发布时间 : 星期六 文章基因工程习题更新完毕开始阅读
7．限制性片段长度多态性(RFLP)是：( ) (a)用于遗传的“指纹结构”模式分析的技术 (b)二倍体细胞中的两个等位基因限制性图谱的差别 (c)物种中的两个个体限制性图谱间的差别 (d)两种物种个体间的限制性图谱差别 (e)两种酶在单个染色体上限制性图谱的差别
8．为了正确地构建一个真核基因组的物理图谱：( )。 (a)必须有可能清晰地分离各个染色体(通过脉冲场凝胶电泳)
(b)必须从单倍体细胞(配子)中分离DNA，这样避免了由二倍体细胞中同源染色体的存在而产生的干扰信息
(c)必须进行单个染色体分析，这只能在细胞分裂后期进行 (d)必须找到对于每个染色体只切割一次的限制酶
(e)必须首先分离核DNA和细胞器DNA，然后对它们分别作图 9．下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( ) (a)限制酶是外切酶而不是内切酶
(b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割 (c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的
(d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端 (e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端
10．因研究λ噬菌体的限制与修饰现象的本质而获得诺贝尔奖的科学家是：( ) (a)J．Lederberg (b)W.Arber (c)H．Smith (d)F.Sanger 11．第一个被分离的Ⅱ类酶是： ( )
(a)Eco K (b)Hind Ⅲ (c)Hind Ⅱ (d)Eco B
12．双链DNA中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般具有下列特征： ( )
(a)有对称轴 (b)两条链的5'→3'方向的序列相同 (c)是Ⅱ类酶的识别序列 (d)可增强基因的表达
13.在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制那一项最好?( ) (a)反应时间 (b)酶量 (c)反应体积 (d)酶的温度
14．在下列试剂中，那一种可以螯合Ca离子?( ) (a)EDTA (b)柠檬酸钠 (c)SDS (d)EGTA
15．在下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性?( )
(a)S1单链核酸酶 (b)末端转移酶 (c)碱性磷酸酶 (d)Bal31核酸酶 16．限制性内切核酸酶可以特异性地识别： ( ) (a)双链DNA的特定碱基对 (b)双链DNA的特定碱基序列 (c)特定的三联密码 (d)以上都正确
17．在下列酶中，催化反应不需要ATP的是( ) (a)EcoK (b)EcoB (c)T4 DNA连接酶 (d)BamHl
18．下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中，正确一项的是( )。 (a)Sau3AI (b)E.coRI (c)hind Ⅲ (d)Sau 3A1 19．限制性内切核酸酶的星号活性是指：( )
(a)在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。 (b)活性大大提高 (c)切割速度大大加快 (d)识别序列与原来的完全不同
20．下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?( ) (a)甘油含量过高 (b)反应体系中含有有机溶剂
(c)含有非Mg的二价阳离子 (d)酶切反应时酶浓度过低
21．DNA被某种酶切割后，电泳后得到的电泳带有些扩散，下列原因中，那一项不太可能?( )
(a)酶失活 (b)蛋白质(如BSA)同DNA结合 (c)酶切条件不合适 (d)有外切核酸酶污染 22．关于回文序列，下列各项中，( )是不正确的
(a)是限制性内切核酸酶的识别序列 (b)是某些蛋白的识别序列 (c)是基因的旁侧序列 (d)是高度重复序列
23．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当 (a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成
(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶
(c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
2+
2+
(d)不同的宿主系统具有不同的限制—修饰系统 四、简答题
1．现分离到X 82噬菌体的一个突变型，它同野生型的噬菌斑相当不同，并已分离到这两种噬菌体的DNA，请设计一个实验，初步鉴定是点突变、插入突变还是缺失突变? 2．说明Sanger DNA测序法的原理。
3．在酶切反应缓冲液中加入BSA的目的是什么?机理是什么?
4．Fredrick和McClarin等用一个由13个碱基对的DNA片段与EcoRI反应，然后分离到酶和DNA共结晶的复合物，通过X射线分析发现了什么?
5．有些噬菌体和质粒常常编码一些抗限制性酶的蛋白以中和宿主的限制系统。你认为噬菌体和质粒还有哪些可能的方式避免宿主的限制作用?
6．某学生在用EcoRI切割外源片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因? 7．在序列5’-CGAACATATGGAGT-3’中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么?
8．下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列： GAATCG，AAATTT， GATATC， ACGGCA?为什么?
9．用连接酶将Sau 3AI(↓GATC)切割的DNA与经BamHI(G↓GATCC)切割的DNA连接起来后，能够被BamHI切割的机率有多大(用百分比表示)?
10．用Klenow酶填补的办法可使5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使DNA上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失?BamHI(G↓GATCC)；Taq I(T↓CGA)，BssHⅡ(G↓CGCGC)。
11．请推测细菌的染色体上是否会有编码识别8个碱基的内切酶?怎样验证?
12．当两种限制性内切核酸酶的作用条件不同时，若要进行双酶切，应采取什么措施?为什么? 五、问答题
1．什么是细菌的限制—修饰系统(restriction-modification system，R-M system) 2．细菌的限制—修饰系统有什么意义? 3．说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。
4．I类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用? 5．Ⅲ类限制酶有哪些特点?
6．何谓限制性内切核酸酶的切割频率?
7．什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响?
8．双酶消化法(double digests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。 9. 什么是DNA多态性(DNA polymorphism)?
10．限制性片段长度多态性(restriction fragment length po1ymorphism,RFLP). 11．计算下列三种酶各自在某染色体DNA序列上识别位点间的平均距离： AluI： 5'AGCT 3’ EcoRI： 5'GAATrC 3’ 3’TCGA 5’ 3'CTTAGG 5’ AcyI： 5'GPuCGPyC 3’ 3’CPyGCPuG 5’
(注：Py=任何一种嘧啶；Pu=任何一种嘌呤)
12．为什么大多数内切酶被称为“限制”酶？
13．据Science杂志报道：一种重要的遗传疾病可由导致DNA中碱基替换的诱变剂在体外进行人工诱导。设计一种快速用以鉴定疾病基因型的检测方法。
14．为了绘制长为3.0KbBamHⅠ限制性片段的限制性图谱，分别用EcoRⅠ、HpaⅡ、EcoRⅠ+HpaⅡ消化这一段的三个样品，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，溴化乙锭染色后观察DNA 带型（15.2）。请根据这一结果，绘制一个限制性图谱，要标明EcoRⅠ和HpaⅡ识别位点间的相对位置，以及它们之间的距离（kb）. 六、概念题：
1.回文序列 2.同裂酶 3.限制性物理图谱