发布时间 : 星期二 文章大学仪器分析 实验教案更新完毕开始阅读
(7) K标准工作溶液 吸取5.00mL K贮备标准溶液于100 mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，配成50 mg·L-1。
(8) Na标准工作溶液 吸取10.00mL Na贮备标准溶液于100 mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，配成100 mg·L-1。
(9) 混合酸消化液 HNO3与HClO4以4:1比例混合而成。 (10) 1%HCl溶液 3. 其它
定量滤纸 植物样品 玻璃球
四、操作步骤
植物样品[1]中K，Na含量的测定 1. 样品的预处理
植物样品通常用湿消化法处理成分析试液。准确称取1.000g通过40目筛的干样品，置于锥形瓶中，加入2～3粒玻璃球以防暴沸，瓶口加一曲颈小漏斗，移入10.0 mL三酸混合溶液，在通风橱中于电热板上低温消化40min后，升高温度使HClO4冒白烟分解，此过程2～3min即可完成，见到硫酸回流，即呈现缕状白烟时取下锥形瓶，稍冷后，加20mL左右1%HCl溶液，加热至沸以溶解残渣，趁热用快速滤纸过滤至50mL容量瓶中，用热的1%HCl溶液洗涤沉淀三次，洗至滤液近刻度后加水定容，摇匀。此溶液一般可直接用于测Na，用逐级稀释法稀释100倍后测K。
2. 标准系列溶液的配制
在五个50mL容量瓶中，分别加入1.00mL，2.00mL，3.00mL，4.00mL和5.00mL K，Na混合标准工作溶液“1”，加水稀释至刻度，摇匀。
3. K，Na含量的测定
按使用方法开动仪器并点火，选择适当的灵敏度并用蒸馏水喷雾调零，用标准曲线中浓度最大的溶液调节仪器满刻度。仪器预热10～20 min后，由稀到浓依次测定标准系列溶液和未知试样溶液的发射强度(I)，每个溶液要测定三次，取平均值。
五、数据处理
以浓度为横坐标，K，Na的发射强度为纵坐标，分别绘制K，Na的标准曲线。由未知试样的发射强度求出样品中的K，Na含量（用质量分数表示）。
注释
如果为土壤样品或食物样品可分别按下法测定。
29
1. 土壤样品中水溶性K，Na含量的测定 (1) 土壤样品的预处理
土壤样品通常用浸提法处理。待测溶液中Ca对K的干扰不大，而对Na的干扰较大，可以用Al2(SO4)3抑制钙的激发减少干扰。
称取10g通过1mm筛孔烘干土样放入100 mL带塞的锥形瓶中，加水50mL盖好瓶盖，在振荡机上振荡3min立即过滤，根据具体情况吸取一定体积浸出液，放入50mL容量瓶中，加1mL Al2(SO4)3溶液，定容，摇匀备用。
(2) 标准系列溶液的配制及测定
在九个50mL容量瓶中，分别加入0.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL，12.00mL，16.00mL，20.00mL K，Na混合标准工作溶液“2”，分别加入1mL Al2(SO4)3溶液，定容，各瓶中分别含K为0 mg·L-1，2 mg·L-1，4 mg·L-1，6 mg·L-1，8 mg·L-1，10 mg·L-1，12 mg·L-1，16 mg·L-1，20 mg·L-1，含Na为0 mg·L-1，5 mg·L-1，10 mg·L-1，15 mg·L-1，20 mg·L-1，25 mg·L-1，30 mg·L-1，40 mg·L-1，50 mg·L-1。
仪器预热10～20min后，由稀到浓依次测定标准系列溶液中K，Na的发射强度，每个溶液要测定三次，取平均值。然后在火焰光度计上测定未知液，记录检流计读数，在标准曲线上查出其浓度。
2. 食物样品中K，Na含量的测定
食物样品通常用湿消化法处理成分析试液。 (1) 食物样品的预处理
准确称取均匀样品（0.5～1g干样或1～2g湿样或3～5g饮料）于250 mL高型烧杯中，加20～30 mL混合酸消化液，盖上表面皿，置于电热板或电沙浴上加热消化。如消化不完全，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加几毫升去离子水，加热以除去多余的HNO3。待烧杯中的液体接近2～3mL时，取下冷却。用水洗并转移到10mL刻度试管中，定容至刻度。
