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第三章 毒物检验（toxicologic analysis）
第一节 毒物检验的一般知识
一、毒物检验的目的 毒检的目的主要有两个：
（1）诊断性的目的 通过对进入动物体内的毒物的分离鉴定，查清毒物及中毒原因。即是否中毒，是什么毒物引起的中毒。为中毒的诊断、急救和预防提供科学的依据。通过毒检查清毒物对中毒病进行诊断，就如同通过查明虫体和微生物对寄生虫病和传染病进行诊断一样，如果查不清毒物，单凭病史、症状、病理变化等是很难对中毒病进行确诊的。
（2）预防性的目的 在人医，有防疫站专门搞这项工作，我们兽医部门，没有防疫站专门搞此项工作。通过经常对饲料、饮水、动物所在的环境（如空气、土壤、牧草等）及机体的某些生理指标进行监测及早预防中毒病的发生。
二、毒物检验中的几个主分环节
由于中毒往往在短时间内造成家畜的大批死亡，有时可能全军覆没，所以要求毒物检验既要迅速又要结果正确无误。毒物的种类很多，中毒的原因也很复杂，在进行毒检之前，要考虑以下几个问题：
1、有无中毒的可能，即是否为中毒？ 2、如果是中毒可能是何种毒物中毒？ 3、该取什么检材？ 4、用什么方法进行检验。
只有这几个问题明确了，毒检工作才不致于白费力，或少走弯路，做到有的放矢。
（一）中毒的一般诊断（回答1、2个问题）
对于第1和第2个问题，主要是通过病史调查、临床症状和尸体剖检的观察等一般的诊断来回答（详见教材P3—4中毒的诊断）讲课中已讲过了，这里再补充几点：
1、上述调查了解最好毒检工作者亲自到现场进行，掌握第一手资料。（集宁貂场的情况，不亲临现场调查，难得到，有时当事者怕承担责任，不说真话）
2、向送检人调查，仔细看送检单
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再实践中常遇到的情况是，检验者深入不了现场，送检人知道的情况甚少，送检单太简单，甚至无送检单，这就给毒检工作者带来很大的困难。送检人应是了解情况较多的饲养员或兽医，不能随便派个人为完成任务而来。为了给毒检创造条件，兽医工作者要学会填写送检单。送检单要全面地、客观地按实际情况填写，不要把主观的东西写进去。送检单的内容主要包括：病史（发病时间、病畜的数量、病前的饲养管理情况，临床症状、防治措施及疗效、死亡情况及尸体剖检等）。检材的种类、数量、包装情况，取材日期，送检目的和要求等。送检单的内容要填入“毒物检验记录”中。
（二）检材的采取，保管和装送（回答第3个问题）
通过一般诊断，大致上可确定是否为中毒和可能是哪种或哪几类毒物中毒，接着要进行的就是毒物检验，毒检的第一步就是检材的采取、保管和装送。
1、检材的采取 主要包括两个问题：即采什么？采多少。毒检的检材的采取一般分两大类：
（1）体外的 病畜槽内剩下的草料、饮水及可能食入的有毒物质，这些体外的检材的检验结果并不能确定病畜就是由这些检出的毒物引起的。
（2）体内的 病畜的呕吐物，粪，尿，胃的内容物，实质脏器血液等（这些结果也要做具体分析，例包头防疫站死骡）。
具体哪种毒物取什么部位的检材，量取多少，请看教材P111、113的表11和表12。总之，取材要尽量全面，数量要足够。
2、检材的采取、保管和装送中应注意的问题（如何保证检材不受污染） （1）取材前不要用水冲洗尸体和脏器，也不要用消毒药品，以防毒物流失和消毒药混入检材影响检验结果。例，巴盟建设兵团检材：我院——DDT，公安局——来苏儿。
（2）取材时所用器件、手套、装检材的器皿要事先用清水洗净，干燥后备用，也不用消毒药液洗。
（3）取出的检材要置于清洁干净的广口瓶、瓷罐或塑料袋中，不要加防腐剂，不要装入金属容器，装好后要密闭，贴上标签，填好送检单，尽快送往化验室。如不能立即送检，应放入冰箱中保存。如无冷冻设备，可加纯酒精防腐，但必须同时送检所用酒精，以供对照使用。
（三）选择并设计好检验方法（回答第4个问题） 经过对中毒的一般诊断，综合分析，可能出现几种情况：
