南农考研生化课题(2)

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(D)酶D (E)酶E

6. 在大肠杆菌中,嘧啶的反馈抑制作用控制下列什么酶的活性 (A)二氢乳清酸还原酶 (B)乳清酸焦磷酸化酶 (C)还原酶 (D)天冬氨酸转氨甲酰酶 (E)羟甲酰胞苷酸合成酶 7. 大肠杆菌乳糖操纵子的控制系统有 (A)可阻遏的负控制 (B)可诱导的负控制 (C)可阻遏的正控制 (D)可诱导的正控制

8. 阻遏蛋白通过与下列什么物质结合才阻止蛋白质的合成 (A)fMet-tRNA (B)核糖体 (C)RNA聚合酶 (D)mRNA的特殊区域 (E)DNA上的特殊区域 9. 基因剔除(knock out)的方法主要用证明 (A) 基因的调控 (B) 基因的结构

(C) 基因的表达 (D) RNA的特殊区域 (E) 基因的功能 10. 在转录时DNA分子上被RNA聚合酶特异性识别的作用顺式元件为 (A) 操纵子 (B)启动子 (C) 终止子 (D) 增强子 11.识别转录起点的蛋白因子为

(A) 核心酶 (B) σ因子 (C) ρ因子 (D) ω因子 12. 下列哪些不是操纵子的组成部分

(A) 启动了 (B) 操纵基因 (C) 阻遏物 (D) 结构基因 (E) 转录因子 13. 关于转录的叙述下列哪一项是正确的?

(A) mRNA翻译的模板,转录只是指合成mRNA的过程 (B) 转录需要RNA聚合酶,但这种RNA聚合酶对利福平不敏感 (C) 逆转录也需要RNA聚合酶

(D) DNA复制中合成RNA引物也一个转录过程

(E) 转录需要RNA聚合酶,是一种酶促的核苷酸聚合过程

14. 可被蛋白激酶磷酸化的氨基酸残基是( )

A.酪氨酸/甘氨酸 B.甘氨酸/苏氨酸 C.苏氨酸/丝氨酸 D.甘氨酸/丝氨酸 15. 别构调节时酶分子发生的改变是( )

A.一级结构 B.空间结构发 C. 辅酶的结合 D.与金属离子的结合

四 问答题

1. 简要说明代谢调节中酶活性调节。

2. 哪些化合物是联系糖、脂类、蛋白质和核酸代谢的重要中间代谢物? 为什么? 3. 简述酶活性调节的方式及其产生的效应。

4. 共价修饰与酶原激活导致的级联放大作用有何不同? 级联放大作用有何意义? 5. 以大肠杆菌乳糖操纵子为例,具体说明可诱导操纵子的作用机制。 6. 大肠杆菌色氨酸操纵子是如何调节有关酶类的合成的?

答 案

一、名词解释∶ 略

二、填空∶

1. 调节,操纵基因(操作子) 2. 磷酸

3. cAMP,腺苷酸换化酶。CAP,启动子,RNA聚合酶 4. 终产物,前头 5. 正、负

6. 正调控、负调控 7. 别乳糖、IPTG 8. 反馈

三、选择题∶

1. B 2. B 3. B 4. D 5. B 6. D 7. BD 8. E 9 E 10 B

11B 12CE 13E 14 15 16 17 18 19 20

实验和计算部分

一填空题:

1. 测定还原糖和总糖时,所用的材料是 。在碱性条件下,黄色的 试剂与 糖共热,生成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸,比色所用波长为为 nm。多糖必须经过

处理,才能用此法测定。

2. 浓盐法提取酵母中RNA,所用NaCl的浓度为 。在 条件,加热1小时,使RNA从细胞中释放出来,离心后取上清夜,将其pH调至 ,溶液中便有 现象出现。

3. RNA与浓盐酸和 试剂在沸水浴中加热,生成 色物质。

4. 测定蛋白质含量有 法,所用波长 nm,还有考马斯亮蓝G-250法,所用波长 nm。

5.在凝胶层析脱盐实验中,所用的葡聚糖凝胶的G值表示每克干胶溶胀时吸水量(毫升数)的

倍;蛋白质与盐的混合样品经凝胶柱层析,先被洗脱下来的是 ,可用 试剂鉴定;后被洗脱下来的是 , 可用 试剂鉴定。 6.在纸层析实验中,固定相是 ,流动相是 ,各种氨基酸经纸层析分离后可用 溶液显色定位。由于谷氨酸的 比丙氨酸大,所以谷氨酸的Rf值比丙氨酸的要 。

