发布时间 : 星期二 文章河北省衡水中学2018届高三下学期第9周周考理科综合生物试题(解析版)_修正版更新完毕开始阅读
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以使其向不同方向分化，所以将目的基因导入ES细胞而不是上皮细胞。
(3) 干扰素基因属于目的基因，利用 PCR 技术扩增目的基因时，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。因DNA复制时，子链总是从5′向 3′方向延伸，子链与模板链反向平行，所以利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从图2的A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和C片段作为引物。由图2可以看出，用限制酶SmaⅠ切割会破坏干扰素基因，为将完整的干扰素基因切割下来，需要利用限制酶组合HindⅢ和 PstⅠ或 EcoRⅠ和 PstⅠ切割干扰素基因的两端，这样也可以使如图3所示质粒上保留一个完整的标记基因，即绿色荧光蛋白基因。
(4)综上分析，在构建的重组质粒上，红色荧光蛋白基因的结构已经被破坏，但绿色荧光蛋白基因的结构完整，因此将步骤③获得的 ES 细胞在荧光显微镜下观察，应选择只发绿色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，需采用抗原-抗体杂交技术，若有杂交带出现，表明干扰素基因已经成功表达，因此可用的检测物质是干扰素的抗体。
【点睛】本题的难点在于对（3）题的解答，其关键在于从图示和题意中抽提出隐含的信息：①DNA复制时，子链总是从5′向 3′方向延伸，子链与模板链反向平行，引物所起的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3ˊ端开始连接脱氧核苷酸；②用限制酶SmaⅠ切割含干扰素基因的DNA时会破坏干扰素基因的结构，而同时用限制酶HindⅢ和 PstⅠ或 EcoRⅠ和 PstⅠ切割则能保持干扰素基因结构的完整性；③质粒中含有的红色荧光蛋白基因和绿色荧光蛋白基因均属于标记基因，在构建基因表达载体时红色荧光蛋白基因的结构被破坏。据此结合基因工程的相关知识即可作答。
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