华中农业大学生物化学本科试题库2-16章 联系客服

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所以n=

log81log[S][S]0.90.1=

1.91log10?1.91

B.根据其Hill系数?1,此酶属于具有正协同效应的别构酶。 7.(1)3.1×10mol (2)5×10mol (3)622秒 8.80%,1500倍 9.根据米一曼氏方程?=?7

Vmax[S]Km-5

-8

-1

?[S]得知,

?7

当Km值(10为10

?2

mol?L)远小于[S](10

?3

?1

mol?L)时,Km值可略去不计,因此,此时的初速度实际上就是Vmax=10

mol?min。在[S]

mol?L和10

?7?8

mol?L,与Km比较,也可相对地忽略,则?=Vmax。[S]=10mol?L时,代入上式得?=Vmax?2=5?10mol?min。

第5章 核酸化学单元自测题

(一) 名词解释

1.核酸, 2.核酸一级结构,3.DNA二级结构,4.碱基互补规律,5.稀有碱基、稀有核苷酸,6.环化核苷酸,7.多磷酸核苷酸,8.增色效应,9.减色效应,10.发卡结构

11.分子杂交,12.Tm值,13. 回文序列,14. 同裂酶,15. 限制性物理图谱

(二)填空题

1.核酸可分为 和 两大类,其中 主要存在于 中,而 主要存在于 。

2.核酸完全水解生成的产物有 、 和 , 其中糖基有 ,碱基有 和 两大类。 3.生物体内的嘌呤碱主要有二种, 和 ,嘧啶碱主要有 、

和 ,某些RNA分子中还含有微量的其它碱基,称为 。

4.DNA和RNA分子在物质组成上有所不同,主要表现在 和 的不同,DNA分子中存在的是 和 ,

RNA分子中存在的是 和 。

5.RNA的基本组成单位是 、 、 、 ,DNA的基本组成单位是 、 、 、 ,它

们通过 键相互连接形成多核苷酸链。

6.DNA的二级结构是 结构,其中碱基组成的共同特点是(若按摩尔数计算) 、 、 。 7.测知某一DNA样品中,A=0.53mol,C=0.25mol、那么T= mol,G= mol。

8.嘌呤环上的第 位氮原子与戊糖的第 位碳原子相连形成 键,通过这种键相连而成的化合物叫 。 9.嘧啶环上的第 位氮原子与戊糖的第 位碳原子相连形成 键,通过这种键相连而成的化合物叫 。 10. 有两个主要的环核苷酸是 、 ,它们的主要生理功用是 。 11.写出下列核苷酸符号的中文名称:ATP 、dCDP 。 12. DNA的Tm值的大小与其分子中所含的 的种类、数量及比例有关,也与分子的 、有关。若含的A—T配对较

多其值则 、含的G—C配对较多其值则 ,分子越长其Tm值也越 。 13.组成核酸的元素有 、 、 、 、 等,其中 的含量比较稳定,约占核酸总量的 ,

可通过测定 的含量来计算样品中核酸的含量。 14.DNA双螺旋结构的维系力主要有 和 。

15. DNA分子中G,C含量高分子较稳定,同时比重也较 、解链温度也 。 16.RNA主要有三类,既 、 和 、它们的生物功能分别是 、

和 。 17.RNA的二级结构大多数是以单股 的形式存在,但也可局部盘曲形成 结构,典型的tRNA二级结构是 型

结构。

18.在生物细胞中主要有三种RNA,其中含量最多的是 、种类最多的是 、含有稀有碱基最多的是 。 19. tRNA三叶草型结构中,氨基酸臂的功能是 ,反密码环的功能是 。

20. tRNA氨基酸臂3’末端中最后三个碱基是 ,反密码环中有三个相连的单核苷酸组成 。 21. 成熟的mRNA在5’末端加上了 构成帽的结构,在3’末端加上了 形成尾巴。

22.Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在20~40KDa,通常由 亚基所组成。它们的作用底物为双链DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链DNA,或DNA/RNA杂合双链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有 专一性,也具有 专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有 ,产生 或 的DNA片段。作用时需要 作辅助因子,但不需要 和 。

