分别报告平均值与RSD及总平均值与总RSD，如果涉及微量杂质未检出或检出量太小，可采用加样回收（含量与杂质100%，并同时考察对照品溶液精密度）计算精密度；残留溶剂、溶出度、对映异构体、其他特定杂质等不考察中间精密
度）:
常量含量(容量)：重复性/中间精密度RSD均≤0.6%，总平均RSD≤1.0%； 常量含量（HPLC\\GC）：重复性/中间精密度RSD均≤2.0%，总平均RSD≤3.0%； 微量含量、杂质：重复性/中间精密度RSD均≤4.0%，总平均RSD≤6.0%； 低微量含量、杂质：重复性/中间精密度RSD均≤8.0%，总平均RSD≤10.0%； 极微量含量、杂质：重复性/中间精密度RSD均≤10.0%，总平均RSD≤15.0%；
溶出度：加样回收（20%、50%、100%，n=9）重复性RSD均≤3.0%，总平均RSD≤4.0%。
溶液稳定性：需汇报供试品溶液和对照品溶液稳定性（以最长稳定时间计算）。峰面积或含量偏差RSD≤1.0%认为溶液稳定；微量成分≤5.0%；极微量成份≤10.0%。
对照品溶液及供试品溶液室温/箱稳定性（稳定：1d、2d、3d、5d、7d；不稳定，1h、2h、3h、4h，另外需提供冰箱稳定性：1h、2h、4h、8h、12h、24h）。
对光敏感成分需考察光稳定性（1h、2h、4h、8h、12h、24h，2d、3d、5d、7d）。
贵重对照品贮备液或对照品溶液可考察冰箱更长稳定性（1周、2周、4周、2月、3月、4月、5月、6月，原则上不超过6个月，原则上先分装至量瓶，用前稀释到刻度）。 耐用性：对分析方法中各种条件微小变化都进行研究：
HPLC：流动相比例（±5%）、pH（±0.2）、柱温（±5℃）、流速（±0.2ml/min）、色谱柱（不同品牌、不同长度、不同批号各1根），考察分离度和检测结果，如果样品含量低微，可采用加样回收（100%）进行。
GC：色谱柱（不同批号各1根）、柱温（±5℃）、进样口（±5℃）、检测器（±5℃），顶空瓶温度（±5℃），顶空瓶平衡时间（±5min）。
理化反应：各条件（温度、浓度、加量：（±10%）。 可接受标准：
∣各变动条件值-与重复性值∣≤±2%（常量）； ∣各变动条件值-与重复性值∣≤±5%（微量）； ∣各变动条件值-与重复性值∣≤±10%（极微量）； 拖尾因子≤2.0，分离度≥1.5（复杂成分≥1.0）。 4.5对照品
对照品/标准品（以下统称对照品）包括含量测定对照品和杂质对照品，其使用目的不同，纯度要求不同。分析工作中最困难的是杂质对照品（获得困难、量少、纯度不够）。对照品需建立使用台账登记（购进凭证、使用量和剩余量），对照品需考察冰箱溶液稳定性，以支持长期反复使用目的。 4.5.1 对照品来源
对照品包括法定对照品和工作对照品，能够获得法定对照品，最简单办法是使用法定对照品（ChP、USP、EP、BP），但考虑到对照品价格成本，最好通过自制原料精制后标定使用。购买其他渠道对照品或杂质对照品，以及自制对照品需经鉴定和标定，方可作为对照品使用。 4.5.2 对照品鉴定
对照品鉴定要求宽于原料鉴定，可不进行晶型、元素分析、比旋度、熔点、热分析等，但至少需进行四大谱（NMR、MS、IR、UV）确认基本结构。 4.5.3 对照品标定
对照品/精制品：含量限度一般要求（按干燥品或无水物计）：≥99.5%；有关物质总量一般≤0.5%； 杂质对照品：含量限度一般要求（按干燥品或无水物计）：≥95.0%，特殊杂质对照品含量限度可适当放宽为90.0%；有关物质总量一般≤5.0%；特殊杂质对照品杂质总量可适当放宽为10.0%；
含量限度（按干燥品或无水物计）：滴定法：一般≥99.0%，最低≥98.5%；HPLC法：98.0%～102.0%；β-内酰胺抗生素≥95.0%，其他更低限度要求需有充分依据（和原研对比、USP、EP标准参考）； 有法定对照品标定：HPLC/外标法（有机物）或IC/外标法（无机物，测一种离子即可）。
