发布时间 : 星期三 文章酵母与植物保护更新完毕开始阅读
【作者基本信息】 内蒙古农业大学， 植物病理学， 2009， 硕士
【摘要】 甜瓜以其丰富独特的营养、清爽甘甜的口味而深受广大消费者青睐。然而,由于一些病原真菌的侵染所导致的采后病害是造成甜瓜腐烂损失的重要原因,同时也是影响内蒙古巴盟地区农民收入的一个重要原因。长期以来,使用化学药剂被认为是防治此类病害最有效的方法,但是由于存在着农药残留、环境污染和病原菌容易产生抗药性等诸多弊端,迫使人们去寻求新的安全的保鲜方法来取代化学药剂的使用。但是高效、“绿色”防治药剂的缺乏也成了多年来困扰农业生产的世界性难题。本研究旨在调查内蒙古地区厚皮甜瓜采后病害的发生情况,以及分离、筛选能够防治引起甜瓜采后病害主要病原真菌的生防菌株,并对其进行鉴定确定分类地位,对生防能力进行评价及其生防机制进行初步研究。1、采用病组织表面分离法,从已发病的甜瓜表面分离到113个菌株,通过致病性测定得到29株致病力较强的菌株。经形态特征观察、rDNA-ITS序列比对可将这29株病原菌划分为六大类,从中选出7株有代表性的菌株:b3、b6、b8、b1、b13、b21、b49,结合其生理生化特性分别鉴定为:菌株b3为实腐茎点霉(Phoma destructiva)、菌株b6为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporm)、菌株b8指状青霉(Penicillium digitatum)、菌株b10为细极链格孢(Alternaria tenuis)、菌株b13为玫红聚端孢
(Trichothecium roseum)、菌株b21为弯孢霉(Curvularia lunata)、菌株b49为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)。2、采用组织表面分离的方法,从甜瓜、苹果等水果表面以及酸奶分离到97株酵母菌菌株,经过生物测定得到2株对粉红单端孢菌(Trichothecium roseum)、镰刀菌(Fusarium spp.)2种病原菌防治效果在50%以上的菌株x6和p2,经形态特征观察、rDNA-ITS序列比对及生理生化特性测定,将菌株x6和p2分别鉴定为:Pichia anomala和Rhodotorula glutinis。3、对这两株生防酵母菌的田间与室内的生防效果进行研究发现,无论是在田间还是在室内生防试验中,生防酵母菌菌株Pichia anomala和Rhodotorula glutinis都对甜瓜采后病害有一定的防治效果,尤其是菌株Pichia anomala不仅效果稳定而且在田间防治试验中,其生防效果与化学杀菌剂施保克无显著差异。用浓度为1×108CFU/ml的生防酵母菌Pichia anomala菌悬液和用稀释浓度为1000倍的化学杀菌剂施保克处理过的甜瓜,其采后病害的发病率分别为28.33%和23.33%。4、通过测定生防菌株对甜瓜产生的诱导抗性即苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)等酶的活性和生防酵母菌在甜瓜上的定殖能力以及体外抑菌试验等方法,对Pichia anomala和Rhodotorula glutinis的生防机制进行了初步研究,结果显示:○1这两株酵母菌均不产生抗生素;○2这两株生防酵母菌都能够在甜瓜表面大量生长;○3苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)的活性显著增高; 更多还原
【Abstract】 Melon is a kind of popular and highly nutritional fruit. The severe problem for the melon production is post-harvest diseases caused by pathogenic. For the lacking of powerful and harmless control ways, the biological control emerges as a promising way to solve this problem.In our study, strains b3、b6、b8、b1、b13、b21 and b49 were isolated from the surface of disease melon. The b3、b6、b8、b1、b13 and b21 strains were caused the melon post-harvest diseases were identified as Phoma putaminum,Fusarium ox... 更多还原 【关键词】 采后病害； 生物防治； 真菌鉴定； 生防机制；
【Key words】 Postharvese diseases； Biocontrol； Identification of fungi； Biocontrol mechanism；
酵母菌对灵武长枣采后病害的生物防治研究
Postharvest Biological Control of Lingwu Long Jujube Fruits by Yeast
【作者】 李莉；
【导师】 李喜宏；
【作者基本信息】 天津科技大学， 农产品加工及贮藏工程， 2009， 硕士
