2019-2020学年生物人教版选修1同步检测:专题2.课题3 分解纤维素的微生物的分离

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模糊的透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈,故两种方法各有缺点。(4)刚果红与纤维素反应呈红色,纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色,在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。

答案:(1)葡萄糖苷 (2)接种环 灼烧 (3)纤维二糖 葡萄糖 第一种 (4)透明圈 发酵产纤维素酶

7.[2019·广东佛山一中高二期末]牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物,其中某些细菌能分解纤维素。为分离瘤胃中的纤维素分解菌,生物课外科研小组的同学开展了如下实验。请分析回答下列问题:

(1)纤维素酶是由多种酶组成的复合酶,其中能催化纤维二糖水解的是____________。纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定。

(2)—般而言,配制细菌培养基时,除了加入水、无机盐、碳源、氮源等主要营养成分之外,还应添加适量的________________。

(3)在稀释涂布之前,可以将菌种样液接种到液体培养基中进行选择培养,其目的是____________________________________。科研小组的同学将瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养液中,调节pH及温度至适宜条件,并持续通入无菌空气,结果一段时间后发现培养液中几乎没有菌种,原因是____________________________________。

(4)为筛选目的菌株,在倒平板时就加入刚果红(CR),这种染色法的优点是操作简单,不存在________的问题,缺点是会形成假透明圈,其原因是____________________________________________________(答出一点即可)。

解析:(1)纤维素酶是由多种酶组成的复合酶,包括C1酶、CX

酶和葡萄糖苷酶,其中能催化纤维二糖水解的是葡萄糖苷酶。纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后

所产生的葡萄糖进行定量测定。(2)一般而言,配制细菌培养基时,除了加入水、无机盐、碳源、氮源等主要营养成分之外,还应添加适量的特殊营养物质如生长因子、维生素。(3)在稀释涂布之前,可以将菌种样液接种到液体培养基中进行选择培养,其目的是增加纤维素分解菌(或目的菌)的浓度。科研小组的同学将瘤胃菌种提取液接种到适宜的培养液中,调节pH及温度至适宜条件,并持续通入无菌空气,结果一段时间后发现培养液中几乎没有菌种,原因是瘤胃中的微生物为厌氧型,不能在有氧环境中生存、繁殖。(4)为筛选目的菌株,在倒平板时就加入刚果红(CR),这种染色法的优点是操作简单,不存在菌落混杂的问题,缺点是会形成假透明圈,原因是产生淀粉酶的微生物或能降解色素的微生物也能产生透明圈,与纤维素分解菌不易区分。

答案:(1)葡萄糖苷酶 葡萄糖

(2)特殊营养物质(生长因子、维生素)

(3)增加纤维素分解菌(或目的菌)的浓度 瘤胃中的微生物为厌氧型,不能在有氧环境中生存、繁殖

(4)菌落混杂 产生淀粉酶的微生物或能降解色素的微生物也能产生透明圈,与纤维素分解菌不易区分

8.[2019·四川高二期末]土壤中含有大量分解纤维素的细菌和真菌,科研人员从土壤中筛选高效分解纤维素的真菌,以便用于生产实践。请分析回答下列问题:

(1)纤维素分解菌在细胞________(填“内”或“外”)将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种组分,即______________________。

(2)利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌,一般选择________较大的菌落。该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能____________________________________________________(答两点)。

(3)为了解纤维素酶的结构特点,需从细胞中将其提取出来,提取时常用________法进行粗分离后再进行提纯,在纯度鉴定时,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳来鉴定提取得到纤维素酶的纯度。

电泳时加入SDS的作用是__________________________________________________________。

解析: (1)纤维素分解菌可以将自身合成的纤维素酶分泌到细胞外,在细胞外将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,而且透明圈的大小与纤维素酶的量与活性有关。可见,利用刚果红染色法筛选纤维素分解菌,一般选择透明圈较大的菌落。由于振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,所以振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。 (3)纤维素酶的化学本质是蛋白质,对其提取时常用透析法进行粗分离后再进行提纯。电泳时加入SDS的作用是:掩盖不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素。 答案:(1)外 C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶

(2)透明圈 提高培养液中溶解氧的含量,可使菌体与培养液充分接触,提高营养物质的利用率

(3)透析 掩盖不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素

9.[2019·河南高二月考]纤维素分解菌培养基的配方,请回答下列问题:

纤维素粉 5 g NaNO3 1 g Na2HPO4·7H2O 1.2 g KH2PO4 0.9 g MgSO4·7H2O 0.5 g KCl 0.5 g 酵母膏 0.5 g 水解酪素 0.5 g 蒸馏水 加至1 L (1)实验用的培养皿常用的两种火菌方法是______________________________,其中一种方法在灭菌之前需要将锅内的冷空气排尽,否则会因________________而影响灭菌效果。

(2)这个培养基通过__________________________实现对纤维素分解菌的选择作用,此外在培养过程中要将培养瓶放置在摇床上,其目的是____________________________________________________。

(3)据图分析,培养基中添加的多种无机盐的作用包括________________________________________________________________________

________________________________________________________________________(至少答出三点)。

(4)若将此培养基改为纤维素分解菌的鉴别培养基,还需要在其中添加的成分有________________。在实验室培养微生物时,常用紫外线对空气进行消毒,其消毒原理是________________________________。

解析:(1)实验室中培养皿常用干热灭菌法或高压蒸汽灭菌法进行灭菌处理,其中高压蒸汽灭菌法在灭菌之前需要将锅内的冷空气排尽,否则会因升不到预设温度而影响灭菌效果。(2)纤维素分解菌可以分解纤维素,而其他微生物不能,因此这个培养基通过以纤维素粉为唯一碳源实现对纤维素分解菌的选择作用;在培养过程中将培养瓶放置在摇床上,可以增加培养液中的溶氧量,并且促进菌体与营养物质充分接触,有利于菌体快速繁殖。(3)根据表格分析可知,该培养基含有5种无机盐,这些无机盐具有为微生物提供氮源、作为缓冲物质调节酸碱平衡、提供无机营养、维持渗透压等功能。(4)鉴别纤维素分解菌应该用加入指示剂的固

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