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湖州师范学院求真学院学士学位论文
象。其它资料也显示，微囊藻毒素的作用机制类似于内毒素，主要影响肝细胞和巨噬细胞。在肝细胞中，微囊藻毒素通过胆汁酸转移途径，抑制原生质中的蛋白磷酸酶活性，它是丝氨酸、苏氨酸蛋白磷酸酶的特异抑制剂。近几年确定微囊藻毒素是己知的最强的促癌剂之一，它与强促癌剂大田海绵酸(OKADAIC ACID)作用机制相似，进入生物体内对蛋白磷酸酶PP1和PP2A起抑制作用，从而导致一些肿瘤抑制蛋白如P53的高度磷酸化而失活，但其与蛋白磷酸酶PP1和PP2A的结合能力是大田海绵酸的100倍[11,12]。微囊藻毒素刺激磷酸酶A2活化，释放出炎症相关的环加氧酶如TXA2、PGI及它们的代谢产物。对肝脏的损害表现为细胞骨架重排引起的浆膜形态改变，随后由于细胞和细胞间钻附力的丧失，导致肝脏结构破坏进而充血甚至引起坏死。在巨噬细胞中，微囊藻毒素能刺激细胞分裂素白介素-1和肿瘤坏死因子一a的产生。这类细胞分裂素同样诱导炎症相关的环加氧酶如TXA2，PGI及它们的代谢产物，引起炎症休克。
目前对微囊藻毒素检侧分析可分成四个层次: 筛选(screening)、纯化(purification)、鉴别(identification)、定量(guantitative)。常见的方法有生物测试法(BIOASSAY)、化学分析法(薄层液相色谱TLC、气相色谱GC，高效液相色谱HPLC、液质联用LC/MS、快速原子轰击FABMS，LSIMS， MALDI-TOF MS)和生化分析法(酶联免疫反应ELISA、蛋白磷酸酶抑制)。ELISA检测法是一种固相测定，将抗原包被于聚苯乙烯微孔板后，每孔再加入待测抗体孵育。如待侧抗体能与抗原反应，即可产生抗体-抗原结合物。而后加入酶标二抗再经孵育，即生成抗原-抗体-酶标二抗结合物，随之加底物显色，用酶标检测消光值大小，根据标准曲线可算出欲测抗体的浓度，或按抗体的倍比稀释度计算出效价。ELISA方法灵敏度极高，检测限很低，定量检测水体总毒素，可达到p9级水平。需要样品量少，前处理简单。本实验主要运用ELISA方法对微囊藻毒素进行了定量检测。
5. 总结与展望
自从MC被发现以来，大部分研究集中在MC对肝脏的毒性影响，发现肝脏是其累积和作用的主要靶器官。但近几年通过对MC在水产动物的各种器官(主要是肝胰腺、消化道、性腺、卵、肌肉和足等)中的累积规律进行系统分析，发现性腺是仅次于肝脏的第2个靶器官，且这种影响可传递到后代[13,14]。研究表明，MC对鸭的生殖系统有明显的毒性[15]。所以，MC对动物及人类的生殖健康的影响应该引起足够的重视。本实验主要研究了微囊藻毒素对鸭肝脏的毒性作用，但是对与微囊藻毒素对鸭的生殖系统的毒性作用及微囊藻毒素对于人类的危害还要进一步进行研究。
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参考文献
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致 谢
本文是在张易祥老师的亲切关怀和悉心指导下完成的，张老师对本实验提出了许多的修改意见，并指导实验的整个步骤，从最初的论文选题到实验工作乃至论文的写作都倾注了这位老师的大量心血。张老师高尚谦和的为人，严谨求实的治学、研究态度，勤奋忘我的工作精神，一直潜移默化地
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影响着我，也必将指导我一生的做人和治学，特在此向张老师表示深深的敬意和诚挚的感谢！ 要特别感谢细胞研究所的刘莉老师、曹访、采克俊老师为我提供了一个宽松的科研环境，培养我的独立思考和解决问题能力，拓宽了我的研究领域和思路。
感谢060931班的所有同学，感谢你们陪我一起渡过了许多风风雨雨。还要感谢我深爱的父母亲一直以来对我无怨无悔的付出、支持、关爱、尊重和信任，在我学习、生活、感情、工作上遇到困难时，是您们帮我抵御风霜，谢谢您们。我是幸运而幸福的，我知足并且义无反顾的在大家的关爱下坚持自己的信念和理想一路前行。
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