【摘要】 应用拮抗菌株进行果蔬采后病害的生物防治是一项很有潜力的新型保鲜技术。本研究旨在从灵武长枣果实上分离、筛选抑制果实采后病害的拮抗菌株,并对其进行鉴定,研究其生物学特性以及对长枣果实病害的抑制效果,初步探讨其可能的作用机理。主要结果如下:1.优势病原菌的分离和鉴定:从灵武长枣果实伤口、表面、叶片及根际土壤中分离得到5种优势病原菌,分别为黑根霉、青霉、曲霉、交链孢霉和镰刀菌。依据柯赫氏法则证实病原菌的致病性。2.拮抗菌的分离和筛选从枣果表面和伤口分离筛选得到有良好拮抗效果的细菌3株、酵母菌6株,经过离体和活体筛选从中得到1株对果实采后5种优势病原菌有显著抑制效果的酵母菌Y-6。3.酵母菌Y-6的鉴定根据酵母菌Y-6的形态特征和培养特征、生理生化特性,确定Y-6的分类地位,初步鉴定菌株Y-6属于真菌门半知菌亚门(Deuteromycotina),芽孢菌纲
(Blastomycetes),隐球酵母目(Cyptococcates),隐球酵母科(Cyptococcaceae),克勒克酵母属(Kloeckera spp.)的柠檬形克勒克酵母(Kloeckera apiculata)。4.酵母菌Y-6的生物学特性研究酵母菌Y-6的生长过程比较平稳的,基本符合延滞期、对数生长期、稳定生长期和衰亡期四个阶段;适宜生长温度20℃～30℃,最佳培养温度28℃:适宜生长pH5～7,最适生长pH6;最适生长碳源为葡萄糖:最适生长氮源为蛋白胨和酵母膏;影响最大的无机盐为磷酸氢二钾和磷酸二氢钾。5.酵母菌Y-6的抑菌效果当Y-6菌悬液浓度为1.0×10~6～1.0×10~8CFU/mL时,生物防治的效果与其浓度呈正相关;分别在接种1.0×10~8CFU/mL Y-6的前48h、24h、2h、0h,后2h、24h、48h接种病原菌,都能维持抑菌效果,拮抗菌的接种时间越早生物防治的效果越明显。6.酵母菌Y-6的拮抗机理初步研究Y-6的滤液和热杀死液对致病霉菌没有抑制作用,说明Y-6不是通过分泌抑菌物质来发挥抑菌作用的;Y-6的细胞悬浮液的抑菌效果强于培养原液,说明Y-6菌株可能是通过营养和空间的竞争来发挥抑菌作用的:Y-6接种到果实伤口后可以迅速适应果实伤口环境,并且能诱导寄主产生抗性物质,使寄主体内抗病相关酶活性产生变化,从而抑制病原菌的生长,提高生防效果。 更多还原
【Abstract】 Biological control of postharvest diseases in fruits and vegetables has been a potential new
technology.The aim of this research is to isolate and screen out the effective antagonist against the main pathogens of Lingwu Long Jujube fruits,identify it,study its biological characteristics.The inhibition effects and their proper dynamics were evaluated after the antagonist was screened.Some conclusions were drawn as following:1.Isolating and identification of main pathogensFive main pathogens were ... 更多还原
【关键词】 灵武长枣； 病原菌； 拮抗酵母菌； Y-6； 生物防治； 拮抗机理；
【Key words】 Lingwu Long Jujube； pathogens； antagonistic yeast； Y-6； biological control； antagonistic mechanism；
拮抗酵母菌生防机理及应用研究
Studies on Biocontrol Mechanism and Application of Antagonistic Yeast
Fungus
【作者】 刘晓媛；
【导师】 郭红莲；
【作者基本信息】 天津科技大学， 食品科学， 2009， 硕士
【摘要】 果蔬采后生物防治作为一种控制采后病害的新途径逐渐被人们所重视,已研究可作为果蔬采后病害拮抗菌的微生物有细菌、霉菌和酵母菌等,其中酵母菌由于具有拮抗效果好、不产生毒素、可以和化学杀菌剂共同使用等优点成为果蔬采后防治研究的热点。本研究采用紫外诱变手段对汉逊德巴利酵母进行诱变选育,在4min的诱变时间下,成功获得一株新型拮抗酵母菌XY-331,且通过遗传稳定试验证明新型拮抗酵母XY-331拮抗性能稳定。根据L16(4~5)正交试验,确定酵母菌XY-331最优培养条件为培养基YEPD、培养温度32℃、培养时间40h、培养基中盐浓度6g/L、pH值5.0;并进一步优化了培养条件,确定最适氮源为蛋白胨,最适碳源为葡萄糖,且适宜黑暗培养。试验从浓度、处理方式、接种时间三个
