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（2）氮素营养物质：用作合成细胞物质中含N物质如蛋白质，核酸等的原料，及少数自养细菌的能源物质，常用铵盐，硝酸盐等无机氮源和牛肉膏，蛋白胨等作有机氮源。
（3）矿质营养物质，提供必要的金属元素。这些金属元素在机体中的生理作用有：参与酶的组成，成酶活性中心，维持细胞结构，调节和维持细胞渗透压。常用无机盐有：SO42-，Cl-，PO43-及含K+，Na+，2+2+3+
Mg，Fe，Fe等金属元素的化合物。
（4）生长因素：构成酶的辅酶或辅基，构成酶活性所需成分，构成蛋白质或核酸的组分。常见的有维生素，氨基酸，碱基等。 2.
（1）水是微生物及一切生物细胞中含量最多的成分，活细胞的含水量可达总重量的75%-90%以上。水的生理功能有如下几点：
a：水可以维持细胞的膨压，以维持细胞的正常形态，是细胞的重要组成成分。 b：水是许多营养物质的溶剂，以利营养物质的吸收和废物的排泄。 c：水是一切生理生化反应的介质及一切新陈代谢的介质。 d：水还可作为供氢体参与呼吸作用和光合作用。 （2）水可以调节细胞温度
试验证明:缺水比饥饿更易导致生物死亡。 3.
根据微生物生长所需要的碳源物质的性质和所需能源的不同，将微生物的营养类型分成如下四种：
（1）光能自养型微生物：它们能以CO2作为唯一碳源或主要C源并利用光能进行生长，并能以H2O、H2S等作供H体，将CO2还原成细胞物质，如蓝细菌属此种类型。
（2）光能异养型微生物：这类微生物亦能利用光能将CO2还原为细胞物质，但它们要以有机物作供氢体。红螺菌属此类。
（3）化能自养型微生物：这类微生物以CO2或CO32-作唯一碳源或主要碳源进行生长时，利用电子供体如H2. H2S等无机物氧化时放出的化学能作能源，如氢细菌，亚硝化细菌等。
（4）、化能异养型微生物：大多数微生物属此类型，它们生长的碳源和能源均来自有机物。大肠杆菌即属此类。 4.
基团转位将单糖吸收运输至细胞的过程如下：
热稳定蛋白HPr被PEP活化（磷酸化），由酶1完成。 热稳定蛋白将活化的磷酸基团转移给酶3。
细胞膜上的酶2将葡萄糖由外膜转运至内膜，该糖分子立即被活化的酶3磷酸化。 在这一过程中，糖分子一方面由膜外到达膜内，并同时实现磷酸化。 5.
微生物在生长繁殖和积累代谢产物的过程中，培养基的pH会发生如下变化： （1）如微生物在含糖基质上生长，会产酸而使pH下降。
（2）微生物在分解蛋白质和氨基酸时，会产NH3而使pH上升。 （3）以（NH4）2SO4作N源，会过剩SO42-，而使pH下降。
+
（4）分解利用阳离子化合物如：NaNO3，会过剩Na而使pH上升。
为了维持培养基pH值的相对恒定，常常在培养基中加入缓冲物质如磷酸盐，碳酸盐等，以缓和pH的剧烈变化。 6.