23. 完全的回文序列具有两个基本的特点,就是:(1) (2) 。 24.SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂,它有四个作用: (1) ; (2) ;

25

(3) ; (4) 。

25.酚是蛋白变性剂,用酚抽提细胞DNA时,具有两方面的作用:(1) ;

(2) 。

26.用酚—氯仿抽提DNA时,通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇。这是因为异戊醇 。

另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。 27.同其他水解蛋白酶相比,蛋白水解酶K具有两个显著的优点:

(1) ;(2) 。

28.在分离DNA时要使用金属离子螯合剂,如EDTA和柠檬酸钠等,其目的是 。

29.用乙醇沉淀DNA时,通常要在DNA溶液中加入单价的阳离子,如NaCl和NaAc,其目的是 。 30.浓缩DNA的方法有:(1) ;(2) ;(3) ; (4) 。 31. 通常可在三种温度下保存DNA:4~5℃、-20℃、-70℃,其中以 最好。 32.在用SDS分离DNA时,要注意SDS的浓度,0.1%和1%的SDS的作用效果是不同的,前者 ,后者 。 33.在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素很多,主要有(1) ;(2) ;

(3) 。

34.在分离DNA时,常用 法、 法、 法及 法等方法去除蛋白质。 35.在DNA保存液中,常加一滴氯仿,主要是起 作用。

36.在简并引物的设计中,常常要用到dI(次黄嘌呤),原因是 。 37.在分离DNA时,要戴手套操作,原因是 。

38.简并引物PCR主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计 引物来合成相应的基因。 39.SSC是由NaCI和柠檬酸钠组成的试剂,其中NaCl的作用是使 ,而柠檬酸钠的作用是 。 40.在重蒸酚中加入0.1%的8—羟基喹啉及少量β—巯基乙醇,不仅可以防止酚的氧化,还可以 的活性及 作用。

(三)选择题

1.在核酸中一般不含有的元素是:

A 碳 B 氢 C 氧 D 硫 2.腺嘌呤(A)与鸟嘌呤(G)在结构上的差别是:

A A的C6上有羟基,G的C6上有氨基B A的C6上有氨基,G的C2上有氨基 C A的C6上有甲基,G的C6上有羰基 D A的C6上有氨基,G的C2上有羰基 3.胸腺嘧啶(T)与尿密啶(U)在结构上的差别是:

A T的C2上有氨基,U的C2上有氧B T的C5上有甲基,U的C5上无甲基 C T的C4上有氧,U的C4上有氧D T的C2上有氧,U的C2上有氧 4.通常即不见于DNA又不见于RNA的碱基是:

A 腺嘌呤 B 黄嘌呤 C 鸟嘌呤 D 胸腺嘧啶 5.下列哪种碱基只存在于mRNA而不存在于DNA中?

A 腺嘌呤 B 尿嘧啶 C 鸟嘌呤 D 胞嘧啶 6.DNA与RNA完全水解后,其产物的特点是:

A 戊糖不同、碱基部分不同 B 戊糖不同、碱基完全相同 C 戊糖相同、碱基完全相同 D 戊糖相同、碱基部分不同 7.在核酸分子中核苷酸之间的连接方式是:

A 3′,3′,-磷酸二酯键 B 糖苷键 C 3′,5′-磷酸二酯键 D 肽键 8.核酸的紫外吸收是由哪一结构所产生的?

A 嘌呤和嘧啶之间的氢键 B 碱基和戊糖之间的糖苷键 C 戊糖和磷酸之间的酯键 D 嘌呤和嘧啶环上的共轭双键 9.含有稀有碱基比例较多的核酸是:

A mRNA B DNA C tRNA D rRNA 10.核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是:

A 核苷 B 戊糖 C 磷酸 D 碱基序列 11.假尿苷的糖苷键是:

A C—C B C—N C N—N D C—H

12. 在核苷酸分子中戊糖(R)、碱基(N)和磷酸(P)的连接关系是:

A N—R—P B N—P—R C P—N—R D R—N—P 13.DNA的二级结构是指:

A α—螺旋 B β—片层 C β—转角 D 双螺旋结构 14.下列关于核苷酸生理功能的叙述,错误的是:

A 作为生物界最主要的直接供能物质B 作为辅酶的组成成分 C 作为质膜的基本结构成分D 作为生理调节物质 15.ATP的生理功能不包括:

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A 为生物反应供能 B 合成RNA C 贮存化学能 D 合成DNA

16.关于DNA双螺旋结构学说的叙述,哪一项是错误的?