因素研究酵母XY-331的拮抗效果,结果表明,酵母XY-331能推迟油桃软腐病发病,初期降低发病率57.4%;酵母菌悬液对病菌的抑制效果最好,在浓度为1×10~9CFU/mL,先于病原菌接种24h时,能有效降低油桃发病率,达到显著性水平(P≤0.05)。试验还对酵母菌XY-331的拮抗机理进行了初步探索:酵母菌XY-331能在果实伤口快速定殖,同时接种病菌时,其繁殖数量是单一接种酵母菌时的1.043倍,说明存在营养与空间竞争的拮抗机制;酵母菌XY-331处理后的油桃在贮藏期内三种防御酶活性变化为PPO酶活性呈现降低趋势,POD酶活性呈现升高趋势,PAL酶活性呈现升高趋势,基本符合增强寄主抗病性的要求,说明存在诱导寄主产生抗性物质的拮抗机制。 更多还原
【Abstract】 Bio-control has been paid attention gradually as a new way to control postharvest diseases of fruits and vegetables.It has been studied that many micro-organisms can be used as antagonists of Post-harvest Diseases of the fruits and vegetables,such as bacteria, fungi and yeast,etc.,and the best one is yeast which becomes a research hotspot now because of its good antagonism,non-toxins and being used with chemical fungicides.In this study,by means of UV-mutagenesis we succeeded to obtain a new typ... 更多还原 【关键词】 紫外诱变； 软腐病； 生物学特性； 拮抗效果； 拮抗机理；
【Key words】 UV-mutagenesis； soft rot； bionomics； antagonistic effect； antagonistic mechanism；
柑橘采后黑腐病菌的分离、鉴定及其拮抗酵母菌研究
Study on Screening, Identification and Antagonistic Yeasts of Postharvest
Black Rot in Citrus
【作者】 余慧；
【导师】 邓伯勋； 龙超安；
【作者基本信息】 华中农业大学， 果树学， 2009， 硕士
【摘要】 本研究从自然发病的温州蜜柑(Citrus.unshiu Marc cv.)果实上分离柑橘黑腐病原菌,结合形态学与rDNA-ITS序列分析确定该病原菌为柑橘链格孢(Alternariacitri),并对其生物学特性、田间侵染规律及拮抗酵母菌进行了初步研究,得到了三株对柑橘采后黑腐病有很好防治效果的酵母菌株Wf-b-1,γ-60-11和Wm-9,主要研究结果如下:1.确定分离到的病原菌为柑橘黑腐病原菌:经过形态学、果实致病性检测及rDNA-ITS序列分析三方面研究,确认该病原菌为柑橘链格孢(Alternaria citri)。2.对柑橘黑腐病原菌的生物学特性研究:Alternaria citri在PDA培养基菌丝生长最为旺盛,而在柑橘叶培养基上产孢量最大,可达3.13×10~6 spores/mL;pH值对Alternaria citri的菌丝生长及产孢量没有明显影响。在以察氏为基础培养基的不同碳源、氮源对Alternaria citri的生长测试中,葡萄糖是菌丝生长最好的碳源,壳聚糖上产孢量最高,达1.80×10~6 spores/mL;牛肉膏是菌丝生长和产孢量最好的氮源。Alternaria citri适宜的生长温度为25℃～32℃,最适温度为30℃,最佳产孢温度为32℃。光照条件对Alternaria citri菌丝生长没有显著影响,但黑暗条件更利于产孢。Alternaria citri的致死温度为55℃左右。药剂敏感性测试实验显示,在测试的几种常用化学药剂中,以1000 mg/kg 25%咪鲜胺、1000 mg/kg 50%多菌灵和2,4-D+250mg/kg 70%纯品甲托对Alternaria citri的抑制效果最好。3.初步确定柑橘链格孢侵染途径:从花期至果实采收的各个时期,链格孢菌均可侵入果实而潜伏。在盛花期,发现花瓣、花萼、柱头和子房均带有黑腐病菌,尤其是花瓣上带菌率为100%;在果实发育期,蒂部果皮和脐部果皮带菌率最高,果实内部也侵入了少量的病菌,说明蒂部和脐部可能是病菌侵入的两种途径。4.筛选出能有效防治Alternaria citri的酵母菌三株:在in vitro初筛和复筛得到对Alternaria citri有拮抗作用的酵母菌12株。进一步通过in vivo筛选,得到能有效抑制Alternaria citri的拮抗酵母菌株Wf-b-1、γ-60-11和Wm-9。5.测定不同浓度拮抗酵母菌对Alternaria citri的抑制效果:在一定浓度范围内,拮抗酵母菌株Wf-b-1、γ-60-11和Wm-9的抑菌效果均与悬浮液的浓度成正相关。在Alternaria citri浓度为1×10~5 spores/mL,拮抗酵母菌浓度为1×10~8 CFU/mL时,培养8d后,Wf-b-1,γ-60-11和Wm-9控制果实发病率分别为16.49%,20.74%和25.44%。抑制率