7.盘状聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳过程中存在的三种物理效应是 , 和 ,凝胶管的加样端应置于电场的 极,蛋白质向电极的

极移动。

8.维生素C又名 ,测定时所用材料为 。

9.在测得面粉中总糖的含量时,首先须将面粉进行 处理,然后再与DNS试剂反应, 产生 色的3-氨基-5-硝基水杨酸,进行比色测定。

10.在酵母RNA的提取实验中,我们采用 方法将RNA从细胞中释放出来,然后用 方法将RNA从盐溶液中析出。

11.在淀粉酶的活力测定中,我们用到了6N的NaOH溶液,它的作用是 。

12.下表的实验是用于研究 。反应后,三支试管蓝色由深到浅的顺序是 。 试剂

(管号) 淀粉酶0.5% NaCl

0.3% CuSO4

1% H2O 缓冲液pH6.8 淀粉酶液 I-KI

(1) 5mL 1mL 0 0 2mL 1mL 37℃

水浴

3分钟 1滴

(2) 5mL 0 1mL 0 2mL 1mL 1滴

(3) 5mL 0 0 1mL 2mL 1mL 1滴

13.在Sephadex G-25、G-75、G-100三种凝胶中,网眼最大的是 。在凝胶层

析脱盐的过程中,蛋白质和盐离子先洗脱下来的是 。洗脱下来的蛋白质可以用 或 来鉴定。

14.在用钼酸铵比色法测定维生素C含量时,用 试剂可防止金属

离子破坏维生素C。

15.在连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳中,样品的分离主要依据 效应和 效应。已知两种球状蛋白A、B,其分子量A>B,若它们所受的电场力相同,则泳动速度较快的是 。

16.我们在测定面粉总糖含量时,是采用 比色法在540nm处测定棕红色溶液的吸光度,查对标准曲线并计算,以先求得面粉中 含量,从而推算出糖的含量。 17.应用721型分光光度计进行比色时,设一个“0”号管的意义

是 , 。

18.由于DNA和RNA中不同的戊糖各自具备不同的颜色反应,常用 ,和 试剂定性鉴别DNA和RNA,前者生成蓝色物质,后者生成绿色物质。

19.根据蛋白质含量与蓝色的深浅在一定范围内成正比关系的原则,Folin-酚法测定蛋白质含量是在

nm波长处测定一组 值,在经作图,计算求得样品中蛋白质含量。 20.葡聚糖凝胶是常用的层析介质,调节葡聚糖和交联剂配比,可以获得网眼大小不同、

型号各异的凝胶。G值表示 。

21.淀粉酶能专一性地水解淀粉。影响唾液淀粉酶活性的因素很多,在我们的实验操作中, 是它的激活剂, 对唾液淀粉酶具抑制作用。 22.在离心机的操作过程中,样品倒入离心管一定要先连同离心套管一起进行 ,然后才能对角线放入离心机内,闭盖离心。

23. 用721型分光光度计测定吸光度时,首先要用空白对照液调节吸光度至 。当短时间不测定时,光路应处于 状态。

二. 问答与计算

1. 下表为某淀粉酶活力测定的步骤: 管号

步骤 1 2 3 4 5 6 7 8 淀粉酶 各0.5ml pH6.8缓冲液 各1ml

0.3%NaCl溶液 各1ml

水(ml) 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0

37℃预热6分钟

6N NaOH(ml) 0 0 0 0 0 0 1.0 0

1mg/ml的葡萄糖溶液(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0 0

37℃预热的可溶性淀粉(ml) 0 0 0 0 0 0 1.0 1.0

37℃保温4分钟

6N NaOH(ml) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 0 1.0

DNS试剂 各2ml

沸水浴5分钟,冷却,用水定容至25ml

吸光度A540nm 0 0.150 0.300 0.450 0.600 0.750 0.100 0.700

若规定一个淀粉酶活力单位为:在37℃、pH6.8的条件下,每分钟转化淀粉生成1mg还原糖所需的酶量。计算每毫升酶液的活力单位。 2. 由下表的实验,你可得出什么结论? 试剂

管号 淀粉液 盐溶液A 盐溶液B 水 pH6.8缓冲液 淀粉酶液 碘液 颜色

1 各5ml 1ml 0 0 各2ml 各1ml 37℃水浴5分钟 各1滴 深蓝

2 0 1ml 0 无色

3 0 0 1ml

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