（1）该培养基的C素来源和能量来源均来自甘露醇。
（2）该培养基未提供氮素来源，根据所学知识，只有能固氮的微生物才能在无氮培养基上生长。 （3）该培养基的矿质营养物质包括：Mg2+，K+，Cu2+，Na+，PO43-，SO42-
（4）HPO42-，PO43-，CaCO3主要用来作缓冲物质调节培养基的pH值，以保持pH不变。 据此我们可推知该培养基可用于培养自生固氮菌等微生物。 五、设计题
根据题意要求：我们的设计如下：
土壤中能分解纤维素的微生物，既有细菌，又有真菌，我们以纤维素分解细菌的分离为例说明： （1）考虑到碳素营养物质要求，我们可以选纤维素作唯一碳源，一是为纤维素分解菌作碳源和能源，二是只能使纤维素分解菌生长而其它细菌不生长，起到选择培养作用。
（2）根据一般微生物要求，除需碳源和能源物质外，还需氮源及其它矿质营养，生长因素。N源可用（NH4）2SO4，生长因素可用酵母膏，矿质用K2HPO4. MgSO4. NaCl等。
（3）为了维持培养基的pH值恒定，可在培养基中加入CaCO3
所以，按以上分析并结合一般培养基的配制经验，我们设计出分离纤维素分解菌培养基配方如下： 纤维素，（NH4）2SO4，K2HPO4，MgSO4，NaCl，CaCO3，酵母膏，水，pH中性。
微生物的生长及其控制
一、选择题
1-5 DBBAB； 6-10 AAABB； 11-12 BC 二、填空题
1. 专性嗜冷，兼性嗜冷 2. 室温，体温 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32.
6.5-7.5 7.5-8.0 5-6．
98kpa，121℃，30min。 中
前者杀死微生物的营养体，后者杀死所有微生物的细胞，包括细菌的芽孢 低温型，中温型，高温型 孢子，菌种干燥保藏 烘干，晒干，熏干
发生质壁分离，吸水膨胀甚至破裂
滞留适应期，对数生长期，最高稳定生长期，衰亡期 对数生长 连续培养法 最高稳定 好氧，厌氧 20-25
62-63℃，30min或71℃，15min 5℃，25-37℃，45-50℃。
-12℃，5-15℃，15-20℃，海洋深处、雪山等地 中温型的 中温型的
化学吸氧法，密闭容器内反复抽真空后充N2 10-15℃，25-37℃，45-50℃ 恒浊法，恒化法
好氧，兼性厌氧，厌氧，微好氧，耐氧 乳酸菌，乳酸，腐生细菌
低温防腐，加无毒的化学防腐剂，干燥防腐，利用微生物产酸防腐
是细胞的组分，是生化反应的介质，是吸收营养物质和分泌代谢物的良好溶剂，能有效地控制细胞温度 25-30% 苯甲酸钠
三、名词解释
1. 微生物细胞在合适的外界环境下，吸收营养物质，进行新陈代谢，当同化作用大于异化作用时，2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19.
生命个体的重量和体积不断增大的过程。
生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。
采用物理或者化学的方法使微生物处于比较一致的生长发育阶段上的培养方法叫同步培养。例如利用孔径大小不同的滤膜，将大小不同的细胞分开培养，可使同一大小的细胞处于同一生长阶段。 细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量，以培养时间为横座标，以菌数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。 单个细胞完成一次分裂所需的时间。
将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获，此称为分批培养。
细菌纯培养生长曲线表明，细菌培养物的最高得率在对数生长期。通过控制环境条件，使细菌的生长始终保持在对数生长期，从而可以获得更多的细菌培养物，这种方法称为连续培养。 在有氧无氧条件下均能生长的细菌。 指在空气或氧气存在下生长的微生物。 在没有空气或氧气条件下生活的微生物。
采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
采用较温和的理化因素，金杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物的有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。
就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。
是利用具有高度选择毒力即对病原菌具高度毒力而对宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该宿主传染病的一种措施。
在一定条件下，某化学药剂抑制特定微生物的最低浓度。这是评价某化学药物药效强弱的指标。 在一定条件下，某化学药剂能杀死50％实验动物时的剂量。这是评价某药物毒性强弱的指标。 在一定条件下，某化学药物能引起试验动物群体100％死亡率的最低剂量。这是评价药物毒性的另一指标。
只在某一温度下，杀死某微生物的水悬浮液群体所需的最短时间。
指在一定时间内（一般为10min），杀死某微生物水悬浮液群体所需的最低温度。
四、问答题 1.
温度对微生物的影响可概括为：
1) 适宜的温度有利于微生物的生长；
2) 高温可使菌体蛋白变性，导致微生物死亡，常用高温进行消毒灭菌； 3) 低温对微生物具有抑制或杀伤作用，故低温用于保藏食品 2.