取与消化样品相同的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白测定。 (2) 标准系列溶液的配制及测定
吸取0.00 mL，0.50 mL，1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL K标准工作溶液分别置于250 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。将消化样液、试剂空白液、K标准系列溶液分别导入火焰光度计，测定发射强度。
吸取0.00 mL，1.00 mL，2.00 mL，3.00 mL，4.00 mL Na标准工作溶液分别置于100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。将消化样液、试剂空白液、Na标准系列溶液分别导入火焰光度计，测定发射强度。
思考题
30
1. 火焰光度计中的滤光片有什么作用？
2. 如果标准系列溶液浓度范围过大，则标准曲线会弯曲，为什么会有这种情况？
实验十二 荧光光度分析法测定维生素B2
一、目的要求
1. 学习和掌握荧光光度分析法的基本原理和方法
2. 熟悉荧光分光光度计（或荧光光度计）的结构和使用方法
二、实验原理
在紫外光或波长较短的可见光照射后，一些物质会发射出比入射光波长更长
的荧光。以测量荧光强度和波长为基础的分析方法叫做荧光分光光度分析法。 对同一物质而言，若alc<<0.05，即对很稀的溶液，荧光强度F与该物质的浓度c有以下的关系 F=2.3Фf I0 alc
式中：Фf──荧光效率；I0──入射光强度；a──荧光分子的吸收系数； l──试液的吸收光程。
I0和l不变时， F=Kc
式中K为常数。因此，在低浓度的情况下，荧光物质的荧光强度与浓度呈线性关系。
维生素B2（即核黄素）在430～440nm蓝光的照射下，发出绿色荧光，其峰值波长为535nm。维生素B2的荧光在pH=6～7时最强，在pH=11时消失。
荧光分析实验首先选择激发光单色器波长和荧光单色器波长，基本原理是使测量获得最强荧光，且受背景影响较小。激发光谱是选择激发光单色器波长的依据，荧光物质的激发光谱是指在荧光最强的波长处，改变激发光单色器的波长测量荧光强度，用荧光强度对激发光波长作图所得的谱图。大多数情况下，荧光物质的激发光谱与其吸收光谱相同。荧光光谱是选择荧光单色器波长的主要依据，荧光物质的荧光光谱是将激发光单色器波长固定在最大激发光波长处，改变荧光单色器波长测量荧光强度，用荧光强度对荧光波长作图所得的谱图。下图为维生素B2的吸收（激发）光谱及荧光（发射）光谱示意图。
31
10.750.50.250200300400/nm
图 VB2的吸收（激发）光谱及荧光光谱示意图 A──吸收光谱；F──荧光光谱
本实验采用标准曲线法来测定维生素B2的含量。激发光单色器波长选440 nm.荧光单色器波长选535 nm，可将440 nm的激发光及水的拉曼光（360 nm）滤除，从而避免了它们的干扰。
三、实验用品 1. 仪器
国产930型（或其它型号）荧光光度计 容量瓶（50mL，1L） 吸量管（5mL） 棕色试剂瓶（500mL） 2. 药品
(1) 100.0 mg·L-1维生素B2标准贮备液 准确称取0.1000g维生素B2，将其溶解于少量的1%乙酸中，转移至1L容量瓶中，用1%乙酸稀释至刻度，摇匀。
(2) 5.00 mg·L-1维生素B2工作标准溶液 准确移取50.00mL 100.0 mg·L-1维生素B2标准贮备液于1L容量瓶中，用1%乙酸稀释至刻度，摇匀。
(3) 待测液 取市售维生素B2一片，1%乙酸溶液溶解，在1L容量瓶中定容。 以上溶液均应装于棕色试剂瓶中，置于冰箱冷藏保存。
四、操作步骤
AA F 500600 1. 标准系列溶液的配制
在五个干净的50 mL容量瓶中，分别加入1.00mL，2.00mL，3.00mL，4.00mL和5.00mL 5.00 mg·L-1维生素B2工作标准溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 2. 标准系列溶液的测定
32