发布时间 : 星期二 文章同型半胱氨酸测定试剂注册技术审查指导原则(附件3)更新完毕开始阅读
对病人标本测定结果基本相符，对同一份临床样本的医学解释，拟申报试剂与对比方法相比不会产生差异结果。
在实施方法学比对前，应分别对拟申报试剂和比对试剂进行初步评估，只有在确认两者都分别符合各自相关的质量标准后方可进行方法学比对。方法学比对时应注意质量控制、样本类型、浓度分布范围并对结果进行合理的统计学分析。
2.空白吸光度
用试剂在说明书规定参数下测试指定空白样本，记录测试反应完成后的吸光度值（A），测试结果即为试剂空白吸光度测定值。
注：空白样本可以是纯水、生理盐水、零校准液等。 3.空白吸光度变化率（如适用）
用试剂测试指定空白样本，记录在试剂规定参数下的吸光度差值，空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于企业规定值。
4.分析灵敏度
用试剂测试同型半胱氨酸已知浓度在（5—15）μmol/L的样本，记录在试剂规定参数下的吸光度差值。
（1）对于终点法测试的试剂，10.0μmol/L样本的吸光度变化（ΔA）应不小于0.02。
（2）对于速率法测试的试剂，10.0μmol/L样本的吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.01。
5.重复性
测量批内精密度的评估应包括两个浓度水平的样本进行，两个浓度都应在试剂盒的测量范围内，通常选用该检测指标的参考区间附近和异常样本，建议采用人源样本或与人源样本基质接近的样本进行试验。选择重复测试浓度为（10.0±2.0）μmol/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于5%，（20.0±4.0）μmol/L
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的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于3%。
6.批间差
用3个不同批号的试剂分别测试（10.0±2.0）μmol/L的样本，每个批号测试3次，分别计算每批3次测定的均值，计算相对极差。
7.线性
建立试剂线性范围所用的样本基质应与临床实际检测的样本相似，理想的样本为分析物浓度达到预期测定上限的混合人血清（或其他人源样本），制备低浓度样本时应充分考虑稀释对样本基质的影响，建议稀释液尽量采用阴性血清。建立线性范围时，需在预期测定范围内选择7—11个浓度水平。例如，将预期测定范围加宽至130%，在此范围内选择更多的浓度水平，然后依据试验结果逐渐减少数据点（最终不得少于7个水平）直至表现出线性关系，可发现最宽的线性范围。验证线性范围时可选择5—7个浓度水平。
超出线性范围的样本如需稀释后测定，应做相关研究，明确稀释液类型及最大可稀释倍数，研究过程应注意基质效应影响，必要时应提供基质效应研究有关的资料。
8.干扰试验
考察样本中常见干扰物质对检测结果的影响，如胆红素、血红蛋白、甘油三酯；同时根据不同检验原理选择特异性干扰物质（如血氨、S-腺苷蛋氨酸、抗坏血酸、谷胱甘肽等）进行检测。干扰物浓度的分布应覆盖人体生理及病理状态下可能出现的物质浓度。方法为对模拟添加干扰物的样本分别进行验证，样本量选择应体现一定的统计学意义，说明样本的制备方法及干扰试验的评价标准，确定可接受的干扰物质极限浓度。待评价同型半胱氨酸样本浓度应至少包含临近医学决定水平（或正常参考区间上限）。
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药物干扰的研究可根据需要由申请人选择是否进行或选择何种药物及其浓度进行。
9.校准品、质控品赋值（如适用）
（1）应参照GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供企业（工作）校准品及试剂盒配套校准品赋值及不确定度计算记录，提供质控品定值及其靶值范围确定的记录。
（2）均一性
取同批号的一定数量最小包装单元的校准品、质控品，每包装单元测试1次，按下面的公式计算测试结果的平均值（X1）和标准差S1；另用一个上述校准品最小包装单元连续测试相同次数，计算测试结果的平均值（X2）和标准差S2；按下列各公式计算瓶间重复性CV%，所有参数的瓶间重复性结果均应符合要求。
公式 1 公式 2 公式 3 公式 4 式中：
XnX??xi?1in
2iS??X?(?Xi)2nn?122
S瓶间?S1?S2
CV瓶间(%)?S瓶间/X1?100
当S1 — 7 —— S----标准差； n----测量次数； xi----指定参数第i次测量值。 10.其他需注意问题 对于适用多个机型的产品，应提供如产品说明书【适用机型】项中所列的所有型号仪器的性能评估资料。 如有多个包装规格，需要对不同包装规格之间的差异进行分析或验证，如不同包装规格产品间存在性能差异，需要提交采用每个包装规格产品的分析性能评估。如不同包装规格之间不存在性能差异，需要提交包装规格之间不存在性能差异的详细说明，具体说明不同包装规格之间的差别及可能产生的影响。 试剂盒的样本类型如包括血清和血浆样本，则应对二者进行相关性研究以确认二者检测结果是否完全一致或存在某种相关性（如系数关系）。对于血浆样本，申请人应对不同的抗凝剂进行研究以确认最适的抗凝条件以及是否会干扰检测结果。 （五）参考区间确定资料 应提交验证参考区间所采用样本来源、详细的试验资料、统计方法等。 应明确参考人群的纳入、排除标准，研究表明同型半胱氨酸与性别、年龄具有一定相关性，建议厂家根据临床需要，必要时对不同性别、不同年龄（或选择特定年龄段）进行考察，研究例数均应符合统计学要求。 若引用针对中国人群参考区间研究的相关文献，应明确说明出处，并进行验证。研究结果应在说明书【参考区间】项中进行相应说明。 （六）稳定性研究资料 稳定性研究主要包括效期稳定性、热稳定性、运输稳定性、 —— 8 —