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紫外-谷氨酸脱氢酶法：
NADH的减少，引起340nm吸光度的下降，单位时间内下降程度与UREA浓度成正比(固定时间法、两点速率法)。 升高主要见于肾脏疾病，也可见于脱水、糖尿病昏迷、肾上腺危相、胃肠道出血、循环虚脱，下降见于严重的肝脏疾病。 Cr 碱性苦味酸法：
肌酐-苦味酸复合物的生成，导致510nm吸光度的增加，单位时间内增加量与Cr浓度成正比(固定时间法、两点速率法)。 肌氨酸氧化酶法：
醌亚胺的生成，导致550nm吸光度的增加，增加的程度与Cr的含量成正比(终点法)。 升高见于肾功能的损伤。 Glu 氧化酶法：
醌亚胺的生成，导致500nm吸光度的增加，增加的程度与Glu的含量成正比(终点法)。 己糖激酶法：
NADH的生成，引起340nm吸光度的增加，增加程度与Glu浓度成正比(终点法)。 升高主要见于糖尿病，也可见于甲亢、垂体或肾上腺机能亢进；降低主要见于胰岛素过量、甲减、垂体机能减退、肾上腺机能减退、葡萄糖吸收障碍。
TP
紫红色络合物的生成，导致540nm吸光度的增加，增加的程度与TP的含量成正比(终点法)。 升高见于各种原因失水、一种或多种球蛋白分泌增多；降低见于营养不良。 Alb
白蛋白溴甲酚绿复合物的生成，导致630nm吸光度的增加，增加的程度与Alb的含量成正比(终点法)。 升高见于各种原因失水；降低见于肝脏疾病、肾病综合症、营养不良、蛋白丢失。
T-Bil
重氮偶合法、比色法、终点法。冻干单剂型
偶氮胆红素的生成，导致545nm吸光度的增加，增加的程度与T-Bil的含量成正比(终点法)。
胆红素 钒酸盐 >胆绿素 pH3.0表面活性剂
钒酸盐氧化法，比色法，终点法，液体双剂型
胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降，吸光度的变化与总胆红素含量成正比。 升高见于各类肝脏疾病，也可见于溶血性疾病。
D-Bil
重氮偶合法、比色法、终点法，冻干单剂型
偶氮胆红素的生成，导致545nm吸光度的增加，增加的程度与D-Bil的含量成正比(终点法)。
胆红素 钒酸盐 >胆绿素 pH3.0表面活性剂
钒酸盐氧化法，比色法，终点法，液体双剂型
胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降，吸光度的变化与直接胆红素浓度成正比。 升高见于各类肝脏疾病和胆导阻塞。
NH4+
NADH的减少，引起340nm吸光度的下降，下降程度与NH4+浓度成正比(终点法)。 升高见于肝昏迷、肝性脑病。
CO2
NADH的减少，引起340nm吸光度的下降，下降程度与CO2浓度成正比(终点法)。 异常见于酸碱平衡失调。
iP
络合物的生成，引起340nm吸光度的上升，上升程度与iP浓度成正比(终点法)。 升高见于慢性肾炎、甲状旁腺功能减退、VitD过多；降低见于佝偻病、骨软化等。 Ca 邻-甲酚肽络合酮(CPC)法
有色络合物的生成，引起575nm吸光度的上升，上升程度与Ca浓度成正比(终点法)，长征公司采用此法。
甲基麝香草酚兰(MTB)法
有色络合物的生成，引起612nm吸光度的上升，上升程度与Ca浓度成正比(终点法)，科华公司采用此法。 升高见于甲状旁腺功能亢进、肿瘤骨转移、VitD过多；降低见于甲状旁腺功能减退、佝偻病、肾病等。
Mg
有色络合物的生成，引起582nm吸光度的上升，上升程度与Mg浓度成正比(终点法)。 升高见于尿毒症；降低见于吸收障碍、糖尿病性昏迷、急慢性酒精中毒、慢性肾病等。 Cl
红色络合物的生成，引起480nm吸光度的上升，上升程度与Cl浓度成正比(终点法)。 升高见于柯兴综合症、酸中毒、尿毒症等；降低见于阿狄森氏病、碱中毒、腹泻、尿崩等。 ApoA1/ apoB
抗原抗体复合物的形成，导致340nm透射浊度的增加，增加的程度与apoA1/apoB的浓度成正比(终点法)。 ApoA1降低和apoB升高见于未控制的糖尿病、肾病综合症、肝功能低下；ApoA1和apoB均降低见于长期血液透析；ApoA1与 apoB的比值可预测心血管疾病危险性的预测，比值高，危险性低。
Lp(a)
抗原抗体复合物的形成，导致340nm透射浊度的增加，增加的程度与Lp(a)的浓度成正比(终点法)。 高浓度的Lp(a)是动脉粥样硬化的独立危险因子。
1.7. 生化分析仪测定方法及反应度的计算
各项目的计算方法决定于其所采用的测定方法和定标模式，临床生化检验测定方法总的来说可分为二大类：终点法和动力学法，其中动力学法又可分为零级动力学法和一级动力学法，下面分别介绍。 1.7.1. 终点法 1.7.1.1. 概述
指经过一段时间的反应，整个反应达到平衡，所有的被测定物已转变为产物，反应液的吸光度不再增加（或降低），吸光度的增加（或降低）程度与被测定物的浓度成正比。如下图：
