发布时间 : 星期三 文章生化基础知识--总结终极版更新完毕开始阅读
a) 所有比色法的项目都是是线性定标，比浊法的项目都是非线性定标；
b) 后面的定标公式中：R表示反应度，C表示浓度（活性），K、R0、a、b、c、d表示定标参数。
c) 标准液：指浓度已经准确测知的溶液。 1.8.2.2. 线性定标 a) 单点线性定标
定标公式：R=KC，只有1个定标参数K，K= 定标曲线如下图：
只需提供1个标准品。大多数酶学项目可以不定标而直接输入因数(输入值F=1/K)。 b) 两点线性定标
定标公式：R=KC+b，有2个定标参数，K和b， 其中，；
要求提供2个标准品，C1、C2为标准品1和2的浓度，R1、R2为标准品1和2的反应度。
定标曲线如下图：
c) 多点线性定标
定标公式：R=KC+b，有2个定标参数，K和b，其中：
要求提供n（n≥3）个标准品，Ci为标准品i的浓度，Ri为标准品i的反应度。 1.8.2.3. 非线性定标
a) Logistic-Log 4P
定标公式：，有4个参数，即R0、K、a和b。 要求提供至少4个标准品，其中第1个标准品的浓度（活性）为零，其对应的R就等于R0，用最速下降法+拟牛顿法求解。适用于随着浓度增加，其反应度增加越来越小的定标曲线，如图：
b) Logistic-Log 5P
定标公式：，有5个参数，即R0、K、a、b和c。要求提供至少5个标准品，其中第1个标准品的浓度(活性)为零，其对应的R就等于R0，用最速下降法+拟牛顿法求解，适用范围同Logistic-Log 4P，只是曲线拟合程度更高。
c) Exponential5P
定标公式：，有5个参数，即R0、K、a、b和c。要求提供至少5个标准品，其中第1个标准品的浓度(活性)为零，其对应的R就等于R0，用最速下降法+拟牛顿法求解。适用于浓度增加到一定程度后，其反应度增加越来越大的定标曲线，如图：
d) Polynomial5P
定标公式：，有5个参数，即R0、a、b、c和d。要求提供至少5个标准品，其中第1个标准品的浓度(活性)为零，其对应的R就等于R0，用最速下降法+拟牛顿法求解。
e) Parabola
定标公式：R=aC2+bC+c，有3个参数，即a、b和c。要求提供至少3个标准品，解3元线性方程组，用全选主元高斯消去法求解。
f) Spline
定标公式：C-Ci=R0i+ai(C-Ci)+bi(C-Ci)2+ci(C-Ci)3-R有4i个参数，即R0i、ai、bi和ci。 要求提供2-6个标准品，用最速下降法+拟牛顿法求解。由于是分段拟和，其拟和程度在所有定标类型中最高。 1.8.3. 浓度（活性）的计算
浓度(或活性)C的计算根椐选用的不同定标类型而计算公式不同，下面一一列举： 1.8.3.1. 线性定标 a) 单点线性定标
，K为定标参数；或C=R×F，F为输入的因数。 b) 两点线性定标
，K和b为定标参数。 c) 多点线性定标
，K和b为定标参数。 1.8.3.2. 非线性定标（略）
1.8.3.3. 其他相关计算
a) 平衡点判断，仅适用于终点法
取设定的反应终点附近的连续4个周期吸光度值Ai，从i=0查起，若有连续|Ai-Ai+1|、|Ai+1-Ai+2|和|Ai+2-Ai+3|<δ(δ暂取0.03，依据重复性指标给出),则认为找到平衡点，否则在结果上标明“未找到平衡点”。 b) 线性限判断，仅适用于动力学法
测定点大于9个：线性限=(前6个点吸光度的变化率－后6个点的吸光度变化率)/所有点的吸光度变化率
4≤测定点≤8：线性限=(前3个点吸光度的变化率－后3个点的吸光度变化率)/所有点的吸光度变化率
下列情况不计算线性限：测定点数≤3；吸光度变化率小于0.006/分或吸光度变化率的差值小于0.006/分；计算出的线性限与设定值比较，若大于设定的线性限，则在结果上标明“超过线性限”。
c) 底物耗尽判断，仅适用于动力学法