A 由两条反向平行的DNA链组成B 碱基具有严格的配对关系

C 戊糖和磷酸组成的骨架在外侧D 生物细胞中所有DNA--级结构都是右手螺旋 17.下列哪种核酸的二级结构具有“三叶草”型?

A mRNA B 质粒DNA C tRNA D 线粒体DNA 18. 下列复合物中除哪个外,均是核酸与蛋白质组成的复合物

A 核糖体 B 病毒

C 端粒酶 D 核酶(ribozyme) 19.真核细胞染色质的基本结构单位是:

A 组蛋白 B 核心颗粒 C 核小体 D 超螺旋管 20.不参与核小体核心颗粒的蛋白质是:

A H1 B H2A C H2B D H3 21.核酸的一级结构实质上就是:

A 多核苷酸链中的碱基排列顺序B 多核苷酸链中的碱基配对关系 C 多核苷酸链中的碱基比例关系D 多核苷酸链的盘绕、折叠方式 22.DNA变性是指:

A 多核苷酸链解聚

B DNA分子由超螺旋变为双螺旋 C 分子中磷酸二酯键断裂 D 碱基间氢键断裂 23. 双链DNA热变性后

A 黏度下降 B 沉降系数下降 C 浮力密度下降 D 紫外吸收下降

24. DNA Tm值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致?

A G+A B C+G C A+T D C+T 25. 核酸变性后可发生下列哪种变化?

A 减色效应 B 增色效应

C 紫外吸收能力丧失 D 溶液粘度增加

26.在下列进行DNA部分酶切的条件中,控制那一项最好? A 反应时间 B 酶量

C 反应体积 D 酶反应的温度

27.对DNA片段作物理图谱分析,需要用

A 核酸外切酶 B 限制性内切酶 C DNA连接酶 D DNA聚合酶I 28.从细胞或组织中分离DNA时,常用蔗糖溶液,目的是: A 抑制核酸酶的活性B 保护DNA,防止断裂 C 加速蛋白质变性 D 有利于细胞破碎 29.关于cDNA的最正确的说法是:

A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确 30. RNA经NaOH水解,其产物是

A 5'-核苷酸 B 2'-核苷酸

C 3'-核苷酸 D 2'-核苷酸和3'-核苷酸的混合物

31.用碱法分离质粒DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,是因为: A 染色体DNA断成了碎片 B 染色体DNA分子量大,而不能释放 C 染色体变性后来不及复性 D 染色体未同蛋白质分开而沉淀

32.Clark做了一个有趣的实验,发现Taq DNA聚合酶可以不需要模板,在双链DNA的末端加一个碱基,主要是加 A dGTP B dATP C dCTP D dTTP

33.在简并引物的3′端尽量使用具有简并密码的氨基酸,这是因为 A Taq酶具有一定的不精确性 B 便于排除错误碱基的掺人 C 易于退火 D 易于重组连接 34.Southern印迹的DNA探针杂交。

A 只与完全相同的片段 B 可与任何含有相同序列的DNA片段

C 可与任何含有互补序列的DNA片段 D 可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段 35.下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?