分别为55.57%,56.65%和50.48%。6.鉴定拮抗酵母菌:经形态、生理生化指标及rDNA-ITS序列分析对Wf-b-1和Wm-9进行了鉴定。结果表明:Wf-b-1为有孢圆酵母属(Torulaspora)球有孢圆酵母(Torulaspora globosa),Wm-9为汉逊酵母属(Hansenula)葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)。另外,γ-60-11来自于柠檬形克勒克酵母(Kloeckeraapiculata)34-9的诱变菌株。 更多还原
【Abstract】 The pathogen strain Alternaria citri was obtained from the surface of the naturally rotted Citrus.unshiu Marc cv.fruits. The results of morphological testing and rDNA-ITS sequeces analysis showed that the pathogen was Alternaria citri. The infection ways and biological characters of Alternaria black rot disease were studied. Three antagonist strains Wf-b-1,γ-60-11 and Wm-9 exhibited good inhibit effct against postharvest Alternaria black rot of Citrus. The main results are as follows:1. Identifi... 更多还原
【关键词】 柑橘黑腐病； 分离； 鉴定； 侵染规律； 拮抗酵母菌；
【Key words】 Alternaria black rot of Citrus； Screening； Identification； Infection rule； Antagonist yeasts；
柑橘采后生防菌34-9及γ-60-11固体发酵工艺研究
Studies on Solid State Fermentation of Antagonistic Microbia 34-9 and γ-60-11
to Control Postharvest Diseases in Citrus Fruit
【作者】 俎延喜；
【导师】 邓伯勋；
【作者基本信息】 华中农业大学， 果树学， 2008， 硕士
【摘要】 柑橘的采后病害是引起柑橘腐烂的主要原因,常会导致巨大的经济损失,化学杀菌剂是控制柑橘采后病害的主要手段,但长期大量使用化学杀菌剂会对人体健康及环境造成危害,同时也导致柑橘致病菌产生抗药性,从而降低防治效果因此,迫切需要生产一些新的、高效无毒的生物保鲜剂,以逐步取代化学杀菌剂在柑橘上的使用。目前,生防菌多采用液体深层发酵技术,对设备要求高,生产工艺复杂,成本高;而固体发酵采用的原料一般是廉价的农副产品,设备也较液体发酵简单。发酵产品经简单处理即可得到固体菌剂,生产成本低于液体发酵。本试验对柠檬形克勒克酵母菌34-9及其诱变菌株γ-60-11固体发酵培养基配方和发酵条件进行了研究,筛选出适合柠檬形克勒克酵母菌34-9及其诱变菌株γ-60-11固体发酵生产的培养基配方,并对培养基配方进行优化,明确了其发酵工艺条件。为研制有效的生物防治菌剂提供科学依据。主要结果如下:1.研究了菌种特性,确定了最佳种子液浓度以及培养时问:分析了柠檬型克勒克酵母的主要组成成分。研究了34-9和γ-60-11在豆芽汁液体培养基上的生长动态,确定了种子液最佳培养时间,34-9为14h,γ-60-11为16h,种子液浓度均为5×108个/mL。2.筛选出固体发酵的最佳培养基配方:在摇瓶固体发酵基础上,34-9固体培养基配方为麸皮:玉米粉:豆粕=1:4:1,葡萄糖30g/kg,（NH4）2SO49g/kg,KH2PO49g/kg,蛋白胨5g/kg;MgSO4·7HO 2.4 g/kg,ZnSO4·7H2O 0.4 g/kg,CaCl2·2H2O 0.12 g/kg,生物素0.1mg/kg,泛酸钙30mg/kg,核黄素6 mg/kg。γ-60-11固体发酵的培养基配方为麸皮:玉米粉:豆粕=1:3:2;葡萄糖30 g/kg,（NH4）2SO4 9g/kg,NaH2PO4 9g/kg,蛋白胨10g/kg;MgSO4·7H2O 2.4
g/kg,ZnSO4·7H2O 0.4 g/kg,MnSO4·7H2O 0.02g/kg,CaCl2·2H2O 0.12 g/kg,生物素0.1mg/kg,肌醇3 mg/kg,硫胺素6 mg/kg,核黄素0.6mg/kg。3.获得了适宜的摇瓶固体发酵条件:对不同温度、不同发酵时间、不同接种量、不同料水比分别进行了试验,优化了发酵条件。34-9发酵温度为30℃,发酵时间32h,接种量15%,料水比1:1;γ-60-11发酵温度为28℃、发酵时间28h,接种量15%,料水比1:1;研究还表明在一定范圈内,随着接种量的增加,34-9和γ-60-11的生物量明显的提高。4.优化了发酵生产工艺:在发酵罐水平上,优化选择了34-9和γ-60-11的发酵生产工艺。搅拌速度8r/min,正转60s,反转60s,间隔3s;通气流量前12h为1m3/h,12h-36h为1.5m3/h,最后12h为1m3/h。34—9生物量达到4.16×109CFU/g,γ-60-11达到3.75×109CFU/g。 更多还原