如图所示：t1时刻加入试剂（体积为V）， t2时刻加入样本（体积为S），然后搅拌并反应，之后测量反应液的吸光度，在t3时刻反应达到终点； t2-t3为测定时间。 1.7.1.2. 反应度的计算 结果的计算包括三部分：反应度R（Response）的计算、定标参数的计算和浓度（或活性）的计算。这里仅介绍R的计算，定标参数的计算和浓度（或活性）的计算在后面专门讨论。 a) 单试剂单波长法
反应度R= t3时刻吸光度—单试剂空白吸光度 b) 单试剂双波长法
基本上同“单试剂—单波长—终点法”，只是对于每一个测定周期，其实际吸光度等于Aλ1-Aλ2。
c) 双试剂单波长法
t1时刻加入第一试剂（体积为V1），t2时刻加入样本（体积为S），之后搅拌，t3时刻加入第二试剂（体积为V2）并立即搅拌，t4时刻反应达到终点。t3-t2为孵育时间,t4-t3为测定时间。
R=t4时刻吸光度—双试剂空白吸光度；（反应起始时间设置为0）
R=t4时刻吸光度—双试剂空白吸光度—t3前一时刻的吸光度×体积校正因素；（反应起始时间设置为<0） d) 双试剂双波长法
基本上同“单试剂—单波长—终点法”，只是对于每一个测定周期，其实际吸光度等于Aλ1-Aλ2。
1.7.2. 零级动力学法 1.7.2.1. 概述
指反应速度与反应物（底物）浓度无关。因此，在整个反应过程中，反应物可以匀速地生成某个产物，导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加，减小或增加的速度（△A/min）与被测物（催化剂）的活性或浓度成正比。零级动力学法即通常所说的动力学法，也被称为连续监测法；主要用于酶活性的测定。
实际上，由于底物浓度不可能足够大，随着反应的进行，底物消耗到一定程度后，反应速度不再与酶活性成正比（参见米氏方程），因此，零级动力学法是针对于特定时间段而言的，各试剂商对这段时间有严格规定，见下图中的t3-tn：
t1时刻加入试剂（体积为V），t2时刻加入样本（体积为S），t3时刻反应稳定，tn时刻停止对反应进行监测；t3到tn之间的时间内，吸光度匀速变化，变化的速率和反应物的浓度成线性关系。t2-t3为延迟时间，t3-tn为测定时间。 1.7.2.2. 反应度的计算 a) 单波长 其中：
n＝t3到tn间的数据个数 Ti＝时间
Ai=某一时间的吸光度 b) 双波长
基本同单波长，只是某一时间的吸光度等于主波长吸光度—次波长吸光度 1.7.3. 一级动力学法 1.7.3.1. 概述
一级动力学法是指在被测物参与反应的条件下，在一定的反应时间内，反应速度与反应物浓度的一次方成正比，由于反应物在不断的消耗，因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的增加（或降低）速度越来越小，由于这类反应达到平衡的时间很长，必需在特定时间段内进行监测，该段时间内吸光度的增加（或）降低与被测定物的浓度成正比，见下图。一级动力学法又被称为初速率法、固定时间法、二点动力学法等。
如图所示：t1时刻加入试剂（体积为V），之后测量试剂空白的吸光度，t2时刻加入样本（体积为S），t3时刻反应稳定，t4时刻停止对反应进行监测；t2-t3为延迟时间，t3-t4为测定时间。
1.7.3.2. 反应度的计算 a) 单波长
反应度R=（t4时刻吸光度—t3时刻吸光度）/（t4—t3） b) 双波长
基本同单波长，只是某一时间的吸光度等于主波长吸光度—次波长吸光度 1.8. 定标参数和浓度的计算 1.8.1. 定标的意义
定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或 F 值）。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时，无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值，计算并打印出来的结果对我们就有意义了。 K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度，则：
标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个 K 值。之后无论什么样的标本，我们只要测出一个吸光度，用吸光度乘以这个K值，就可以得到标本的浓度了。
因此， K 值具有非常决定性的意义，可以决定测量标本的准确性。 1.8.2. 定标参数的计算
定标方法分为两大类，即线性定标和非线性定标，其中线性定标又包括单点线性定标（又称因数法）、两点线性定标（又称线性法）和多点（大于3点）线性定标（又称线性回归法），主要适用于比色法测定的项目；非线性定标主要包括Logistic-Log 4P、Logistic-Log 5P、Exponential5P、Polynomial5P、Parabola和 Spline，主要适用于比浊法测定的项目，下面分别予以介绍： 1.8.2.1. 几点说明