A 用限制酶消化DNA B DNA与载体的连接

C 用凝胶电泳分离DNA片段 D DNA片段转移至硝酸纤维素膜上

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(四)是非题

1. 核苷中碱基和戊糖的连接一般为C-C糖苷键。

2.在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先熔解分开。

3.RNA的局部螺旋区中,两条链之间的方向也是反向平行的。

4.不同来源DNA单链,在一定条件下能进行分子杂交是由于它们有共同的碱基组成。 5.核酸变性时紫外吸收值明显增加。

6.Tm值高的DNA,(A+T)百分含量也高。

7.用二苯胺法测定DNA,必须用同源的DNA作为标准样。 8.双链DNA中,嘌呤碱基含量总是等于嘧啶碱基含量。 9.真核细胞中DNA只存在于细胞核中。

10.在体内存在的DNA都是以Watson—Crick提出的双螺旋结构形式存在的。 11.在一个生物个体不同组织中的DNA,其碱基组成不同。 12.原核细胞DNA是环状的,真核细胞中的DNA全是线状的。

13.某物质的水解产物对260nm的紫外光有强吸收,地衣酚及二苯胺试验阴性,可以断定此物质为非核酸物质。 14.真核mRNA分子5'末端有一个PolyA结构。 15.DNA分子中含有大量的稀有碱基。 16.tRNA分子中含有较多的稀有碱基。

17.mRNA是人体细胞RNA中含量最高的一种,因为它与遗传有关。 18.DNA只存在于细胞(真核与原核)中,病毒体内无DNA。 19.线粒体中也存在一定量的DNA。

20.自然界中只存在右旋的DNA双螺旋。 21.碱基配对发生在嘧啶碱与嘌呤碱之间。

22.DNA双螺旋结构中,由氢键连接的碱基对形成一种近似平面的结构。 23.DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的。

24.RNA的分子组成中,通常A不等于U,G不等于C。

25.tRNA二级结构中,所有核苷酸只形成三个环、氨基酸臂、附加环和配对的碱基。

26.DNA—蛋白质在低盐溶液中溶解度较小,而RNA—蛋白质在低盐溶液中溶解度大。所以可利用此差别来分离这两种核

蛋白。

27.在酸性条件下,DNA分子上的嘌呤碱基不稳定,易被水解下来。 28. 核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。

29. 生物体内存在的游离核苷酸多为5'-核苷酸。 30. Z型DNA与B型DNA可以相互转变。

31.mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。

32. 在所有病毒中,迄今为止还没有发现既含有RNA又含有DNA的病毒。 33.基因表达的最终产物都是蛋白质。

34. 两个核酸样品A和B,如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280,那么A的纯度大于B的纯度。 35. 限制与修饰现象是宿主的一种保护体系,它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制实现的。 36.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌,其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。

37.限制性图谱与限制性片段长度多态性(RFLP)图谱的最显著的区别在于前者是一个物理图谱而后者是一个连锁图。 38.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA,又能作用于单链DNA。 39. 甘油会使许多限制内切核酸的特异性发生改变,是导致一些酶的星活性的主要原因之一,防止的办法是在酶切反应体系中,将甘油的浓度控制在5%以下。

40. 同一内切核酸酶切割靶DNA,得到的片段端都是相同的。 41. 所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。

42.如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA加了一倍,那么,10个循环就扩增了1000倍,20个循环就扩增了

100万倍,30个循环就扩增了10亿倍。

43.最有效的制备纯RNA的方法是让其在细胞中超表达,然后提纯。

44.大量制备已被克隆基因编码蛋白产物的常用方法是体外转录和翻译。 45.简并引物是根据已知DNA序列设计的引物群。

46.在DNA贮存液中加一滴三氯甲烷,可防止真菌的污染。

47.密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。

48.酚法和碱法分离质粒DNA都要用溶菌酶破壁,但碱法用的溶菌酶的浓度要高。

49.在Northern杂交中,为了防止RNA形成部分环状发夹结构影响迁移率,所以要用变性缓冲液进行电泳。 50.Northern印迹和Southern印迹的基本原理是—样的,都是用于检测结构基因的表达。

(五)问答题

1. (1)T7噬菌体DNA,其双螺旋链的相对分子质量为2.5×107。计算DNA链的长度(设核苷酸对的平均相对分子质量为650)。

(2)相对分子质量为130×106的病毒DNA分子,每微米的质量是多少?

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