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①确定了是中毒，但方向不明确，要求检验人员进行系统的检验，这种检验是大海捞针，最费时间，最费检材。
②有了较明确的方向，但具体的毒物不明确，例如，认为是农药中毒，但农药的种类很多，是哪一种农药引起的还不明确，这 就需要在农药的范围内缩小包围圈，查清具体的毒物。它比第一种情况省事。
③查清了可能引起中毒的具体毒物及其来源，就要确证一下就行了，这是最省事的。
毒检的方法有：
①预试验（探索检验方向，用于第一种情况）：观察检材颜色，如磷化锌——黑色的，氟乙酰—紫红色的；注意气味，如有机磷蒜臭味；升华试验（烧灼），如金属砷汞等；简单的化学方法，如植物有毒成分的预试验。注意：预试验只起探索的作用，不能作为诊断的依据，尚未做确诊试验，不能作出结论。
②定性检验（用于第2、3情况）：注意：a、每种毒物的检验要求做两种以上的检验方法，方法要具有特异性，灵敏可靠，几种方法结果一致方能确诊，只有一种出现阳性结果，不能确诊。b、检验时同时作阴性对照和阳性对照，阴性对照检查试剂及器皿有无问题，阳性对照检验反应是否正常进行，并作为判定结果的标准。阴性和阳性样品要同检材做同样的处理。
③含量测定：主要用于在正常动物体或植物体内存在，但达到一定量才引起中毒的物质，例如，无机氟的测定。常用的含量测定法有比色法，容量法，薄层分析法，目前多用仪器进行测定：如气相色谱仪，原子吸收光谱仪，紫外分光光度计，薄层扫描仪等。
④动物试验：（探索有无毒物，所含毒物的量能否引起中毒），把可疑检材给于动物，观察是否发病。实验室常遇到个体户死的牲畜，证明能否食用，有的是为验证，有的是打官司。
总之，可根据不同的目的，选用不同的方法。 （四）做好检验前的准备工作 1、保证实验试剂和仪器的质量
（1）毒检试验一般要求二级品（分析纯）AR。（附：一级品（优级纯）GR，三级品（化学纯）CR，四级品（实验室试剂）LR，五级品（生物试剂）BR。
（2）准备足够的试剂和器皿。配试剂时，浓度要精确。 （3）要求现用现配的试剂，一定要在使用前新配。
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（4）同一次试验中所用的移液管、滴定管、量筒、容量瓶、比色管等，规格、型号要尽量一致。
2、正确选取与合理使用检材
使用时用三三制：检验用1/3，重做用1/3，保存用1/3（防止打官司）。 （五）做好毒物的提取
这是毒检的关键，检材中毒物的含量很少，提取的越充分，越纯净，检验结果越满意。
在进行毒物提取时，应注意以下几个方面：
1、要按照毒物的化学性质选择提取方法。既要把毒物充分提取出来，又要不使之挥散或受到破坏。如有机磷农药易溶于有机溶剂，因而可以用有机溶剂浸泡或振摇提取。但有机磷遇热易挥发，在提出后挥散有机溶剂时，温度不可过高。
2、在尽可能不损失毒物的前提下，所用的提取方法，应能将干扰物质充分排除，必要时可进一步净化或提纯，以提高反应的灵敏度。对某些化结构相似的有毒物质，要设法使之分离。
3、要严格控制好提取过程中的各种条件。因为一种成熟的提取方法所规定的各种条件（如温度、PH、时间、试剂加入的方式与须序等。）都是根据所检毒物的化学特性及各种反应过程中的反应特点来确定的，违反这些条件，就有使提取工作失败，甚至发生事故的可能。
4、为了减少毒物在提取过程中的损耗，提取方法应尽可能简化，提取液转移、脱水、脱色时，应将原器皿及残渣上残留的毒物充分洗脱与收集。
5、提取过程中往往有毒气体或有机溶剂的蒸汽挥散，工作人员要注意防护。 （六）毒检结果的判定
当检验完成后，必须慎重、客观、全面地考虑一切有关问题，然后再作结论，以免发生诊断上的错误。
当检验结果为阳性，应注意的问题。
1、所采用的化学反应是否为鉴定该种毒物的专一反应？其灵敏度是否具有毒物检验意义（注意是否为检材的自然含量）？几种不同的反应是否出现一致的阳性反应？
2、化学试剂的纯度如何？空白对照是否为阴性？已知对照是否为阳性？ 3、是否由于盛装检材的器皿不洁，或取材时检材被周围环境中的毒物所污染？
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