仅对动力学法和固定时间法有效，一些高浓度（活性）样品使底物耗尽，使反应不再为0级(动力学法)或1级(固定时间法)反应，为能正确反映测定结果，需设置底物耗尽限(某一特定吸光度)，该吸光度限应正好是反应曲线中线性区与非线性区(动力学法)或1级反应区与多级反应区(固定时间法)的临界点，是在反应时间内反应没有发生底物耗尽时所能达到的最小(反应曲线向下)或最大(反应曲线向上)的吸光度值。一旦出现底物耗尽，系统给予相应标记，并自动稀释重测和提示用户手工稀释后再测定。 d) 抗原过剩检查，仅适用于比浊法
仅适用于通过光的透射测定的终点法项目，在抗原抗体的反应中，生成的不溶性抗原抗体复合物与抗原抗体的比例密切相关，在适当比例时生成的不溶性抗原抗体复合物量最大，此时透过的光最少，相当于吸光度最大；大于和小于这个比例时，生成的不溶性抗原抗体复合物量都会减少，透过的光增加，吸光度减小。在这种情况下，浓度相差很大的两份样本（抗原），
生成的不溶性抗原抗体复合物量可以相等，如果不进行抗原过剩检查，会得到相同的测定结果。
附录A，检验常识
A.1 生物化学
生物化学是生物学的分支学科，它的研究对象是生物体，它从分子水平阐述生命的物质组成和运行机理，因此生物化学是生命体的化学。分子生物学是研究生物大分子（蛋白质、酶、核酸、多糖等）的结构、功能及遗传信息传递与表达的学科，有时特指研究核酸大分子的学科。生物化学及分子生物学已经成为现代生物学的带头学科。 A.2 生物分子的组成
生物体内的物质分为有机物和无机物两大类，其中无机物有水和无机盐两类，有机物主要要蛋白质、核酸、糖和脂类等，以下就人体内的主要物质进行描述。
图 A 1
A.3 蛋白质的介绍
蛋白质是生物体的第二大化合物，在细胞的干重中，约一半以上是蛋白质，在活细胞中的含量在15%以上。蛋白质是大分子物质，分子量在6000至百万道尔顿。蛋白质的英文名叫做protein，源自希腊文προτο，它是“最原初的”，“第一重要的”意思。“朊”这个词就是根据protein的原意翻译的，但由于蛋白质一词沿用已久，所以“朊”并未被广泛采用。蛋白质在生物体内占有特殊的地位。蛋白质和核酸构成原生质中的主要成分，而原生质是生命现象的物质基础。 蛋白质分子中含有碳、氢、氧、氮，还有硫和磷。蛋白质是人体氮的唯一来源。 人体的脏器心、肺、肾、皮肤甚至头发、指甲等等都是由蛋白质组成。 蛋白质其生理功用在于新生和修补机体组织，同时也是能量的来源（由蛋白质所供的热量约占总热量的8～15％）。 蛋白质还能调节生理功能，人体所有的生理功能活动几乎都有蛋白质参加（物质和能量代谢过程中的各种酶、各类激素及抵抗疾病的抗体都是蛋白质）。 蛋白质是由氨基酸组成的，已经发现的氨基酸有20种。
A.3.1 蛋白质的基本单位：α-氨基酸
蛋白质彻底水解后，用化学分析方法证明其基本组成单位是α-氨基酸。存在于自然界的氨基酸有300余种，但构成天然蛋白质的氨基酸仅有20种，除甘氨酸外，蛋白质中的氨基酸均属L-α-氨基酸。
图 A 2 种
类 结构式 中文名 英文名 三字 符号 一字 符号 等电 点pI 非 极 性
疏 水 性 氨 基 酸
甘氨酸 glycine Gly G 5.97
丙氨酸 alanine Ala A 6.00
缬氨酸 valine Val V 5.96
亮氨酸 leucine Leu L 5.98
异亮氨酸 isoleucine Ile I 6.02
苯丙氨酸 phenlalanine Phe F 5.48
脯氨酸 proline Pro P 6.30 极 性 中 性 氨 基 酸
色氨酸 tryptophan Trp W 5.89
丝氨酸 serine Ser S 5.68
酪氨酸 tyrosine Tyr Y 5.66
半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07
蛋氨酸 methionine Met M 5.74
天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41
谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65
苏氨酸 threonine Thr T 5.60 酸 性 氨