发布时间 : 星期一 文章黄酮类化合物研究进展_论文更新完毕开始阅读
取能力强、容易达到临界条件的SCF萃取剂，并应考虑其毒性、腐蚀性及是否易燃易爆物等因素，最常用的超临界流体为CO2。应用CO2-SPE，技术提取分离黄酮类物质，具有萃取速度快，效率高，操作简单等特点，产品中没有残留有机溶剂，与传统的萃取分离工艺相比优势是明显的。孙婷[15]利用超临界CO2萃取法从银杏叶中提取黄酮类化合物，确定了超临界流体萃取的最佳条件：压力为20MPa，萃取罐的温度为40℃，流量为14mL/min，萃取时间为2h，在此条件下测得总黄酮的含量为29.1%，相对标准偏差为3.1%。游海等人[16]在提取银杏叶中的黄酮类化合物药用活性成分的实验中，确定了实验最佳条件：萃取压力12665.6kPa，萃取温度为45℃，萃取时间为30min-45min，分离压力为6586.1kPa，其中黄酮含量达28%以上。
3.6 超声波提取法
超声波提取法是另一种外加物理场的方法，是指以超声波辐射压强产生的空化效应和热效应引起机械搅拌、加速扩散溶解的一种新型提取方法。超声波具有特殊的生物效应，选择适当的超声参数可以使植物细胞的细胞壁间形成较多的小孔，从而可以增强细胞膜的透性和选择性，是近年来应用到中草药有效成分提取分离中的一种提取手段。该方法是目前比较先进的方法，它能大大缩短提取时间，一般不超过1h，提高有效成分的提出率、原料的利用率。阳文斌等[17]用超声波法提取了花生壳总黄酮，测得样品中总黄酮的含量C=0.5937mg/ml，回收率10.11％，其纯度和产率均较高。杨喜花[18]等还研究了超声循环方法提取沙棘叶的总黄酮，超声循环技术是在料液循环流动的过程中施加超声波，这种改进方法的提取效果远高于普通超声法。潘慧娟等[19]用超声波法提取苦丁茶中总黄酮，考察了时间对提取效果的影响，认为此法操作简单、提取时间短、效果好。黄锁义[20]用超声波
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法提取洋葱中总黄酮，认为超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高。刘峥[21]等采用超声波法从银杏中提取总黄酮，用均匀设计法确定了超声波提取的最佳工艺条件。
3.7 酶解法
最近几年，利用酶的特性发展了新的提取方法。酶解法利用酶反应的高度专一性，破坏细胞壁，使其中的黄酮类化合物释放出来，适用于被细胞壁包围的黄酮类物质。植物细胞壁的主要成分是纤维素，恰当地利用纤维素酶处理，可使细胞壁发生不同程度的改变，如软化、膨胀和崩溃等，从而可改变细胞壁的通透性，提高黄酮类化合物的提取率。黄剑波等[22]采用甜茶作材料，采用纤维素酶辅助的方法，从中提取黄酮类化合物。首先，确定纤维素酶的最佳作用效果，然后通过单因素实验，得出酶法辅助的最佳提取工艺为：水做溶剂，先用40℃下茶粉质量3％的纤维素酶作用15min，再在80℃下浸提1h，固液比为1:30，试验结果表明：黄酮类物质的提取率为91％，提取纯度为54％。
3.8 半仿生提取技术
半仿生提取法是将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服给药后药物经胃肠道转运的环境，为经消化道给药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。这种提取方法的特点是可以提取和保留更多的有效成分，能缩短生产周期、降低成本。陈晓娟等[23]通过正交试验优选半仿生法提取杜仲叶中绿原酸和黄酮的工艺条件为：杜仲叶为原料，以磷酸氢二钠一柠檬酸的缓冲溶液作为提取液，每次提取1h，提取3次，在此条件下，黄酮得率达0.44％。半仿生提取对于复方相对有效，不但在一定程度上促进有效成分的溶出，而且还有利于制剂和使用，但
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单一组分不一定最佳。
总之，黄酮类化合物提取的方法很多，每种方法都有其优缺点，应根据提取物的性质、提取成本、工艺设备等条件来选择最适合的提取工艺，提高黄酮类物质的提取率，降低生产成本，增大原料的利用效果。近年来，随着研究方法和技术的不断提高，又发现了黄酮许多新的种类和生理作用，特别是抗自由基等方面的作用。可见，通过高新技术和生产工艺提取黄酮类化合物，并将其应用到医药品、化妆品、食品等领域，必将有着广阔的应用前景。
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4 黄酮类化合物的分离纯化
由于黄酮化合物的性质不同，其分离原理有：(1) 酸性强弱不同，利用pH梯度萃取进行分离；(2)极性大小不同，利用吸附能力或分配原理进行分离；(3)分子大小不同，利用葡聚糖凝胶分子筛进行分离等。 4.1 pH梯度萃取
pH梯度萃取适合分离酸性强弱不同的游离黄酮类化合物。将混合物溶于有机溶剂(如乙醚)，依次用5%碳酸氢钠(萃取7,4′-二羟基黄酮)、5%的碳酸钠(萃取7-羟基黄酮或4′-羟基黄酮)、0.2%氢氧化钠(萃取一般酚羟基黄酮)、4%氢氧化钠(萃取5-羟基黄酮)萃取而使其分离[24]。
4.2 高速逆流色谱分离法
高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography．HSCCC)是20世纪80年代初出现的。HSCCC的原理是利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相怍为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量的固定相，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现。与其他各种色谱分离技术的根本差别在于，HSCCC不采用任何固态的支撑体(如柱填料、吸附剂、亲和剂、板床、筛膜等)，因此完全排除了因不可逆吸附而引起的样品污染、变性、失活等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品也能反映其本来的特性，特别适合于天然产物活性成分的分离、纯化。高速逆流色谱分离法(HSCCC)是一种新的分离技术。其具有两大突出特点：(1)线圈中固定相不需要载体，因而清除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象；(2)特别运用于制备性分离，每次进样体积较大，进样量也较多。Min Gao[25]等采
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