标定：测定相同浓度的6份对照品与6份供试品，计算含量、平均含量和RSD，其中RSD应≤0.8%； 复标：测定相同浓度的3份对照品、3份供试品，计算含量、平均含量和RSD，其中RSD应≤0.8%； 综合：计算标定和复标平均含量和RSD，RSD≤1.0%。
无法定对照品标定：参照原料标准建立各项质量指标，特别是各类有机杂质、无机杂质，如水分、残留溶剂（可合并为干燥失重）、特定有关物质、非特定有关物质、对映异构体、炽灼残渣、重金属等。 标示含量%=（100%-水分%-残渣%-残留溶剂%-无机盐杂质%）*有机物质%或
标定含量%=（100%-干燥失重%--炽灼残渣%）*有机物质%（杂质对照品标定方法推荐） 4.6 杂质分析
杂质分析是CTD最重要要求，目前绝大多数杂质分析不够全面、深入：
杂质列表：工艺涉及的一般杂质（有机杂质、无机杂质、残留溶剂）、特殊毒性杂质（基因毒性杂质、1类重金属、1类残留溶剂），说明来源、限度控制（是否控制及控制量）；
来源分析：基于合成物料组成与来源、试验条件、反应机理、分析残留起始物料、中间体、副产物、降解产物、残留溶剂、重金属残留、基因毒性杂质、1类溶剂残留；基于产品分子机构与理化性质、原辅料相容性实验、制剂工艺条件，推导制剂工艺杂质与降解产物。
试验验证：通过各步反应监控与残留检测、强降解（高温、强光、高湿、强酸、强碱、氧化）、稳定性（加速、长期）辅助证明杂质产生机理与存在可能性。
杂质控制：根据杂质安全性风险、检测量情况制定控制策略（中间过程控制、终产品控制）。控制方法首选经济、环保、通用分析方法，必须满足限度要求，特别是基因毒性杂质、1类重金属、1类残留溶剂。 4.7 稳定性 4.7.1 指导原则 稳定性指导原则
【9～16】
：
ChP2010年版稳定性指导原则
CFDA：化学药物稳定性研究技术指导原则 ICH Q1A 新原料药及其制剂的稳定性试验 ICH Q1B 新原料药及其制剂的光稳定性试验 ICH Q1C 新剂型的稳定性试验分析方法验证
ICH Q1D 新原料药和制剂稳定性试验的括号设计法和矩阵设计法 ICH Q1E 稳定性数据的评价
ICH Q1F 气候带III和IV注册用稳定性数据 4.7.2 样品要求
至少中试规模、模拟市售包装，连续3批（影响因素1批、去包装）、原则上1批原料对应1批制剂。样品信息应在资料中体现。对于多规格制剂产品，如果浓度和包装相同，仅仅装量差异，可减少同规格批量为1～2批；如果涉及不同浓度、不同包装形式，可采用括号设计法及矩阵设计法以减少批量
【14】
。
尽可能同时进行参比制剂（至少1批，稳定性差品种建议2～3批，生产日期不同及刚出厂、效期中段、近效期）放样检测对比。根据参比制剂（原研在国内外产品、ICH主流国产品）特性（主要是价格因素及来源可能性），参比制剂可仅进行关键项目（有关物质、含量、溶出度、溶液颜色和澄清度、粒径、pH、水分等）关键时间点（10天、加速6月、长期6月、12月、24月）检测。 4.7.3 稳定性条件
影响因素：高温（60℃、40℃）；高湿（RH92.5%、75%）、光照（4500Lx±500Lx）；原则上影响因素试验应反复验证多次，特别是处方工艺筛选样品，以判断处方工艺合理性；原则上小试样品完成影响因素试验评价方可进行中试准备，并为后期中试样品稳定性设计提供充分依据。取样检验日期：0、5、10天（不建议合并检验，特别是5天和10天）。
加速试验：首选40℃±2℃，RH75%±5%；已经初步稳定性验证产品不稳定性，可同时进行中间条件（30℃±2℃，RH65%±5%）；拟冷藏样品可在25℃±2℃，RH60%±5%条件下进行加速，冷冻保存样品