发布时间 : 星期四 文章湖南农业大学生物化学-03-蛋白质化学-05蛋白质的理化性质 - PDF转换成word转换器 - 图文更新完毕开始阅读
二、蛋白质分离、纯化方法
蛋白质分离纯化的方法，是以目的蛋白质与杂蛋白或其他杂 质成分在溶液中下列性质的差异为原理的：
1、分子大小 2、溶解度 3、带电荷性质 4、吸附性质
5、对配体分子的生物学亲和力
1、根据分子大小不同的纯化方法
1）透析和超（过）滤 2）密度梯度（区带）离心 3）凝胶过滤
1）透析和超（过）滤
透析（ dialysis）：利用蛋白质分子不能通 过半透膜的性质，使蛋白质和其它小分子 物质如无机盐、单糖等分开。
常用的半透膜是玻璃纸（赛璐玢纸）、 火棉纸（赛璐琔纸）以及其它改进型的纤 维素材料。
透析袋 透析液 搅拌子 磁力搅拌器
透析装置示意图
超过滤（ultrafiltration）：利用压力或者离 心力，强行使水和其它小分子溶质通过半 透膜，而蛋白质被截留在膜上，以达到浓 缩和脱盐的目的。
滤膜
离 心
2）密度梯度（区带）离心
蛋白质颗粒的沉降，不仅决定于 其大小，而且取决于其密度。 蛋白质颗粒在具有密度梯度的介 质中离心时，质量和密度大的颗粒比 小的颗粒沉降得快，并且每种蛋白质 颗粒沉降到与自身的密度相等的介质 密度梯度时，即停止不动，最后，各 种蛋白质在离心管中被分离成各自独 立的区带。
分成区带的蛋白质可以在管底刺 一个小孔逐滴放出，分部收集。
滴加样品
4% 8%
离 心 管
12% 16% 20%
蔗 糖 浓 度
蔗糖密度梯度