细菌的纯培养生长曲线分为四个时期，即滞留期，对数生长期，最高稳定生长期和衰亡期。 1) 滞留期的特点是：分裂迟缓，代谢活跃。 2) 对数生长期的特点是：细菌数量以几何级数增加。
3) 最高稳定生长期的特点是：新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等。 4) 衰亡期的特点是；活菌数按几何级数下降。 3.
灭菌是杀死所有微生物；消毒是杀死或消除所有病原微生物，达到防止病原菌传播的目的；防腐是利用理化因子使微生物暂不生长；化疗是有效地消除宿主体内的微生物。 4.
取载玻片一块，用蜡笔在中央画出一平方厘米的面积。将待测样品稀释到一定浓度后取0.01毫升菌液滴在载玻片上的一平方厘米面积上。然后在显微镜下计数每个视野的菌数（至少数10个视野，计算平均菌数）。将视野的面积算出来后，按下列公式计算样品中的含菌数。
1cm2
每克样品中的含菌数＝----------?每个视野的平均菌数?100?稀释倍数
视野面积
5.
干重法主要用来测发酵液中丝状真菌或放线菌的生长量。
取一定量的发酵液（如100毫升）过滤后连同滤纸一道烘干至恒重后称重，然后再减去滤纸的干重，即为100毫升发酵液中某种微生物干物质的量。 6.
用比浊法测定微生物的数量主要是在工业生产中采用，它的特点是快速。在测定前首先必需绘制出浊度与数量的相关曲线，浊度用光电比色计测定，菌数靠用稀释平板法测定或用计数板测定。曲线绘好后，在生产中，只要用比色计测出菌液的任一浊度后就可以从曲线上查出相应的菌数。
7.
菌种：繁殖速度较快的菌种的延迟期一般较短；
接种物菌龄：用对数生长期的菌种接种时，其延迟期较短，甚至检查不到延迟期； 3) 接种量：一般来说，接种量增大可缩短甚至消除延迟期（发酵工业上一般采用1/10的接种量）； 4) 培养基成分：在营养成分丰富的天然培养基上生长的延滞期比在合成培养基上生长时短；接种后培养基成分有较大变化时，会使延滞期加长，所以发酵工业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基接近。
1) 2)
8.
1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同； 2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短
3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比， 4）温度，在一定范围，生长速率与培养温度呈正相关。 9.
将待灭菌的物件放置在乘有适量水的高压灭菌锅内，盖上锅盖，并打开排气阀，通过加热煮沸，让蒸气驱尽锅内原有的空气，然后关闭锅盖上的阀门，在继续加热，是锅内的蒸气压逐渐上升，随之温度也相应上升至100℃以上。一般要求温度达到121℃，时间维持15-20min。 10.
⑴菌种；（2）菌体数量；（3）灭菌锅内空气排除程度；（4）灭菌物体的pH值；（5）灭菌对象的体积；（6）加热与散热的速度。 11.
为了防止微生物在培养过程中因自身的代谢作用产酸或产碱改变环境的pH值，通常在配制培养基时预先加入缓冲物质如磷酸盐或碳酸钙。 12.
在t0时菌数X=100
在t1时菌数Y=1000000000
n（代数）=3.32g（y/x）=3.3（lg109-lg102）=3.3×7=23.1 代时G=（400-0）÷23.1=17.3
上述培养中，该菌的代时为17.3分钟，400分钟内共繁殖了23.1代。
13.
（1）细胞质膜透性改变，使抗生素不进入细胞；
（2）通过主动外排系统把进入细胞内的药物主动排出细胞外； （3）把药物作用的靶位加以修饰和改变； （4）产生一种能使药物失去活性的酶；
（5）形成“救护途径”，通过被药物的代谢途径发生变异，而变为仍能合成原产物的新途径。
微生物代谢
一、选择题：
1-5 AABBA； 6-10 BACAA； 11-14 ACCB